中文摘要 | 第4-6页 |
abstract | 第6-7页 |
第1章 引言 | 第12-23页 |
1.1 盐胁迫对植物的影响 | 第12-15页 |
1.1.1 盐胁迫影响植物种子萌发 | 第12-13页 |
1.1.2 盐胁迫影响植物的生长发育 | 第13-14页 |
1.1.3 盐胁迫影响植物的光合作用 | 第14-15页 |
1.2 盐胁迫相关途径 | 第15-18页 |
1.2.1 SOS信号转导途径 | 第16页 |
1.2.2 ABA信号通路 | 第16-17页 |
1.2.3 CDPK级联反应途径 | 第17页 |
1.2.4 MAPK级联反应途径 | 第17-18页 |
1.3 14 -3-3蛋白 | 第18-21页 |
1.3.1 14 -3-3蛋白的发现 | 第18页 |
1.3.2 14 -3-3蛋白的结构和功能 | 第18-19页 |
1.3.3 14 -3-3蛋白的保守性及异形体特异性 | 第19-20页 |
1.3.4 14 -3-3蛋白在盐胁迫中的功能 | 第20-21页 |
1.4 本研究的目的与意义 | 第21-23页 |
第2章 普通菜豆PvGF14a/g基因启动子分析 | 第23-38页 |
2.1 试验材料 | 第23-24页 |
2.1.1 植物材料 | 第23页 |
2.1.2 菌株及载体 | 第23页 |
2.1.3 主要工具酶及生化试剂 | 第23页 |
2.1.4 主要仪器设备 | 第23页 |
2.1.5 试验用培养基配制 | 第23-24页 |
2.2 试验方法 | 第24-31页 |
2.2.1 植物材料的培养 | 第24页 |
2.2.2 引物合成及序列分析 | 第24-25页 |
2.2.3 菜豆基因组DNA的提取 | 第25页 |
2.2.4 PvGF14g启动子克隆 | 第25-27页 |
2.2.5 载体的构建 | 第27-29页 |
2.2.6 拟南芥的遗传转化和转基因植株的筛选 | 第29-30页 |
2.2.7 GUS组织化学染色 | 第30-31页 |
2.3 结果 | 第31-36页 |
2.3.1 普通菜豆PvGF14g启动子的克隆 | 第31-33页 |
2.3.2 转基因植物的筛选 | 第33页 |
2.3.3 普通菜豆PvGF14g启动子分析 | 第33-36页 |
2.4 讨论 | 第36-37页 |
2.5 小结 | 第37-38页 |
第3章 普通菜豆PvGF14a/g在盐胁迫下的功能分析 | 第38-53页 |
3.1 试验材料 | 第38页 |
3.1.1 植物材料 | 第38页 |
3.1.2 菌株及载体 | 第38页 |
3.1.3 主要工具酶及生化试剂 | 第38页 |
3.1.4 主要仪器设备 | 第38页 |
3.2 试验方法 | 第38-43页 |
3.2.1 引物合成及测序 | 第38-39页 |
3.2.2 植物总RNA的提取和荧光定量PCR分析 | 第39-41页 |
3.2.3 PvGF14g基因的克隆 | 第41页 |
3.2.4 载体的构建 | 第41-42页 |
3.2.5 拟南芥的遗传转化和转基因植株的筛选 | 第42页 |
3.2.6 植物的萌发及生长表型观测 | 第42-43页 |
3.3 结果 | 第43-51页 |
3.3.1 普通菜豆PvGF14g基因的克隆 | 第43-44页 |
3.3.2 转基因植物的筛选 | 第44-45页 |
3.3.3 转基因株系基因相对表达量分析 | 第45-47页 |
3.3.4 盐胁迫下PvGF14a、PvGF14g基因的功能分析 | 第47-51页 |
3.4 讨论 | 第51-52页 |
3.5 小结 | 第52-53页 |
第4章 普通菜豆PvGF14a/g与PvSOS2的蛋白互作分析 | 第53-66页 |
4.1 试验材料 | 第53-54页 |
4.1.1 植物材料 | 第53页 |
4.1.2 菌株及载体 | 第53页 |
4.1.3 主要工具酶及生化试剂 | 第53页 |
4.1.4 主要仪器设备 | 第53页 |
4.1.5 试验用培养基的配制 | 第53-54页 |
4.2 试验方法 | 第54-58页 |
4.2.1 引物合成及序列分析 | 第54-55页 |
4.2.2 植物总RNA的提取和反转录 | 第55页 |
4.2.3 盐处理后PvSOS2基因表达量分析 | 第55页 |
4.2.4 菜豆PvSOS2基因的克隆 | 第55页 |
4.2.5 载体的构建 | 第55-56页 |
4.2.6 酵母双杂交试验 | 第56-57页 |
4.2.7 双分子荧光互补试验 | 第57-58页 |
4.3 结果 | 第58-64页 |
4.3.1 PvSOS2生物信息学分析和基因克隆 | 第58-61页 |
4.3.2 不同时间盐处理后PvSOS2的基因表达量变化 | 第61-62页 |
4.3.3 PvGF14a/g与PvSOS2的蛋白互作分析 | 第62-64页 |
4.4 讨论 | 第64-65页 |
4.5 小结 | 第65-66页 |
第5章 结论 | 第66-68页 |
5.1 PvGF14a、PvGF14g启动子驱动的gus基因在根、茎、叶、花、角果中表达,在种子中不表达 | 第66页 |
5.2 PvGF14a、PvGF14g负向调控盐胁迫下种子的萌发和幼苗的早期生长 | 第66页 |
5.3 PvGF14a、PvGF14g与菜豆PvSOS2具有相互作用 | 第66-67页 |
5.4 PvGF14a、PvGF14g具有异形体特异性 | 第67-68页 |
参考文献 | 第68-75页 |
作者简介 | 第75-76页 |
攻读硕士期间取得的成果 | 第76-77页 |
致谢 | 第77页 |