摘要 | 第6-8页 |
abstract | 第8-9页 |
英文缩略表 | 第13-14页 |
第一章 引言 | 第14-22页 |
1.1 昆虫嗅觉信号转导机制 | 第14-15页 |
1.2 昆虫OBPS研究进展 | 第15-18页 |
1.2.1 昆虫OBPs一般特征 | 第15页 |
1.2.2 昆虫OBPs种类及表达分布 | 第15-17页 |
1.2.3 昆虫OBPs的功能研究 | 第17页 |
1.2.4 昆虫OBPs三维结构与功能特性研究 | 第17-18页 |
1.3 蚜虫识别气味分子特性研究进展 | 第18-20页 |
1.3.1 识别蚜虫报警信息素及其类似物 | 第18-19页 |
1.3.2 EBF及类似物作用 | 第19-20页 |
1.3.3 蚜虫对植物挥发物及性信息素的识别特性 | 第20页 |
1.4 研究目的和意义 | 第20页 |
1.5 研究内容 | 第20-22页 |
第二章 麦长管蚜气味结合蛋白基因克隆 | 第22-33页 |
2.1 试验材料 | 第22-23页 |
2.1.1 供试昆虫 | 第22页 |
2.1.2 培养基配制 | 第22-23页 |
2.1.3 主要试剂 | 第23页 |
2.1.4 仪器设备 | 第23页 |
2.2 试验方法 | 第23-28页 |
2.2.1 总RNA提取 | 第23-24页 |
2.2.2 第一链cDNA合成 | 第24页 |
2.2.3 SaveOBPs引物的设计与合成 | 第24-26页 |
2.2.4 PCR扩增SaveOBPs | 第26-27页 |
2.2.5 PCR扩增产物胶回收 | 第27页 |
2.2.6 连接与转化 | 第27页 |
2.2.7 克隆菌株阳性克隆鉴定 | 第27-28页 |
2.3 结果与分析 | 第28-32页 |
2.3.1 RNA样品检测 | 第28页 |
2.3.2 SaveOBPsPCR扩增 | 第28-29页 |
2.3.3 PCR扩增产物胶回收 | 第29-30页 |
2.3.4 克隆菌株阳性克隆鉴定 | 第30-32页 |
2.4 结论与讨论 | 第32-33页 |
第三章 麦长管蚜气味结合蛋白原核表达及纯化 | 第33-54页 |
3.1 试验材料 | 第33-36页 |
3.1.1 培养基配制 | 第33页 |
3.1.2 主要试剂及溶液 | 第33-36页 |
3.1.3 仪器设备 | 第36页 |
3.2 试验方法 | 第36-42页 |
3.2.1 质粒小量提取 | 第36页 |
3.2.2 质粒双酶切 | 第36-37页 |
3.2.3 胶回收酶切片段 | 第37页 |
3.2.4 连接与转化 | 第37-38页 |
3.2.5 表达菌株阳性克隆鉴定 | 第38页 |
3.2.6 蛋白小量诱导表达 | 第38页 |
3.2.7 SDS-PAGE电泳检测 | 第38-39页 |
3.2.8 SaveOBPs重组蛋白大量表达 | 第39-40页 |
3.2.9 SaveOBPs重组蛋白纯化 | 第40-42页 |
3.2.10 蛋白浓度测定及鉴定 | 第42页 |
3.3 结果与分析 | 第42-52页 |
3.3.1 质粒酶切结果与分析 | 第42-45页 |
3.3.2 重组质粒阳性鉴定 | 第45-47页 |
3.3.3 SaveOBPs重组蛋白小量诱导表达结果分析 | 第47-48页 |
3.3.4 SaveOBPs重组蛋白大量表达与纯化结果分析 | 第48-49页 |
3.3.5 SaveOBPs重组蛋白浓度测定结果分析 | 第49页 |
3.3.6 SaveOBPs重组蛋白质谱鉴定结果分析 | 第49-52页 |
3.4 本章小结与讨论 | 第52-54页 |
第四章 麦长管蚜气味结合蛋白结合特性研究 | 第54-65页 |
4.1 .实验材料 | 第54-55页 |
4.1.1 SaveOBPs重组蛋白样品 | 第54页 |
4.1.2 主要试剂 | 第54-55页 |
4.1.3 主要仪器 | 第55页 |
4.2 试验方法 | 第55-58页 |
4.2.1 荧光探针饱和结合实验 | 第55页 |
4.2.2 .EBF类似物竞争结合实验 | 第55-57页 |
4.2.3 配体竞争结合实验 | 第57-58页 |
4.3 结果与分析 | 第58-63页 |
4.3.1 荧光探针饱和结合实验 | 第58-59页 |
4.3.2 EBF类似物竞争结合实验结果分析 | 第59-60页 |
4.3.3 配体竞争结合实验结果分析 | 第60-63页 |
4.4 结论与讨论 | 第63-65页 |
第五章 全文结论 | 第65-67页 |
参考文献 | 第67-75页 |
致谢 | 第75-77页 |
作者简历 | 第77页 |