CONTENTS | 第5-8页 |
摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
1 引言 | 第12-22页 |
1.1 旋毛虫与旋毛虫病 | 第12页 |
1.2 旋毛虫ES抗原 | 第12-13页 |
1.2.1 ES抗原的组成部分 | 第12-13页 |
1.2.2 ES抗原的免疫保护性 | 第13页 |
1.3 热休克蛋白 | 第13-16页 |
1.3.1 热休克蛋白的分类和生物学功能 | 第14页 |
1.3.2 HSP70与寄生虫的关系 | 第14-16页 |
1.4 ES抗原和HSP70诱导树突状细胞的免疫应答 | 第16-22页 |
1.4.1 树突状细胞与Toll样受体 | 第16-19页 |
1.4.2 ES抗原对树突状细胞的免疫调节 | 第19-20页 |
1.4.3 HSP70对树突状细胞的免疫调节 | 第20-21页 |
1.4.4 研究的目的和意义 | 第21-22页 |
2 材料和方法 | 第22-32页 |
2.1 材料 | 第22-24页 |
2.1.1 虫种和细胞系 | 第22页 |
2.1.2 主要试剂 | 第22页 |
2.1.3 主要溶液配制 | 第22-23页 |
2.1.4 主要仪器设备 | 第23-24页 |
2.1.5 主要应用软件 | 第24页 |
2.2 方法 | 第24-32页 |
2.2.1 旋毛虫肌幼虫的收集和ES抗原的制备 | 第24页 |
2.2.2 小鼠树突状细胞DC2.4的培养 | 第24页 |
2.2.3 TLR2、TLR4、NF-κB、AP-1和GAPDH荧光定量检测方法的建立 | 第24-28页 |
2.2.4 ES抗原对树突状细胞的增殖活力影响 | 第28页 |
2.2.5 不同浓度ES抗原对DC2.4细胞TLR4表达的影响 | 第28页 |
2.2.6 ES抗原诱导DC2.4细胞TLR4表达的时间效应 | 第28-29页 |
2.2.7 ES抗原对DC2.4细胞的免疫调节作用 | 第29-30页 |
2.2.8 HSP70对树突状细胞的增殖活力影响 | 第30页 |
2.2.9 不同浓度HSP70对DC2.4细胞TLR2表达的影响 | 第30页 |
2.2.10 HSP70诱导DC2.4细胞TLR2表达的时间效应 | 第30页 |
2.2.11 HSP70对DC2.4细胞的免疫调节 | 第30-31页 |
2.2.12 试验数据的分析和统计 | 第31-32页 |
3 结果 | 第32-50页 |
3.1 TLR2、TLR4、NF-κB、AP-1和GAPDH荧光定量检测方法的建立 | 第32-37页 |
3.1.1 标准品质粒的构建 | 第32-33页 |
3.1.2 GAPDH、TLR2、TLR4、NF-κB和AP-1荧光定量PCR检测方法的建立 | 第33-37页 |
3.2 ES抗原对树突状细胞的增殖活力影响 | 第37页 |
3.3 不同浓度ES抗原对DC2.4细胞TLR4表达的影响 | 第37页 |
3.4 ES抗原诱导DC2.4细胞TLR4表达的时间效应 | 第37-39页 |
3.5 ES抗原对DC2.4细胞的免疫调节 | 第39-43页 |
3.5.1 流式细胞术检测细胞表面标志分子CD80/CD86 | 第39-40页 |
3.5.2 荧光定量技术检测TLR4、NF-κB和AP-1 mRNA表达变化 | 第40-41页 |
3.5.3 Western blot检测NF-κB、MyD88、c-jun和p38/p-p38蛋白水平 | 第41-42页 |
3.5.4 ELISA测定细胞上清中细胞因子表达水平 | 第42-43页 |
3.6 HSP70对树突状细胞的增殖活力影响 | 第43-44页 |
3.7 不同浓度HSP70对DC2.4细胞TLR2表达的影响 | 第44页 |
3.8 HSP70诱导DC2.4细胞TLR2表达的时间效应 | 第44-45页 |
3.9 HSP70对DC2.4细胞的免疫调节作用 | 第45-50页 |
3.9.1 流式细胞术检测细胞表面标志分子CD80/CD86 | 第45页 |
3.9.2 荧光定量技术检测TLR2、NF-κB和AP-1 mRNA表达变化 | 第45-48页 |
3.9.3 Western blot检测NF-κB、MyD88、c-jun和p38/p-p38蛋白水平 | 第48页 |
3.9.4 ELISA测定细胞上清中细胞因子表达水平 | 第48-50页 |
4 讨论 | 第50-54页 |
4.1 ES抗原和HSP70对DC2.4活性调节 | 第50-51页 |
4.2 ES抗原对DC2.4细胞的免疫调节作用 | 第51-52页 |
4.3 HSP70对DC2.4细胞的免疫调节作用 | 第52-54页 |
5 结论 | 第54-55页 |
致谢 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-65页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第65页 |