首页--医药、卫生论文--妇产科学论文--产科学论文--病理妊娠(异常妊娠)论文--妊娠并发症论文--内分泌腺病及代谢病论文

性激素结合球蛋白对妊娠期糖尿病胰岛素传导通路相关因子的表达影响

摘要第4-7页
Abstract第7-10页
英文缩略语第11-19页
第一部分:妊娠期糖尿病SHBG表达及其与PI3K/Akt胰岛素抵抗传导通路相关因子的相关性分析第19-38页
    1 前言第19-20页
    2 材料与方法第20-22页
        2.1 试剂与仪器第20-22页
            2.1.1 主要试剂第20-21页
            2.1.2 主要仪器第21-22页
    3 实验方法第22-27页
        3.1 临床样本取材第22页
        3.2 分析妊娠期糖尿病和正常孕妇胎盘中SHBG及PI3K/Akt胰岛素抵抗传导通路相关因子mRNA的表达第22-24页
            3.2.1 设计引物第22-23页
            3.2.2 提取RNA第23页
            3.2.3 逆转录第23-24页
            3.2.4 REAL-TIMEPCR第24页
        3.3 分析妊娠期糖尿病和正常孕妇胎盘中SHBG及PI3K/Akt胰岛素抵抗传导通路相关因子蛋白的表达第24-26页
            3.3.1 蛋白样品制备第24页
            3.3.2 蛋白含量测定(BCA法)第24-25页
            3.3.3 SDS-PAGE电泳第25页
            3.3.4 转膜第25页
            3.3.5 免疫反应第25-26页
            3.3.6 化学发光,显影,定影第26页
            3.3.7 凝胶图象分析第26页
        3.4 统计学处理第26-27页
    4 结果第27-31页
        4.1 妊娠期糖尿病和正常孕妇胎盘中SHBG及PI3K/Akt胰岛素抵抗传导通路相关因子mRNA的表达第27-28页
        4.2 妊娠期糖尿病和正常孕妇胎盘中SHBG及PI3K/Akt胰岛素抵抗传导通路相关因子蛋白的表达第28-31页
        4.3 妊娠期糖尿病和正常孕妇胎盘中SHBG与PI3K/Akt胰岛素抵抗传导通路相关因子的相关性分析第31页
    5 小结第31-32页
    6 讨论第32-34页
    参考文献第34-38页
第二部分:建立胎盘滋养层合体细胞胰岛素抵抗细胞模型第38-48页
    1 前言第38-39页
    2 材料与方法第39页
        2.1 试剂与仪器第39页
            2.1.1 主要试剂第39页
            2.1.2 主要仪器第39页
    3 实验方法第39-41页
        3.1 HTR8-SVneo细胞培养第39-40页
        3.2 胎盘滋养层细胞胰岛素抵抗最佳作用浓度及时间确定第40页
            3.2.1 检测培养细胞上清液中的葡萄糖含量第40页
            3.2.2 检测人胎盘滋养细胞HTR-8/SVneo细胞存活率第40页
        3.3 胎盘滋养层细胞形态学变化第40-41页
        3.4 胎盘滋养层细胞胰岛素抵抗模型持续时间的研究第41页
        3.5 统计分析第41页
    4 结果第41-44页
        4.1 不同浓度胰岛素对胎盘滋养细胞葡萄糖消耗量的影响第41页
        4.2 不同浓度胰岛素对人胎盘滋养层细胞HTR-8/SVneo生存率的影响第41-42页
        4.3 10^-7mol/L胰岛素分别作用不同时间后对上清液中葡萄糖含量的影响第42页
        4.4 10^-7mol/L胰岛素浓度作用不同时间后对细胞生存率的影响第42-43页
        4.5 胎盘滋养层细胞胰岛素抵抗模型的稳定性第43页
        4.6 胎盘滋养层胰岛素抵抗模型细胞的形态学变化第43-44页
    5 小结第44页
    6 讨论第44-46页
    参考文献第46-48页
第三部分:胰岛素抵抗胎盘滋养层合体细胞中SHBG对胰岛素信号转导表达和胰岛素抵抗的影响第48-85页
    1 前言第48页
    2 材料与方法第48-50页
        2.1 试剂与仪器第48-50页
            2.1.1 主要试剂第48-49页
            2.1.2 主要仪器第49-50页
    3 实验方法第50-55页
        3.1 使用大提质粒试剂盒提取质粒第50页
            3.1.1 质粒第50页
            3.1.2 质粒小提第50页
        3.2 转染第50-51页
            3.2.1 细胞准备第51页
            3.2.2 筛选理想转染浓度及最佳转染持续时间第51页
        3.3 SHBG过表达对HTR8-SVneo细胞中PI3K/Akt胰岛素抵抗传导通路相关因子表达影响第51-52页
            3.3.1 用Real-TimePCR及检测SHBG、GLUT1、GLUT3、GLUT4、PI3K、IRS1、IRS2在正常细胞、模型细胞、转染后的各组细胞的表达第52页
            3.3.2 Westernblot第52页
        3.4 免疫荧光第52-53页
            3.4.1 实验分组第52页
            3.4.2 细胞荧光免疫步骤第52-53页
        3.5 细胞增殖实验第53页
            3.5.1 实验分组第53页
            3.5.2 实验步骤第53页
        3.6 观察转染过表达SHBG质粒对胰岛素抵抗模型细胞凋亡的影响第53-54页
            3.6.1 实验分组第53页
            3.6.2 凋亡检测第53-54页
        3.7 检测葡萄糖消耗量第54页
            3.7.1 实验分组第54页
            3.7.2 实验步骤第54页
        3.8 统计学处理第54-55页
    4 结果第55-77页
        4.1 提取高纯度DNA质粒第55页
        4.2 转染HTR8-SVneo胰岛素抵抗模型细胞第55-60页
        4.3 SHBG过表达对HTR8-SVneo胰岛素抵抗模型细胞中PI3K/Akt胰岛素抵抗传导通路相关因子表达影响第60-67页
            4.3.1 REAL-TIMEPCR第60-63页
            4.3.2 Westernbolt检测各组细胞中SHBG及PI3K/Akt胰岛素抵抗传导通路相关因子蛋白的表达第63-65页
            4.3.3 在HTR8/SVneo、胰岛素抵抗模型、Z24、Z48组中,SHBG与PI3K/Akt胰岛素抵抗传导通路相关因子的相关性分析第65-67页
        4.4 免疫荧光检测蛋白表达第67-75页
        4.5 转染过表达SHBG质粒对胰岛素抵抗模型的影响第75-76页
        4.6 转染过表达SHBG对胰岛素抵抗模型细胞凋亡的影响第76-77页
        4.7 转染过表达SHBG对胰岛素抵抗模型葡萄糖消耗量的影响第77页
    5 小结第77-78页
    6 讨论第78-82页
    参考文献第82-85页
创新性评价第85-86页
综述第86-95页
    参考文献第90-95页
在学期间科研成绩第95-96页
致谢第96-97页
个人简介第97页

论文共97页,点击 下载论文
上一篇:外阴硬化性苔癣相关蛋白的蛋白质组学研究及真皮病变相关因素的探讨
下一篇:TRPC3调控PLCγ/PKC/CPI-17信号通路在感染性早产中的作用及机制研究