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苹果B-box(BBX)家族和MdBBX10响应非生物胁迫的研究

中文摘要第8-10页
Abstract第10-12页
1 前言第13-21页
    1.1 植物转录因子的结构和功能第13-14页
        1.1.1 植物转录因子的结构第13页
        1.1.2 植物转录因子的分类和功能第13-14页
    1.2 BBX家族研究进展第14-16页
        1.2.1 BBX家族基因的发现、结构特点及分类第14-16页
        1.2.2 BBX转录因子的进化第16页
    1.3 BBX家族基因的功能研究第16-20页
        1.3.1 BBX蛋白在幼苗光形态建成中的作用第17页
        1.3.2 BBX蛋白在植物开花中的作用第17-18页
        1.3.3 BBX蛋白在避荫反应中的作用第18页
        1.3.4 BBX蛋白与非生物胁迫第18-20页
    1.4 本研究的目的意义第20-21页
2 材料与方法第21-39页
    2.1 实验材料第21-24页
        2.1.1 菌株和质粒第21页
        2.1.2 酶、试剂盒与各种试剂第21页
        2.1.3 引物第21-22页
        2.1.4 软件和数据库资源第22-23页
        2.1.5 主要试剂及培养基的配制第23-24页
    2.2 实验方法第24-39页
        2.2.1 苹果BBX基因的鉴定和分析第24-25页
        2.2.2 实时荧光定量PCR第25-27页
            2.2.2.1 植物材料及其处理第25-26页
            2.2.2.2 苹果总RNA的提取第26-27页
            2.2.2.3 RNA反转录第27页
            2.2.2.4 实时荧光定量PCR第27页
        2.2.3 MdBBX10原核表达载体的构建第27-33页
            2.2.3.1 MdBBX10的克隆第28-29页
            2.2.3.2 MdBBX10克隆载体的构建第29-30页
            2.2.3.3 MdBBX10原核表达载体的构建第30-32页
            2.2.3.4 MdBBX10突变体原核表达载体的构建第32-33页
        2.2.4 MdBBX10植物表达载体的构建第33-36页
            2.2.4.1 MdBBX10启动子的克隆第33-34页
            2.2.4.2 MdBBX10启动子载体的构建第34-35页
            2.2.4.3 MdBBX10-GFP植物表达载体的构建第35-36页
        2.2.5 超表达MdBBX10株系的获得第36-37页
            2.2.5.1 农杆菌介导的拟南芥花序浸染第36-37页
            2.2.5.2 拟南芥基因组DNA的微量提取第37页
            2.2.5.3 转基因植株的纯合体的获得第37页
        2.2.6 MdBBX10在转基因植株中的表达量第37-39页
            2.2.6.1 拟南芥总RNA的提取第37-38页
            2.2.6.2 cDNA反转录和荧光定量PCR第38-39页
3 结果与分析第39-60页
    3.1 在苹果基因组中鉴定得到64个BBX编码基因第39-40页
    3.2 MdBBX基因家族染色体定位第40-42页
    3.3 MdBBXs的保守结构域和系统进化分析第42-44页
    3.4 MdBBXs组织表达分析第44-45页
    3.5 MdBBXs启动子分析及胁迫响应分析第45-49页
    3.6 MdBBX10蛋白三维结构特征分析及胁迫响应分析第49-50页
    3.7 MdBBX10表达模式及亚细胞定位分析第50-52页
    3.8 MdBBX10抗逆功能分析第52-60页
        3.8.1 MdBBX10原核表达载体的构建第52页
        3.8.2 MdBBX10可以提高大肠杆菌细胞的抗胁迫能力第52-54页
        3.8.3 MdBBX10中保守的半胱氨酸对其抗胁迫功能影响第54-55页
        3.8.4 拟南芥超表达MdBBX10株系的获得第55页
        3.8.5 超表达MdBBX10可以增强转基因植株对非生物胁迫的抵抗力第55-57页
        3.8.6 MdBBX10参与脱落酸信号转导第57-58页
        3.8.7 MdBBX10参与胁迫条件下活性氧的代谢第58-60页
4 讨论第60-64页
5 结论第64-65页
参考文献第65-72页
致谢第72-73页
攻读学位期间发表的论文及成果第73页

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