中文摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
1 前言 | 第13-21页 |
1.1 植物转录因子的结构和功能 | 第13-14页 |
1.1.1 植物转录因子的结构 | 第13页 |
1.1.2 植物转录因子的分类和功能 | 第13-14页 |
1.2 BBX家族研究进展 | 第14-16页 |
1.2.1 BBX家族基因的发现、结构特点及分类 | 第14-16页 |
1.2.2 BBX转录因子的进化 | 第16页 |
1.3 BBX家族基因的功能研究 | 第16-20页 |
1.3.1 BBX蛋白在幼苗光形态建成中的作用 | 第17页 |
1.3.2 BBX蛋白在植物开花中的作用 | 第17-18页 |
1.3.3 BBX蛋白在避荫反应中的作用 | 第18页 |
1.3.4 BBX蛋白与非生物胁迫 | 第18-20页 |
1.4 本研究的目的意义 | 第20-21页 |
2 材料与方法 | 第21-39页 |
2.1 实验材料 | 第21-24页 |
2.1.1 菌株和质粒 | 第21页 |
2.1.2 酶、试剂盒与各种试剂 | 第21页 |
2.1.3 引物 | 第21-22页 |
2.1.4 软件和数据库资源 | 第22-23页 |
2.1.5 主要试剂及培养基的配制 | 第23-24页 |
2.2 实验方法 | 第24-39页 |
2.2.1 苹果BBX基因的鉴定和分析 | 第24-25页 |
2.2.2 实时荧光定量PCR | 第25-27页 |
2.2.2.1 植物材料及其处理 | 第25-26页 |
2.2.2.2 苹果总RNA的提取 | 第26-27页 |
2.2.2.3 RNA反转录 | 第27页 |
2.2.2.4 实时荧光定量PCR | 第27页 |
2.2.3 MdBBX10原核表达载体的构建 | 第27-33页 |
2.2.3.1 MdBBX10的克隆 | 第28-29页 |
2.2.3.2 MdBBX10克隆载体的构建 | 第29-30页 |
2.2.3.3 MdBBX10原核表达载体的构建 | 第30-32页 |
2.2.3.4 MdBBX10突变体原核表达载体的构建 | 第32-33页 |
2.2.4 MdBBX10植物表达载体的构建 | 第33-36页 |
2.2.4.1 MdBBX10启动子的克隆 | 第33-34页 |
2.2.4.2 MdBBX10启动子载体的构建 | 第34-35页 |
2.2.4.3 MdBBX10-GFP植物表达载体的构建 | 第35-36页 |
2.2.5 超表达MdBBX10株系的获得 | 第36-37页 |
2.2.5.1 农杆菌介导的拟南芥花序浸染 | 第36-37页 |
2.2.5.2 拟南芥基因组DNA的微量提取 | 第37页 |
2.2.5.3 转基因植株的纯合体的获得 | 第37页 |
2.2.6 MdBBX10在转基因植株中的表达量 | 第37-39页 |
2.2.6.1 拟南芥总RNA的提取 | 第37-38页 |
2.2.6.2 cDNA反转录和荧光定量PCR | 第38-39页 |
3 结果与分析 | 第39-60页 |
3.1 在苹果基因组中鉴定得到64个BBX编码基因 | 第39-40页 |
3.2 MdBBX基因家族染色体定位 | 第40-42页 |
3.3 MdBBXs的保守结构域和系统进化分析 | 第42-44页 |
3.4 MdBBXs组织表达分析 | 第44-45页 |
3.5 MdBBXs启动子分析及胁迫响应分析 | 第45-49页 |
3.6 MdBBX10蛋白三维结构特征分析及胁迫响应分析 | 第49-50页 |
3.7 MdBBX10表达模式及亚细胞定位分析 | 第50-52页 |
3.8 MdBBX10抗逆功能分析 | 第52-60页 |
3.8.1 MdBBX10原核表达载体的构建 | 第52页 |
3.8.2 MdBBX10可以提高大肠杆菌细胞的抗胁迫能力 | 第52-54页 |
3.8.3 MdBBX10中保守的半胱氨酸对其抗胁迫功能影响 | 第54-55页 |
3.8.4 拟南芥超表达MdBBX10株系的获得 | 第55页 |
3.8.5 超表达MdBBX10可以增强转基因植株对非生物胁迫的抵抗力 | 第55-57页 |
3.8.6 MdBBX10参与脱落酸信号转导 | 第57-58页 |
3.8.7 MdBBX10参与胁迫条件下活性氧的代谢 | 第58-60页 |
4 讨论 | 第60-64页 |
5 结论 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-72页 |
致谢 | 第72-73页 |
攻读学位期间发表的论文及成果 | 第73页 |