| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 1 前言 | 第9-20页 |
| 1.1 聚γ-谷氨酸的性质及其应用 | 第9-11页 |
| 1.1.1 聚γ-谷氨酸的性质 | 第9-10页 |
| 1.1.2 聚γ-谷氨酸的应用 | 第10-11页 |
| 1.2 聚γ-谷氨酸的微生物合成 | 第11-13页 |
| 1.2.1 合成聚γ-谷氨酸的微生物 | 第11-13页 |
| 1.2.2 聚γ-谷氨酸合成的相关基因 | 第13页 |
| 1.3 聚γ-谷氨酸降解酶 | 第13-17页 |
| 1.3.1 聚γ-谷氨酸降解酶的性质 | 第14-17页 |
| 1.3.2 聚γ-谷氨酸降解酶的作用 | 第17页 |
| 1.4 低分子量聚γ-谷氨酸对发酵生产的影响 | 第17-18页 |
| 1.5 地衣芽胞杆菌转化和基因表达 | 第18-19页 |
| 1.6 研究目的与意义 | 第19-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-30页 |
| 2.1 实验材料 | 第20-24页 |
| 2.1.1 菌株与质粒 | 第20-21页 |
| 2.1.2 培养基、培养温度及抗生素使用浓度 | 第21页 |
| 2.1.3 PCR引物 | 第21-23页 |
| 2.1.4 工具酶及试剂 | 第23页 |
| 2.1.5 各种抽提液 | 第23页 |
| 2.1.6 实验仪器 | 第23-24页 |
| 2.2 实验方法 | 第24-30页 |
| 2.2.1 核酸水平操作 | 第24-26页 |
| 2.2.2 重组质粒转化 | 第26-27页 |
| 2.2.3 摇瓶发酵培养条件 | 第27-28页 |
| 2.2.4 分析方法 | 第28-30页 |
| 3 结果与分析 | 第30-45页 |
| 3.1 表达质粒pHY300-SYA的构建 | 第30-31页 |
| 3.2 表达质粒pHY300-PYA的构建 | 第31-33页 |
| 3.3 整合质粒pDG780-YA及pNNB194-kanr-YA的构建 | 第33-36页 |
| 3.4 γ-PGA降解酶加强表达菌株的构建 | 第36-38页 |
| 3.5 γ-PGA降解酶基因敲除载体的电转化 | 第38-39页 |
| 3.6 表达载体pHY300-SYA和pHY300-PYA在B.licheniformis中的稳定性 | 第39页 |
| 3.7 酶活OD_(570)检测γ-PGA降解酶基因的加强表达 | 第39-40页 |
| 3.8 SDS-PAGE检测γ-PGA降解酶基因的加强表达 | 第40-41页 |
| 3.9 B.licheniformis SYA2的摇瓶发酵 | 第41-42页 |
| 3.10 B.licheniformis PYA3的摇瓶发酵 | 第42-45页 |
| 4 讨论与展望 | 第45-47页 |
| 参考文献 | 第47-56页 |
| 附录 | 第56-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 在读期间发表论文 | 第58页 |
