| 本研究创新点 | 第5-9页 |
| 中文摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-12页 |
| 第一章 研究背景 | 第13-47页 |
| 1. 酿酒酵母菌丝形成 | 第13-25页 |
| 1.1 酿酒酵母的假菌丝形成和侵入性生长 | 第13页 |
| 1.2 酿酒酵母的假菌丝形成条件 | 第13-14页 |
| 1.3 酿酒酵母假菌丝形成和侵入性生长的调控机制 | 第14-25页 |
| 2. 白色念珠菌菌丝形成 | 第25-37页 |
| 2.1 白色念珠菌的菌丝形成 | 第25页 |
| 2.2 白色念珠菌菌丝形成的条件 | 第25-26页 |
| 2.3 白色念珠菌菌丝形成的调控机制 | 第26-37页 |
| 3. 解脂耶氏酵母菌丝形成 | 第37-45页 |
| 3.1 解脂耶氏酵母简介 | 第37-38页 |
| 3.2 解脂耶氏酵母的菌丝形成 | 第38-39页 |
| 3.3 解脂耶氏酵母的菌丝形成条件 | 第39-42页 |
| 3.4 解脂耶氏酵母菌丝形成的调控分子 | 第42-43页 |
| 3.5 解脂耶氏酵母的定向基因敲除和随机插入突变筛选 | 第43-44页 |
| 3.6 在解脂耶氏酵母中研究菌丝形成的特色 | 第44-45页 |
| 4. 本课题研究的目的、内容和意义 | 第45-47页 |
| 4.1 研究目的 | 第45页 |
| 4.2 研究内容 | 第45-46页 |
| 4.3 研究意义 | 第46-47页 |
| 第二章 解脂耶氏酵母中菌丝形成相关基因同源基因的功能研究 | 第47-96页 |
| 1. 实验材料 | 第48-52页 |
| 1.1 本部分所用的菌株及质粒 | 第48-50页 |
| 1.2 药品与试剂 | 第50页 |
| 1.3 培养基和溶液的制备 | 第50-52页 |
| 2. 实验方法 | 第52-57页 |
| 2.1 解脂耶氏酵母的基因敲除 | 第52-53页 |
| 2.2 酵母转化 | 第53-54页 |
| 2.3 解脂耶氏酵母的培养及显微镜观察 | 第54页 |
| 2.4 解脂耶氏酵母基因的过量表达 | 第54页 |
| 2.5 半乳糖苷酶活性测定 | 第54-56页 |
| 2.6 侵入性生长分析 | 第56页 |
| 2.7 基因的定点突变 | 第56-57页 |
| 3. 实验结果 | 第57-89页 |
| 3.1 YlTEC1在菌丝形成过程中的功能研究 | 第57-72页 |
| 3.1.1 YlTEC1的分离与鉴定 | 第57-60页 |
| 3.1.2 YlTEC1的敲除及其缺失突变体的表型鉴定 | 第60-65页 |
| 3.1.3 YlTEC1的过量表达研究 | 第65页 |
| 3.1.4 YlTec1p的胞内定位研究 | 第65-67页 |
| 3.1.5 YlTec1p的转录调控活性研究 | 第67-68页 |
| 3.1.6 YlTec1p与MAPK通路和cAMP-PKA通路之间的关系研究 | 第68-70页 |
| 3.1.7 YlTec1p可能调控的靶基因的分离与鉴定 | 第70-72页 |
| 3.2 解脂耶氏酵母YlSTE12在菌丝形成过程中的功能研究 | 第72-86页 |
| 3.2.1 YlSTE12的分离与鉴定 | 第72页 |
| 3.2.2 YlSTE12的定向敲除及其缺失突变体的表型鉴定 | 第72-75页 |
| 3.2.3 YlSTE12的过量表达研究 | 第75页 |
| 3.2.4 YlSte12p和YlTec1p之间的相互关系研究 | 第75-77页 |
| 3.2.5 YlSte12的胞内定位研究 | 第77-78页 |
| 3.2.6 YlSte12p与MAPK通路和cAMP-PKA通路之间的关系研究 | 第78-80页 |
| 3.2.7 YlSte12p与蛋白质激酶YlKss1p之间的关系研究 | 第80-85页 |
| 3.2.8 YIStel2p的转录调控活性研究 | 第85-86页 |
| 3.3 其他菌丝形成相关基因在解脂耶氏酵母中的功能研究 | 第86-89页 |
| 3.3.1 YlHOG1基因功能的研究 | 第86-88页 |
| 3.3.2 YlHOG1、YlFL08、YlPHD1和YlSOK2等基因的过量表达研究 | 第88-89页 |
| 4. 讨论 | 第89-94页 |
| 4.1 YlTec1p在菌丝形成过程中的调控作用及方式 | 第89-91页 |
| 4.1.1 YlTec1p与Tec1p和CaTec1p之间的功能相似性 | 第89-90页 |
| 4.1.2 YlTec1p在菌丝形成过程中的抑制作用 | 第90-91页 |
| 4.1.3 YlTec1p在菌丝形成过程中的被调控方式 | 第91页 |
| 4.2 YlSte12p在菌丝形成过程中的调控作用及方式 | 第91-93页 |
| 4.2.1 YlSte12p在菌丝形成过程中的抑制作用 | 第91-92页 |
| 4.2.2 YlSte12p在菌丝形成过程中的被调控方式 | 第92-93页 |
| 4.2.3 转录因子YlSte12p与蛋白质激酶YlKss1p之间的关系 | 第93页 |
| 4.3 其他菌丝形成相关基因在解脂耶氏酵母菌丝形成过程中的作用 | 第93-94页 |
| 5. 小结 | 第94-96页 |
| 第三章 随机插入突变筛选菌丝形成相关基因及其功能研究 | 第96-123页 |
| 1. 实验材料 | 第96-98页 |
| 1.1 实验所用的菌株及质粒 | 第96-97页 |
| 1.2 药品与试剂 | 第97-98页 |
| 1.3 培养基和溶液的制备 | 第98页 |
| 2. 实验方法 | 第98-108页 |
| 2.1 zeta介导的随机插入突变元件(MTC)的构建 | 第98-100页 |
| 2.2 酵母总DNA的提取方法 | 第100页 |
| 2.3 插入突变基因的鉴定 | 第100-106页 |
| 2.4 解脂耶氏酵母YlSFL1基因的Pop-in/pop-out法定向敲除 | 第106-108页 |
| 3. 实验结果 | 第108-119页 |
| 3.1 菌丝形成缺陷突变体的筛选及突变基因的鉴定 | 第108-111页 |
| 3.2 hyp166的鉴定 | 第111-113页 |
| 3.3 YlSFL1的敲除及其缺失突变体的表型鉴定 | 第113-116页 |
| 3.4 YlSFL1的过量表达研究 | 第116页 |
| 3.5 YlSfl1p与YlTpk1p之间的关系研究 | 第116-117页 |
| 3.6 YlSfl1p潜在磷酸化位点的分析研究 | 第117-119页 |
| 3.7 YlSfl1p与YlStel1p之间的关系研究 | 第119页 |
| 4. 讨论 | 第119-122页 |
| 4.1 zeta介导的随机插入突变 | 第119-120页 |
| 4.2 YlSfl1p的菌丝形成促进功能 | 第120页 |
| 4.3 YlSfl1p被调控的方式 | 第120-122页 |
| 5. 小结 | 第122-123页 |
| 研究总结及展望 | 第123-125页 |
| 参考文献 | 第125-139页 |
| 在读期间已发表论文 | 第139-140页 |
| 致谢 | 第140页 |
