| 致谢 | 第6-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 目录 | 第12-15页 |
| 图表目录 | 第15-16页 |
| 第一篇 文献综述 | 第16-44页 |
| 第1章 植物修复技术与超积累植物 | 第16-37页 |
| 1.1 引言 | 第16-17页 |
| 1.2 重金属与植物修复 | 第17-20页 |
| 1.2.1 植物修复的概念和主要类型 | 第17-18页 |
| 1.2.2 重金属在植物体内的的吸收、运输与转化 | 第18-20页 |
| 1.3 超积累植物的耐性与积累机理与植物修复技术 | 第20-31页 |
| 1.3.1 超积累植物的发现及定义 | 第20-22页 |
| 1.3.2 超积累植物对重金属毒害的耐性及解毒机制 | 第22-31页 |
| 1.4 构建转基因植物用于污染物修复的研究进展 | 第31-35页 |
| 1.4.1 植物的内稳系统因子 | 第32-35页 |
| 1.4.2 跨膜金属载体的应用 | 第35页 |
| 1.5 研究展望 | 第35-37页 |
| 第2章 OPT蛋白家族的研究进展 | 第37-44页 |
| 2.1 OPTs的转运底物 | 第38-40页 |
| 2.1.1 OPTs对小分子肽的转运 | 第38-39页 |
| 2.1.2 OPTs对GSH、PCs的转运 | 第39页 |
| 2.1.3 OPTs对金属及金属复合物的转运 | 第39-40页 |
| 2.2 植物中的OPT家族成员研究进展 | 第40-41页 |
| 2.2.1 拟南芥中的OPT家族成员 | 第40页 |
| 2.2.2 水稻中的OPT家族成员 | 第40-41页 |
| 2.3 ATOPT3研究进展 | 第41-44页 |
| 第二篇 研究内容 | 第44-93页 |
| 第3章 超积累植物遏蓝菜中OPT3的分子克隆 | 第44-60页 |
| 3.1 引言 | 第44-45页 |
| 3.2 材料与方法 | 第45-52页 |
| 3.2.1 植物培养 | 第45页 |
| 3.2.2 菌株与载体 | 第45-46页 |
| 3.2.3 主要化学与生物试剂 | 第46页 |
| 3.2.4 兼并引物设计与RT-PCR | 第46页 |
| 3.2.5 RACE扩增目的基因全长片段 | 第46-47页 |
| 3.2.6 RACE与RT-PCR | 第47页 |
| 3.2.7 生物信息学分析 | 第47-48页 |
| 3.2.8 半定量RT-PCR | 第48页 |
| 3.2.9 实时定量PCR | 第48页 |
| 3.2.10 原位杂交 | 第48-49页 |
| 3.2.11 洋葱表皮的亚细胞定位 | 第49-52页 |
| 3.3 结果 | 第52-58页 |
| 3.3.1 目的基因的获得,碱基序列及氨基酸序列分析 | 第52-54页 |
| 3.3.2 同源序列比对 | 第54-56页 |
| 3.3.3 TcOPT3在组织和器官中的表达分析 | 第56-58页 |
| 3.3.4 TcOPT3的亚细胞定位 | 第58页 |
| 3.4 讨论 | 第58-60页 |
| 第4章 TcOPT3的功能研究 | 第60-70页 |
| 4.1 引言 | 第60页 |
| 4.2 材料与方法 | 第60-62页 |
| 4.2.1 菌株与载体 | 第60-61页 |
| 4.2.2 实时定量PCR | 第61页 |
| 4.2.3 酵母功能验证 | 第61-62页 |
| 4.3 结果 | 第62-66页 |
| 4.3.1 缺Fe,缺Zn胁迫对TcOPT3基因表达的响应 | 第62-63页 |
| 4.3.2 酵母互补功能验证 | 第63-64页 |
| 4.3.3 TcOPT3对重金属耐性和积累的影响 | 第64-66页 |
| 4.4 讨论 | 第66-70页 |
| 4.4.1 TcOPT3具有转运金属离子的能力 | 第66-67页 |
| 4.4.2 TcOPT3在金属的长距离运输中的可能作用 | 第67-70页 |
| 第5章 转柠檬酸合酶烟草对于铅耐性的提高 | 第70-90页 |
| 5.1 引言 | 第70-71页 |
| 5.2 材料和方法 | 第71-75页 |
| 5.2.1 植物材料 | 第71页 |
| 5.2.2 植物培养 | 第71-72页 |
| 5.2.3 转基因烟草的分子鉴定 | 第72-73页 |
| 5.2.4 转基因烟草柠檬酸合酶活性测定 | 第73-74页 |
| 5.2.5 转基因烟草柠檬酸含量及分泌测定 | 第74页 |
| 5.2.6 野生型烟草外源添加柠檬酸的耐性实验 | 第74页 |
| 5.2.7 Evans Blue染色 | 第74-75页 |
| 5.2.8 重金属亚细胞分布的测定 | 第75页 |
| 5.2.9 重金属含量测定 | 第75页 |
| 5.3 结果 | 第75-87页 |
| 5.3.1 OsCS1在转基因株系CS42的表达 | 第75-77页 |
| 5.3.2 转CS基因植物表现出对Pb胁迫耐性的提高 | 第77-79页 |
| 5.3.3 转基因植物对重金属胁迫的响应机理 | 第79-82页 |
| 5.3.4 野生型植物对Pb胁迫响应机理验证 | 第82-83页 |
| 5.3.5 水培条件下转CS基因植物中重金属含量的分布变化 | 第83-87页 |
| 5.4 讨论 | 第87-90页 |
| 5.4.1 转基因植物对Pb耐性的提高可能是由于柠檬酸分泌的增多 | 第87页 |
| 5.4.2 转基因株系从根部到地上部转运能力的提高 | 第87-90页 |
| 第6章 全文总结、创新点及研究展望 | 第90-93页 |
| 6.1 主要研究结论 | 第90页 |
| 6.2 创新点 | 第90-91页 |
| 6.3 研究展望 | 第91-93页 |
| 参考文献 | 第93-116页 |
| 附录 本论文中出现的缩写及中英文对照 | 第116-117页 |
| 作者简历及攻读博士期间论文发表情况 | 第117页 |
