摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-13页 |
前言 | 第13页 |
1 文献综述 | 第13-23页 |
·ChREBP的发现 | 第13-14页 |
·ChREBP蛋白的结构特征与活性调节 | 第14-17页 |
·ChREBP的功能区 | 第14-15页 |
·ChREBP蛋白的活性调节 | 第15-17页 |
·ChREBP的组织表达特性 | 第17页 |
·ChREBP的功能研究 | 第17-19页 |
·在糖酵解和脂肪合成中的作用 | 第17-19页 |
·其他作用 | 第19页 |
·影响ChREBP表达的因素 | 第19-21页 |
·营养和激素 | 第19-21页 |
·药物 | 第21页 |
·ChREBP基因的表达调控 | 第21-22页 |
·本实验的目的及意义 | 第22-23页 |
2 材料与方法 | 第23-36页 |
·实验动物饲养与样品的采集 | 第23-24页 |
·实验材料 | 第23页 |
·填饲的饲养管理 | 第23页 |
·血样的采集与处理 | 第23-24页 |
·组织样品采集 | 第24页 |
·实验主要仪器与试剂 | 第24-27页 |
·主要实验仪器 | 第24-25页 |
·主要试剂盒与试剂 | 第25页 |
·主要试剂配制 | 第25-27页 |
·测定指标及测定方法 | 第27-30页 |
·肝组织生化指标的测定 | 第27页 |
·血浆参数的测定 | 第27页 |
·基因mRNA表达检测 | 第27-30页 |
·鹅ChREBP基因5’-RACE和3’-RACE | 第30-34页 |
·5’-RACE-Ready cDNA和3’-RACE-Ready cDNA的合成 | 第30-31页 |
·3’-RACE | 第31-32页 |
·5’-RACE | 第32页 |
·RACE产物的克隆及重组质粒的筛选和鉴定 | 第32-34页 |
·序列的生物信息学分析 | 第34页 |
·细胞水平检测 | 第34-35页 |
·细胞培养 | 第34-35页 |
·MTT比色法测细胞活性 | 第35页 |
·TG含量的检测 | 第35页 |
·基因表达检测 | 第35页 |
·肝细胞总RNA的提取 | 第35页 |
·被检测基因的引物设计与合成 | 第35页 |
·实时定量引物特异性性的检测与鉴定 | 第35页 |
·反转录和实时荧光定量PCR | 第35页 |
·数据的统计分析 | 第35-36页 |
3. 结果与分析 | 第36-51页 |
·构建SSH文库筛选差异表达的基因ChREBP | 第36页 |
·实时定量鉴定ChREBP差异表达 | 第36-37页 |
·RACE技术获得ChREBP基因全长 | 第37-38页 |
·3’-RACE结果与分析 | 第37页 |
·5’-RACE结果与分析 | 第37-38页 |
·全长ChREBP的拼接与鉴定 | 第38页 |
·ChREBP基因的生物信息学分析 | 第38-45页 |
·核苷酸水平上的分析 | 第38-39页 |
·氨基酸水平上的分析 | 第39-45页 |
·ChREBP基因组织表达及填饲对其在鹅肝脏中表达的影响 | 第45-47页 |
·组织表达分布 | 第45-46页 |
·填饲14天对ChREBP基因在鹅肝脏中表达的影响 | 第46页 |
·ChREBP基因在肝脏中的表达与血浆参数、肝内TG的相关分析 | 第46-47页 |
·葡萄糖、胰岛素和LXR激动剂对ChREBP基因表达的影响 | 第47-51页 |
·葡萄糖、胰岛素和LXR激动剂对鹅原代肝细胞的影响 | 第47-48页 |
·葡萄糖、胰岛素和LXRα激动剂对鹅原代肝细胞TG沉积的影响 | 第48-50页 |
·葡萄糖、胰岛素和LXR激动剂对ChREBP表达的影响 | 第50-51页 |
4 讨论 | 第51-58页 |
·ChREBP的cDNA全长克隆及生物信息学分析 | 第51-52页 |
·ChREBP基因在鹅各组织中的表达差异 | 第52页 |
·填饲对鹅肝组织中ChREBP基因表达的影响 | 第52-54页 |
·胰岛素对鹅原代肝细胞中ChREBP表达的影响 | 第54-55页 |
·葡萄糖对鹅原代肝细胞中ChREBP表达的影响 | 第55-56页 |
·LXR激动剂T0901317对ChREBP表达的影响 | 第56页 |
·脂肪酸对ChREBP基因表达的影响 | 第56-58页 |
5 结论 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-68页 |
致谢 | 第68-69页 |
附录:硕士研究生学习期间参与的科研项目和发表文章 | 第69页 |