| 摘要 | 第3-4页 |
| ABSTRACT | 第4页 |
| 第1章 文献综述 | 第8-20页 |
| 1.1 生物体内氧化平衡机制 | 第8-13页 |
| 1.1.1 活性氧 | 第8-9页 |
| 1.1.2 脂质过氧化 | 第9页 |
| 1.1.3 过氧化物酶体 | 第9-10页 |
| 1.1.4 生物体内的氧化平衡 | 第10页 |
| 1.1.5 过氧化氢酶 | 第10-11页 |
| 1.1.6 超氧化物歧化酶 | 第11-12页 |
| 1.1.7 谷胱甘肽过氧化物酶 | 第12页 |
| 1.1.8 硫氧还蛋白过氧化物酶 | 第12-13页 |
| 1.2 微囊藻毒素 | 第13-14页 |
| 1.3 热休克蛋白 | 第14-18页 |
| 1.3.1 HSP90家族 | 第15-16页 |
| 1.3.2 HSP70家族 | 第16-17页 |
| 1.3.3 HSP60家族 | 第17页 |
| 1.3.4 小热休克蛋白家族 | 第17-18页 |
| 1.4 本实验的目的及意义 | 第18-20页 |
| 第2章 不同浓度藻毒素胁迫下抗氧化基因的表达 | 第20-34页 |
| 2.1 材料与方法 | 第20-24页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第20-21页 |
| 2.1.2 实验仪器 | 第21页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第21页 |
| 2.1.4 组织总RNA的提取 | 第21-22页 |
| 2.1.5 M-MLV cDNA的合成 | 第22页 |
| 2.1.6 Real time PCR检测SOD、CAT、GPX、TPX在褶纹冠蚌的组织分布 | 第22-23页 |
| 2.1.7 Real time PCR检测微囊藻毒素胁迫下对SOD、CAT、GPX、TPX表达的影响 | 第23-24页 |
| 2.2 结果 | 第24页 |
| 2.2.1 褶纹冠蚌肝胰腺中总RNA纯度 | 第24页 |
| 2.3 Real time PCR检测SOD、CAT、GPX、TPX在褶纹冠蚌组织中分布 | 第24-27页 |
| 2.3.1 SOD基因在蚌组织中的分布 | 第24-25页 |
| 2.3.2 CAT基因在蚌组织中的分布 | 第25-26页 |
| 2.3.3 GPX基因在蚌组织中的分布 | 第26页 |
| 2.3.4 TPX基因在蚌组织中的分布 | 第26-27页 |
| 2.4 Real time PCR检测微囊藻毒素胁迫下对SOD、CAT、GPX、TPX表达的影响 | 第27-32页 |
| 2.4.1 不同浓度微囊藻毒素刺激下SOD基因的表达变化 | 第27-28页 |
| 2.4.2 不同浓度微囊藻毒素刺激下CAT基因的表达变化 | 第28-30页 |
| 2.4.3 不同浓度微囊藻毒素刺激下GPX基因的表达变化 | 第30-31页 |
| 2.4.4 不同浓度微囊藻毒素刺激下TPX基因的表达变化 | 第31-32页 |
| 2.6 讨论 | 第32-34页 |
| 第3章 三角帆蚌热休克蛋白60、70基因克隆及表达 | 第34-60页 |
| 3.1 实验材料 | 第34页 |
| 3.2 实验方法 | 第34-41页 |
| 3.2.1 三角帆蚌总RNA提取 | 第35页 |
| 3.2.2 褶纹冠蚌SMART cDNA合成 | 第35-36页 |
| 3.2.3 DH5α感受态的制备 | 第36-37页 |
| 3.2.4 HcHSP60基因3'末端和5'末端cDNA扩增 | 第37-39页 |
| 3.2.5 HSP60基因的生物信息学分析 | 第39-40页 |
| 3.2.6 HSP60蛋白一级结构分析 | 第40页 |
| 3.2.7 HSP60蛋白质二级结构预测 | 第40页 |
| 3.2.8 HSP60蛋白三级结构预测 | 第40页 |
| 3.2.9 HSP60和HSP70在蚌组织的半定量表达 | 第40-41页 |
| 3.2.10 冷热应激后HSP60和HSP70的表达分析 | 第41页 |
| 3.3 实验结果 | 第41-57页 |
| 3.3.1 三角帆蚌RNA总浓度 | 第41-42页 |
| 3.3.2 三角帆蚌HSP60基因cDNA全长 | 第42页 |
| 3.3.3 三角帆蚌HSP60基因的cDNA全长及序列鉴定 | 第42-47页 |
| 3.3.4 HSP60的系统进化树 | 第47-48页 |
| 3.3.5 HSP60基因蛋白一级结构分析 | 第48-49页 |
| 3.3.6 HSP60基因蛋白二级结构预测和功能预测 | 第49-52页 |
| 3.3.7 HSP60蛋白三级结构分析 | 第52-54页 |
| 3.3.8 三角帆蚌HSP70和HSP60在不同组织中的表达 | 第54-56页 |
| 3.3.9 冷热应激后HSP70和HSP60在各组织表达情况 | 第56-57页 |
| 3.4 讨论 | 第57-60页 |
| 第4章 结论和展望 | 第60-62页 |
| 4.1 结论 | 第60-61页 |
| 4.2 展望 | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-71页 |
