| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 符号说明 | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第10-16页 |
| 2 材料与方法 | 第16-28页 |
| 2.1 材料 | 第16-22页 |
| 2.1.1 细胞系 | 第16页 |
| 2.1.2 主要抗体 | 第16页 |
| 2.1.3 主要试剂和试剂盒 | 第16-17页 |
| 2.1.4 引物和shRNA寡核苷酸序列 | 第17-18页 |
| 2.1.5 质粒 | 第18-21页 |
| 2.1.6 主要仪器 | 第21-22页 |
| 2.2 实验方法 | 第22-28页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第22页 |
| 2.2.2 细胞转染 | 第22-23页 |
| 2.2.3 CheckMate~(TM) Mammalian Two-Hybrid系统分析蛋白与蛋白的结合 | 第23-24页 |
| 2.2.4 荧光素酶报告基因活性分析 | 第24页 |
| 2.2.5 免疫沉淀和免疫印迹技术 | 第24-25页 |
| 2.2.6 荧光显微镜技术 | 第25页 |
| 2.2.7 生物信息学方法预测STAT2潜在的磷酸化位点 | 第25页 |
| 2.2.8 体外激酶试验 | 第25-26页 |
| 2.2.9 XTT法检测THP-1细胞贴壁率 | 第26页 |
| 2.2.10 流式细胞仪术检测THP-1分化的细胞形态学改变 | 第26页 |
| 2.2.11 构建pGEX-NFAT3 Del原核表达质粒 | 第26-27页 |
| 2.2.12 构建沉默内源性SRK2和STAT2基因表达的小分子干扰RNA真核表达质粒 | 第27页 |
| 2.2.13 胞浆胞核蛋白分离 | 第27页 |
| 2.2.14 统计学处理 | 第27-28页 |
| 3 结果 | 第28-39页 |
| 3.1 RSK2结合STAT2 | 第28-30页 |
| 3.1.1 CheckMate~(TM) Mammalian Two-Hybrid系统结合报道基因分析证实RSK2与STAT2结合 | 第28页 |
| 3.1.2 免疫共沉淀和免疫印迹技术分析进一步证明RSK2与STAT2结合 | 第28-29页 |
| 3.1.3 RSK2通过N端结合STAT2 | 第29-30页 |
| 3.2 RSK2促进STAT2反式转录活性 | 第30页 |
| 3.3 RSK2促进STAT2核移位 | 第30-31页 |
| 3.3.1 荧光显微镜技术证实RSK2促进STAT2核移位 | 第30-31页 |
| 3.3.2 分离胞浆胞核蛋白结合免疫印迹技术分析证实RSK2促进STAT2核移位 | 第31页 |
| 3.4 活化的RSK2使STAT2发生丝氨酸/苏氨酸磷酸化 | 第31-36页 |
| 3.4.1 生物信息学方法预测STAT2潜在的丝氨酸/苏氨酸磷酸化位点 | 第32-33页 |
| 3.4.2 体外激酶实验证明活化的RSK2使STAT2发生丝氨酸/苏氨酸磷酸化 | 第33-35页 |
| 3.4.3 细胞内实验证明活化的RSK2使STAT2发生丝氨酸/苏氨酸磷酸化 | 第35-36页 |
| 3.5 RSK2通过活化STAT2促进单核细胞THP-1的分化 | 第36-39页 |
| 3.5.1 活化的RSK2通过STAT2促进THP-1细胞分化的形态学改变 | 第36-38页 |
| 3.5.2 活化的RSK2促进STAT2介导的THP-1细胞贴壁 | 第38-39页 |
| 4 讨论 | 第39-41页 |
| 5 结论 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-45页 |
| 综述 | 第45-57页 |
| 参考文献 | 第53-57页 |
| 攻读学位期间主要的研究成果 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58页 |
