摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
英文缩略表 | 第13-14页 |
第一章 引言 | 第14-36页 |
1.1 水稻白叶枯病与Xoo | 第14-29页 |
1.1.1 Xoo的分泌系统 | 第14-17页 |
1.1.2 水稻白叶枯病菌的无毒基因 | 第17-25页 |
1.1.3 水稻白叶枯病抗性基因 | 第25-29页 |
1.2 酵母双杂交技术及其在植物与病原菌互作中的应用 | 第29-31页 |
1.2.1 酵母双杂交技术简介 | 第29-30页 |
1.2.2 Y2H研究植物抗病蛋白与病原物无毒蛋白的直接结合 | 第30-31页 |
1.2.3 Y2H研究植物抗病信号的传导 | 第31页 |
1.2.4 Y2H研究TALE类无毒蛋白与寄主蛋白的互作 | 第31页 |
1.3 维生素B1的合成与植物抗病性 | 第31-35页 |
1.3.1 维生素B1的生物合成 | 第31-34页 |
1.3.2 VB1参与植物的抗病反应 | 第34-35页 |
1.4 本研究的立题依据和意义 | 第35-36页 |
第二章 Xoo无毒基因avrXa23的克隆与功能研究 | 第36-54页 |
2.1 材料与方法 | 第36-42页 |
2.1.1 实验材料 | 第36-39页 |
2.1.2 实验方法 | 第39-42页 |
2.2 结果与分析 | 第42-50页 |
2.2.1 筛选PXO99~A的基因组文库,获得含有TALE类基因的Cosmid质粒 | 第42页 |
2.2.2 Cosmid质粒C15中含有Xa23对应的Xoo无毒基因 | 第42-44页 |
2.2.3 Cosmid质粒C15亚克隆表达载体构建 | 第44-45页 |
2.2.4 CBB23对P99M5-L、P99M2-L和P99M4-L表现抗病性 | 第45-46页 |
2.2.5 avrXa23可以回补talC9b突变体的无毒功能 | 第46页 |
2.2.6 获得avrXa23基因序列 | 第46-47页 |
2.2.7 突变体菌P99M2、P99M4和P99M5的Tn5插入位置 | 第47-48页 |
2.2.8 avrXa23保守的存在于国内外Xoo代表性小种中 | 第48-50页 |
2.2.9 AvrXa23能够激活CBB23对水稻细菌性条斑病的抗性 | 第50页 |
2.3 讨论 | 第50-54页 |
2.3.1 获得高分辨率的Southern结果 | 第50页 |
2.3.2 AvrXa23激活Xa23表达的分子机理 | 第50-51页 |
2.3.3 Xa23对Xoo的广谱抗性 | 第51-52页 |
2.3.4 利用avrXa23对应的抗性基因Xa23来防治水稻细菌性条斑病 | 第52-53页 |
2.3.5 基于AvrXa23的TALEs和TALENs装配系统 | 第53页 |
2.3.6 AvrXa23毒性功能的探讨 | 第53-54页 |
第三章 筛选水稻中与AvrXa23互作的蛋白 | 第54-74页 |
3.1 材料与方法 | 第54-59页 |
3.1.1 实验材料 | 第54-55页 |
3.1.2 实验方法 | 第55-59页 |
3.2 结果与分析 | 第59-71页 |
3.2.1 构建水稻cDNA文库 | 第59-61页 |
3.2.2 诱饵载体的构建 | 第61-62页 |
3.2.3 诱饵蛋白载体自激活鉴定和毒性检测 | 第62-64页 |
3.2.4 文库的筛选 | 第64-65页 |
3.2.5 候选克隆的生物信息学分析 | 第65-66页 |
3.2.6 OsTHIC、OsTHI1、OsIMPα 与AvrXa23在酵母内互作 | 第66-69页 |
3.2.7 GST pull-down体外验证 | 第69-71页 |
3.3 讨论 | 第71-74页 |
3.3.1 利用酵母双杂交技术筛选与AvrXa23互作的蛋白 | 第71-72页 |
3.3.2 OsTHI1、OsTHIC和OsIMPα 的分析 | 第72-73页 |
3.3.3 OsTHI1、OsTHIC和OsIMPα 的下一步研究 | 第73-74页 |
第四章 OsTHI1的功能分析 | 第74-87页 |
前言 | 第74页 |
4.1 材料与方法 | 第74-81页 |
4.1.1 实验材料 | 第74-76页 |
4.1.2 实验方法 | 第76-81页 |
4.2 结果与分析 | 第81-85页 |
4.2.1 AvrXa23 N端结构域在AvrXa23与OsTHI1相互作用中起重要作用 | 第81-82页 |
4.2.2 OsTHI1定位在叶绿体上 | 第82页 |
4.2.3 OsTHI1的缺失导致水稻叶片白化 | 第82-84页 |
4.2.4 OsTHI1的缺失导致水稻品种CBB4对白叶枯病原菌PXO61的抗病性降低 | 第84-85页 |
4.3 讨论 | 第85-87页 |
4.3.1 OsTHI1与AvrXa23的N端互作 | 第85页 |
4.3.2 CRISPR/Cas9系统 | 第85-86页 |
4.3.3 OsTHI1的敲除表达 | 第86页 |
4.3.4 OsTHI1的过表达 | 第86-87页 |
第五章 全文结论 | 第87-88页 |
参考文献 | 第88-105页 |
附录 | 第105-108页 |
一.酵母感受态细胞的制备 | 第105页 |
二、维生素B1含量的测定 | 第105-106页 |
三.水稻的遗传转化 | 第106-108页 |
致谢 | 第108-109页 |
作者简历 | 第109页 |