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我国部分地区猪圆环病毒2型流行毒株的分离鉴定及全基因组序列分析

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-12页
第一章 猪圆环病毒研究概述第12-25页
   ·病原学第13-14页
     ·猪圆环病毒在病毒学上的分类第13页
     ·猪圆环病毒的形态特征和理化特性第13-14页
     ·猪圆环病毒的培养第14页
   ·PCV 的分子生物学特性第14-17页
     ·病毒基因组结构第14-15页
     ·病毒基因组的复制第15-16页
     ·PCV 基因组编码的主要产物及其特性第16-17页
   ·流行病学第17-19页
     ·世界流行情况第17-18页
     ·病毒的传播第18页
     ·流行特点第18页
     ·临床症状和病理变化第18-19页
   ·PCV-2 诊断方法的研究第19-21页
     ·病毒的分离第19页
     ·间接免疫荧光试验(Indirect immunofluorescence assay,IFA)第19-20页
     ·ELISA 试验第20页
     ·原位核酸杂交(Nucleic acid probe and in situ hybridization,ISH)第20页
     ·分子生物学检测技术第20-21页
   ·PCV-2 相关的疾病第21-23页
     ·猪皮炎肾病综合征第21-22页
     ·A2 型先天性震颤第22页
     ·猪呼吸道病复合征第22-23页
     ·繁殖障碍第23页
     ·猪增生性和坏死性肺炎第23页
   ·PCV 的防制第23-24页
   ·研究的目的和意义第24-25页
第二章 猪圆环病毒的分离和鉴定第25-31页
   ·实验材料第25-26页
     ·主要试验仪器第25页
     ·主要试剂和耗材第25-26页
     ·病料第26页
     ·病毒分离用细胞第26页
   ·试验方法第26-28页
     ·细胞培养用液第26页
     ·PCR 检测试剂第26页
     ·病料的采集和处理第26页
     ·病料PCR 检测第26-27页
     ·PK-15 细胞复苏培养第27页
     ·病毒分离第27-28页
     ·PCR 检测第28页
   ·结果第28-29页
     ·组织中病毒检测第28-29页
     ·细胞中病毒检测第29页
   ·讨论第29-31页
第三章 猪圆环病毒2 型全基因组测定和序列分析第31-48页
   ·材料第31-33页
     ·样品第31-32页
     ·细胞、载体和菌株第32页
     ·试剂与工具酶第32页
     ·主要仪器与设备第32页
     ·主要溶液配方第32-33页
   ·方法第33-38页
     ·病毒DNA 模板的制备第33页
     ·针对PCV-2 全基因组引物的设计与合成第33页
     ·PCV-2 全基因组的PCR 扩增第33-34页
     ·PCV-2 全基因组扩增产物的回收第34-35页
     ·目的片段与pGEM-T easy 载体的连接第35页
     ·E.coli DH5α感受态细胞的制备第35页
     ·连接产物转化第35-36页
     ·质粒DNA 的小量提取-碱裂解法第36-37页
     ·重组质粒的鉴定第37-38页
   ·实验结果第38-46页
     ·PCV-2 全基因组扩增结果第38页
     ·重组质粒的鉴定第38-39页
     ·序列测定结果第39页
     ·所测PCV-2 的核苷酸序列同源性比较、遗传变异及进化分析第39-43页
     ·PCV-2 ORF2 推导氨基酸同源性比较的结果第43-46页
   ·讨论第46-48页
结论第48-49页
参考文献第49-55页
附件第55-60页
英文缩略词注释表第60-61页
致谢第61-62页
作者简介第62页

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