| 摘要 | 第3-9页 |
| abstract | 第9-16页 |
| 第1章 引言 | 第22-27页 |
| 参考文献 | 第25-27页 |
| 第2章 远端缺血预适应模型的建立及外泌体的提取与鉴定 | 第27-51页 |
| 2.1 前言 | 第27-28页 |
| 2.2 材料 | 第28-32页 |
| 2.2.1 实验动物 | 第28页 |
| 2.2.2 购置试剂 | 第28-29页 |
| 2.2.3 主要仪器设备及耗材 | 第29-30页 |
| 2.2.4 自配试剂 | 第30-32页 |
| 2.3 方法 | 第32-40页 |
| 2.3.1 大鼠远端缺血预适应模型建立 | 第32页 |
| 2.3.2 RIPC前后血浆中微泡的变化 | 第32页 |
| 2.3.3 血浆外泌体的提取 | 第32-33页 |
| 2.3.4 外泌体的鉴定 | 第33-36页 |
| 2.3.5 外泌体miRNA提取 | 第36-37页 |
| 2.3.6 检测各组外泌体中相关miRNA的表达 | 第37-39页 |
| 2.3.7 不同情况处理后血浆外泌体中的miR-24的表达情况 | 第39页 |
| 2.3.8 统计学处理 | 第39-40页 |
| 2.4 结果 | 第40-45页 |
| 2.4.1 大鼠远端缺血预适应模型成功建立 | 第40页 |
| 2.4.2 RIPC前后血浆中微泡数量的变化 | 第40-42页 |
| 2.4.3 血浆外泌体的鉴定结果 | 第42-43页 |
| 2.4.4 RIPC处理后血浆外泌体中miRNA表达情况 | 第43-45页 |
| 2.5 讨论 | 第45-48页 |
| 2.6 结论 | 第48页 |
| 参考文献 | 第48-51页 |
| 第3章 远端缺血预适应诱导外泌体递送miR-24减轻H9c2氧化应激损伤 | 第51-87页 |
| 3.1 前言 | 第51-52页 |
| 3.2 材料 | 第52-58页 |
| 3.2.1 实验动物 | 第52页 |
| 3.2.2 细胞株 | 第52页 |
| 3.2.3 主要仪器设备及耗材 | 第52-54页 |
| 3.2.4 购置试剂 | 第54-55页 |
| 3.2.5 自配试剂 | 第55-58页 |
| 3.3 方法 | 第58-69页 |
| 3.3.1 实验分组及操作流程 | 第58-59页 |
| 3.3.2 .细胞培养方法 | 第59-60页 |
| 3.3.3 外泌体体外摄取实验 | 第60-61页 |
| 3.3.4 建立双氧水细胞氧化应激损伤模型 | 第61页 |
| 3.3.5 转染miRNA | 第61-62页 |
| 3.3.6 细胞miRNA提取 | 第62-63页 |
| 3.3.7 检测各组细胞miRNA的表达 | 第63-65页 |
| 3.3.8 流式细胞仪检测细胞凋亡率 | 第65页 |
| 3.3.9 乳酸脱氢酶(LDH)检测 | 第65-66页 |
| 3.3.10 Western-blot检测各组细胞相关凋亡蛋白的表达 | 第66-69页 |
| 3.3.11 TUNEL检测细胞凋亡 | 第69页 |
| 3.3.12 统计学处理 | 第69页 |
| 3.4 结果 | 第69-82页 |
| 3.4.1 H9c2细胞和心肌细胞可以摄取外泌体 | 第69-70页 |
| 3.4.2 外泌体中的miRNA能够递送至H9c2细胞中 | 第70-71页 |
| 3.4.3 H2O2诱导心肌细胞发生调亡 | 第71-73页 |
| 3.4.4 miR-24减轻氧化应激下H9c2细胞的凋亡 | 第73-75页 |
| 3.4.5 miR-24转染的H9c2细胞LDH的活性下降 | 第75-76页 |
| 3.4.6 miR-24对Bim及Cleaved-caspase-3等凋亡相关蛋白的影响 | 第76-77页 |
| 3.4.7 RIPC诱导的外泌体能够减轻H9c2细胞氧化应激引起的凋亡损伤 | 第77-82页 |
| 3.5 讨论 | 第82-84页 |
| 3.6 结论 | 第84-85页 |
| 参考文献 | 第85-87页 |
| 第4章 远端缺血预适应诱导外泌体递送miR-24减轻大鼠心脏缺血再灌注损伤 | 第87-110页 |
| 4.1 前言 | 第87-88页 |
| 4.2 材料 | 第88-93页 |
| 4.2.1 实验动物 | 第88页 |
| 4.2.2 主要仪器设备及耗材 | 第88-89页 |
| 4.2.3 购置试剂 | 第89-91页 |
| 4.2.4 自配试剂 | 第91-93页 |
| 4.3 方法 | 第93-99页 |
| 4.3.1 实验分组及操作流程 | 第93-94页 |
| 4.3.2 大鼠远端缺血预适应模型建立 | 第94页 |
| 4.3.3 大鼠血浆外泌体的提取 | 第94页 |
| 4.3.4 细胞miRNA提取 | 第94-95页 |
| 4.3.5 检测各组细胞miRNA的表达 | 第95-97页 |
| 4.3.6 心肌缺血再灌注损伤模型构建 | 第97-98页 |
| 4.3.7 心脏超声检查 | 第98页 |
| 4.3.8 TTC染色 | 第98页 |
| 4.3.9 TUNEL检测心肌组织细胞凋亡 | 第98-99页 |
| 4.3.10 统计学处理 | 第99页 |
| 4.4 结果 | 第99-105页 |
| 4.4.1 成功建立大鼠缺血再灌注损伤模型 | 第99-100页 |
| 4.4.2 远端缺血预处理能够减轻大鼠心脏缺血再灌注损伤 | 第100-101页 |
| 4.4.3 远端缺血预适应诱导的外泌体能够减轻大鼠缺血再灌注的心肌损伤 | 第101-104页 |
| 4.4.4 HIF-1介导了远端缺血预适应诱导的外泌体 | 第104-105页 |
| 4.5 讨论 | 第105-108页 |
| 4.6 结论 | 第108页 |
| 参考文献 | 第108-110页 |
| 第5章 全文总结与展望 | 第110-112页 |
| 致谢 | 第112-113页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第113-114页 |
| 综述 | 第114-123页 |
| 参考文献 | 第120-123页 |
