摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
中英文缩略词表 | 第12-14页 |
引言 | 第14-16页 |
第1章 文献综述 | 第16-27页 |
1.1 小鼠的嗅觉器官及信号通路 | 第16-19页 |
1.1.1 小鼠的主要嗅觉器官 | 第16-17页 |
1.1.2 小鼠嗅觉信号通路 | 第17-19页 |
1.2 腺苷酸环化酶 | 第19-23页 |
1.2.1 腺苷酸环化酶分类及功能 | 第19页 |
1.2.2 AC3 基因与嗅觉的关系 | 第19-20页 |
1.2.3 AC3 基因敲除过程简述 | 第20-21页 |
1.2.4 小鼠 AC3 基因敲除后研究进展 | 第21-23页 |
1.3 Suppression subtractive hybridization | 第23-26页 |
1.3.1 SSH 技术发展历程 | 第23页 |
1.3.2 SSH 技术原理概述 | 第23-24页 |
1.3.3 SSH 技术操作过程 | 第24-25页 |
1.3.4 SSH 技术的应用 | 第25-26页 |
1.4 本文研究的主要内容、目的及意义 | 第26-27页 |
第2章 消减杂交及文库的构建 | 第27-45页 |
2.1 实验材料与试剂 | 第27-28页 |
2.1.1 实验动物及处理 | 第27页 |
2.1.2 药品与试剂 | 第27-28页 |
2.1.3 主要实验仪器 | 第28页 |
2.2 实验方法 | 第28-38页 |
2.2.1 实验小鼠的基因型鉴定实验 | 第28-29页 |
2.2.2 TRIzol 法提取小鼠 MOE 内总 RNA | 第29页 |
2.2.3 双链 cDNA 合成实验 | 第29-31页 |
2.2.4 RsaⅠ酶切双链 cDNA 反应 | 第31-32页 |
2.2.5 cDNA 片段接头连接及其效率检测 PCR 实验 | 第32-33页 |
2.2.6 第一次杂交反应 | 第33-34页 |
2.2.7 第二次杂交反应 | 第34-35页 |
2.2.8 两次 PCR 扩增实验 | 第35-36页 |
2.2.9 PCR 法检测消减杂交效率实验 | 第36-37页 |
2.2.10 消减文库的构建 | 第37-38页 |
2.3 结果 | 第38-44页 |
2.3.1 小鼠基因型及总 RNA 提取结果分析 | 第38-39页 |
2.3.2 双链 cDNA 合成及 RsaⅠ酶切结果分析 | 第39-41页 |
2.3.3 接头连接效率分析 | 第41-42页 |
2.3.4 巢式 PCR 结果分析 | 第42-43页 |
2.3.5 消减杂交效率分析 | 第43页 |
2.3.6 消减文库的检验及差异表达克隆的筛选 | 第43-44页 |
2.4 讨论 | 第44-45页 |
第3章 消减文库的初步筛选及生物信息学分析 | 第45-52页 |
3.1 实验材料与试剂 | 第45页 |
3.1.1 实验材料 | 第45页 |
3.1.2 实验试剂 | 第45页 |
3.1.3 实验仪器 | 第45页 |
3.2 方法 | 第45-46页 |
3.2.1 Dot blot 方法对消减文库进行初步筛选 | 第45-46页 |
3.2.2 差异表达克隆测序 | 第46页 |
3.2.3 测序结果比对分析 | 第46页 |
3.2.4 差异表达基因功能注释分析 | 第46页 |
3.3 结果 | 第46-51页 |
3.3.1 文库初步筛选结果 | 第46-47页 |
3.3.2 测序序列比对结果 | 第47-50页 |
3.3.3 差异表达基因功能注释结果 | 第50-51页 |
3.4 讨论 | 第51-52页 |
第4章 差异表达基因相对表达量分析 | 第52-58页 |
4.1 实验材料与试剂 | 第52-53页 |
4.1.1 实验材料 | 第52页 |
4.1.2 实验试剂 | 第52页 |
4.1.3 实验仪器 | 第52-53页 |
4.2 方法 | 第53-54页 |
4.2.1 单链 cDNA 合成 | 第53页 |
4.2.2 qRT-PCR 实验 | 第53-54页 |
4.3 结果 | 第54-56页 |
4.3.1 单链 cDNA 合成结果 | 第54-55页 |
4.3.2 差异表达基因相对表达量及其分析 | 第55-56页 |
4.4 讨论 | 第56-58页 |
结论 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-66页 |
致谢 | 第66-67页 |
读研期间发表的论文 | 第67页 |