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利用SSH技术筛选与鉴定小鼠MOE内受AC3调控的差异表达基因

摘要第5-7页
Abstract第7-8页
中英文缩略词表第12-14页
引言第14-16页
第1章 文献综述第16-27页
    1.1 小鼠的嗅觉器官及信号通路第16-19页
        1.1.1 小鼠的主要嗅觉器官第16-17页
        1.1.2 小鼠嗅觉信号通路第17-19页
    1.2 腺苷酸环化酶第19-23页
        1.2.1 腺苷酸环化酶分类及功能第19页
        1.2.2 AC3 基因与嗅觉的关系第19-20页
        1.2.3 AC3 基因敲除过程简述第20-21页
        1.2.4 小鼠 AC3 基因敲除后研究进展第21-23页
    1.3 Suppression subtractive hybridization第23-26页
        1.3.1 SSH 技术发展历程第23页
        1.3.2 SSH 技术原理概述第23-24页
        1.3.3 SSH 技术操作过程第24-25页
        1.3.4 SSH 技术的应用第25-26页
    1.4 本文研究的主要内容、目的及意义第26-27页
第2章 消减杂交及文库的构建第27-45页
    2.1 实验材料与试剂第27-28页
        2.1.1 实验动物及处理第27页
        2.1.2 药品与试剂第27-28页
        2.1.3 主要实验仪器第28页
    2.2 实验方法第28-38页
        2.2.1 实验小鼠的基因型鉴定实验第28-29页
        2.2.2 TRIzol 法提取小鼠 MOE 内总 RNA第29页
        2.2.3 双链 cDNA 合成实验第29-31页
        2.2.4 RsaⅠ酶切双链 cDNA 反应第31-32页
        2.2.5 cDNA 片段接头连接及其效率检测 PCR 实验第32-33页
        2.2.6 第一次杂交反应第33-34页
        2.2.7 第二次杂交反应第34-35页
        2.2.8 两次 PCR 扩增实验第35-36页
        2.2.9 PCR 法检测消减杂交效率实验第36-37页
        2.2.10 消减文库的构建第37-38页
    2.3 结果第38-44页
        2.3.1 小鼠基因型及总 RNA 提取结果分析第38-39页
        2.3.2 双链 cDNA 合成及 RsaⅠ酶切结果分析第39-41页
        2.3.3 接头连接效率分析第41-42页
        2.3.4 巢式 PCR 结果分析第42-43页
        2.3.5 消减杂交效率分析第43页
        2.3.6 消减文库的检验及差异表达克隆的筛选第43-44页
    2.4 讨论第44-45页
第3章 消减文库的初步筛选及生物信息学分析第45-52页
    3.1 实验材料与试剂第45页
        3.1.1 实验材料第45页
        3.1.2 实验试剂第45页
        3.1.3 实验仪器第45页
    3.2 方法第45-46页
        3.2.1 Dot blot 方法对消减文库进行初步筛选第45-46页
        3.2.2 差异表达克隆测序第46页
        3.2.3 测序结果比对分析第46页
        3.2.4 差异表达基因功能注释分析第46页
    3.3 结果第46-51页
        3.3.1 文库初步筛选结果第46-47页
        3.3.2 测序序列比对结果第47-50页
        3.3.3 差异表达基因功能注释结果第50-51页
    3.4 讨论第51-52页
第4章 差异表达基因相对表达量分析第52-58页
    4.1 实验材料与试剂第52-53页
        4.1.1 实验材料第52页
        4.1.2 实验试剂第52页
        4.1.3 实验仪器第52-53页
    4.2 方法第53-54页
        4.2.1 单链 cDNA 合成第53页
        4.2.2 qRT-PCR 实验第53-54页
    4.3 结果第54-56页
        4.3.1 单链 cDNA 合成结果第54-55页
        4.3.2 差异表达基因相对表达量及其分析第55-56页
    4.4 讨论第56-58页
结论第58-59页
参考文献第59-66页
致谢第66-67页
读研期间发表的论文第67页

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