摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
1 文献综述 | 第8-12页 |
1.1 表观遗传学 | 第8页 |
1.2 组蛋白赖氨酸甲基化修饰 | 第8页 |
1.3 组蛋白赖氨酸修饰在生物体中的功能 | 第8-9页 |
1.4 COMPASS-like复合物 | 第9-10页 |
1.5 水稻中的开花通路 | 第10-12页 |
2 材料与方法 | 第12-27页 |
2.1 实验材料 | 第12页 |
2.1.1 植物材料 | 第12页 |
2.1.2 载体与菌株 | 第12页 |
2.1.3 酶及试剂 | 第12页 |
2.1.4 仪器设备 | 第12页 |
2.2 实验方法 | 第12-27页 |
2.2.1 PCR扩增 | 第12-14页 |
2.2.2 PCR产物和酶切产物的快速回收纯化 | 第14页 |
2.2.3 DNA凝胶回收 | 第14页 |
2.2.4 DNA的酶切 | 第14页 |
2.2.5 目的片段与载体连接 | 第14-15页 |
2.2.6 大肠杆菌热激感受态的制备和转化 | 第15-16页 |
2.2.7 农杆菌电转感受态的制备和转化 | 第16-17页 |
2.2.8 以菌落PCR进行阳性克隆筛选 | 第17页 |
2.2.9 SDS法质粒进行质粒抽提 | 第17页 |
2.2.10 CTAB法提基因组 | 第17-18页 |
2.2.11 Trizol法提RNA | 第18页 |
2.2.12 反转录 | 第18-19页 |
2.2.13 荧光定量 | 第19-20页 |
2.2.14 酵母双杂交 | 第20-21页 |
2.2.15 拟南芥的侵染转化 | 第21页 |
2.2.16 拟南芥Basta抗性苗的筛选 | 第21页 |
2.2.17 双分子荧光互补 | 第21-22页 |
2.2.18 GUS染色 | 第22页 |
2.2.19 重组蛋白的原核表达和纯化 | 第22-24页 |
2.2.20 Pull-down | 第24页 |
2.2.21 Western Blot | 第24-25页 |
2.2.22 花粉的I_2-KI染色 | 第25页 |
2.2.23 蛋白甲基化转移酶活性的检测 | 第25-27页 |
3.实验结果 | 第27-36页 |
3.1 SDG723隶属于SET domain家族,水稻中SDG723能很好互补拟南芥同源基因的缺失突变体atx1的表型 | 第27页 |
3.2 长日照下SDG723的缺失或下调导致晚花 | 第27-28页 |
3.3 SDG723特异的与OsWDR5a蛋白直接相互作用 | 第28-29页 |
3.4 SDG723与OsWDR5a共定位在细胞核中 | 第29-30页 |
3.5 OsWDR5a特异性与组蛋白H3结合 | 第30页 |
3.6 OsWDR5a能在体外显著增强SDG723的甲基化酶活性 | 第30-31页 |
3.7 水稻中OsWDR5a缺失致死 | 第31-33页 |
3.8 OsWDR5aRNAi后在长日照条件下也表现出晚花的表型 | 第33-34页 |
3.9 在长日照条件下SDG723和OsWDR5a可能通过调控开花通路关键基因EHD1、RFT1和HD3a来调节开花 | 第34-36页 |
讨论 | 第36-38页 |
展望 | 第38-40页 |
参考文献 | 第40-43页 |
致谢 | 第43页 |