| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 文献综述 | 第9-18页 |
| 1 洋甘菊简介 | 第9-10页 |
| 1.1 洋甘菊的生物学特性 | 第9页 |
| 1.2 洋甘菊的活性成分研究 | 第9页 |
| 1.3 洋甘菊的生物活性研究 | 第9-10页 |
| 2 植物倍半萜研究进展 | 第10-13页 |
| 2.1 萜类化合物概述 | 第10-11页 |
| 2.2 倍半萜化合物作用 | 第11-12页 |
| 2.3 倍半萜生物合成途径 | 第12-13页 |
| 3 倍半萜合酶研究进展 | 第13-15页 |
| 3.1 倍半萜合酶的克隆 | 第13-14页 |
| 3.2 倍半萜合酶的表达与调控 | 第14-15页 |
| 3.2.1 倍半萜合酶的多样性 | 第14页 |
| 3.2.2 诱导表达特性 | 第14页 |
| 3.2.3 时空表达特性 | 第14-15页 |
| 4 (E)-β-法尼烯研究进展 | 第15-16页 |
| 5 茉莉酸甲酯对植物次生代谢的影响 | 第16-18页 |
| 引言 | 第18-19页 |
| 材料与方法 | 第19-29页 |
| 1 实验材料 | 第19页 |
| 1.1 植物材料 | 第19页 |
| 1.2 菌株和载体 | 第19页 |
| 2 主要试剂和仪器 | 第19-20页 |
| 2.1 实验试剂 | 第19页 |
| 2.2 实验仪器 | 第19-20页 |
| 3 实验方法 | 第20-29页 |
| 3.1 总RNA的提取及检测 | 第20页 |
| 3.2 cDNA第一链的合成 | 第20页 |
| 3.3 Mr-βFS基因部分序列获得 | 第20-22页 |
| 3.3.1 简并引物设计 | 第20-21页 |
| 3.3.2 部分片段的扩增 | 第21页 |
| 3.3.3 PCR产物目的片段胶回收 | 第21-22页 |
| 3.3.4 目的片段的连接 | 第22页 |
| 3.3.5 重组质粒的转化 | 第22页 |
| 3.3.6 菌落PCR鉴定 | 第22页 |
| 3.4 βFS基因RACE扩全长 | 第22-23页 |
| 3.4.1 RACE引物设计 | 第22页 |
| 3.4.2 RACE-Ready cDNA的准备 | 第22-23页 |
| 3.4.3 3’端RACE | 第23页 |
| 3.4.4 5’端RACE | 第23页 |
| 3.5 βFS基因序列拼接 | 第23页 |
| 3.6 序列的生物信息学分析 | 第23-24页 |
| 3.7 洋甘菊βFS原核表达 | 第24-26页 |
| 3.7.1 引物设计及PCR特异性扩增 | 第24页 |
| 3.7.2 碱裂解法提取质粒 | 第24页 |
| 3.7.3 双酶切 | 第24-25页 |
| 3.7.4 目的片段与表达载体连接 | 第25页 |
| 3.7.5 表达菌株的转化 | 第25页 |
| 3.7.6 融合蛋白的诱导表达 | 第25-26页 |
| 3.7.7 Western blotting分析 | 第26页 |
| 3.8 酶活检测 | 第26-27页 |
| 3.8.1 体外酶促反应体系建立 | 第26页 |
| 3.8.2 气质联用（GC-MS）检测 | 第26-27页 |
| 3.9 qRT-PCR分析洋甘菊βFS在不同器官的表达量 | 第27页 |
| 3.10 MeJA诱导对洋甘菊叶片中萜类含量的影响 | 第27-29页 |
| 3.10.1 外源MeJA的喷施 | 第27页 |
| 3.10.2 植物萜类提取 | 第27-28页 |
| 3.10.3 挥发物成分分析 | 第28-29页 |
| 结果与分析 | 第29-42页 |
| 1 洋甘菊βFS基因的克隆 | 第29-30页 |
| 1.1 洋甘菊总RNA的鉴定 | 第29页 |
| 1.2 βFS基因部分片段扩增和RACE扩全长 | 第29-30页 |
| 2 βFS基因序列生物学信息分析 | 第30-35页 |
| 2.1 βFS基因序列特征 | 第30-32页 |
| 2.2 Mr-βFS同源性分析 | 第32-33页 |
| 2.3 Mr-βFS系统进化树的建立和分析 | 第33-35页 |
| 3 pET-28a-βFS的原核表达及Western blotting分析 | 第35-36页 |
| 4 酶活测定 | 第36页 |
| 5 洋甘菊βFS基因的qRT-PCR分析 | 第36-37页 |
| 6 MeJA处理对洋甘菊挥发性萜类积累的影响 | 第37-42页 |
| 6.1 叶片中βFS基因的qRT-PCR分析 | 第38页 |
| 6.2 叶片中萜类物质的定性分析 | 第38-39页 |
| 6.3 叶片中萜类物质的定量分析 | 第39-42页 |
| 讨论 | 第42-45页 |
| 1 洋甘菊EβF合成酶基因的克隆及序列分析 | 第42页 |
| 2 洋甘菊βFS的原核表达及酶活测定 | 第42-43页 |
| 3 βFS基因的荧光定量分析 | 第43页 |
| 4 MeJA对洋甘菊叶片挥发性萜类的调控 | 第43-45页 |
| 结论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-55页 |
| 附录 | 第55-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 个人简介 | 第59页 |
| 攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第59页 |
