| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 缩略词 | 第13-14页 |
| 第一章 绪论 | 第14-27页 |
| 1.1 p53研究概况 | 第14-17页 |
| 1.1.1 野生型p53的研究进程 | 第14-15页 |
| 1.1.2 突变p53的研究现况 | 第15-17页 |
| 1.2 突变p53功能获得的研究进程 | 第17-22页 |
| 1.2.1 突变p53功能获得的研究历史 | 第17页 |
| 1.2.2 突变p53功能获得机制研究的新进展 | 第17-18页 |
| 1.2.3 突变p53功能获得的生物学现象 | 第18-22页 |
| 1.3 原癌基因Ras与抑癌基因p53在肿瘤发生中的相互作用 | 第22-23页 |
| 1.3.1 原癌基因Ras与肿瘤发生 | 第22页 |
| 1.3.2 p53与Ras的突变协同促进肿瘤的发生 | 第22-23页 |
| 1.4. 突变p53获得性耐药的研究现状 | 第23-24页 |
| 1.5 本研究的主要内容及意义 | 第24-27页 |
| 第二章 p53S获得对阿霉素处理耐受的表型 | 第27-45页 |
| 2.1 材料与方法 | 第27-37页 |
| 2.1.1 p53S小鼠的获得 | 第27-28页 |
| 2.1.2 p53S~* cre小鼠基因型的测定 | 第28-31页 |
| 2.1.3 p53S MEF细胞的获取 | 第31-32页 |
| 2.1.4 细胞的培养 | 第32-33页 |
| 2.1.7 阿霉素处理MEF细胞 | 第33-34页 |
| 2.1.8 Ras~(G12V)载体转染 | 第34页 |
| 2.1.9 MTT比色法 | 第34-35页 |
| 2.1.10 Annexin-V凋亡染色检测 | 第35-36页 |
| 2.1.11 流式细胞术检测细胞凋亡 | 第36-37页 |
| 2.2 实验仪器 | 第37页 |
| 2.3 结果与分析 | 第37-43页 |
| 2.3.1 p53S获得性耐药表型 | 第37-40页 |
| 2.3.2 p53S获得耐受肿瘤治疗药物引起的凋亡反应的功能 | 第40-42页 |
| 2.3.3 p53S细胞抵抗肿瘤治疗药物的凋亡表型 | 第42-43页 |
| 2.4 讨论 | 第43-45页 |
| 第三章 p53S获得性耐药机制初探 | 第45-68页 |
| 3.1 材料与方法 | 第45-54页 |
| 3.1.1 细胞系 | 第45页 |
| 3.1.2 Western blot | 第45-48页 |
| 3.1.3 实时荧光定量PCR | 第48-51页 |
| 3.1.4 免疫共沉淀 | 第51-53页 |
| 3.1.5 p53~(N236S)Chip-on-chip实验 | 第53-54页 |
| 3.2 实验仪器 | 第54-55页 |
| 3.3 结果与分析 | 第55-65页 |
| 3.3.1 p53S丧失野生型p53调控细胞周期和细胞凋亡功能 | 第55-56页 |
| 3.3.2 p53S细胞对DNA合成抑制剂阿霉素处理不敏感 | 第56-57页 |
| 3.3.3 p53S能在细胞内与其家族蛋白p73结合 | 第57-59页 |
| 3.3.4 p53S纯和子与杂合子在阿霉素处理后通过不同的调控机制获得耐药表型 | 第59-65页 |
| 3.4 讨论 | 第65-68页 |
| 第四章 总结与展望 | 第68-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-83页 |
| 附录 攻读硕士期间发表论文目录 | 第83页 |
