| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 符号与缩率语说明 | 第10-11页 |
| 1 绪论 | 第11-20页 |
| 1.1 瓜氨酸的概述 | 第11-12页 |
| 1.1.1 瓜氨酸的结构 | 第11页 |
| 1.1.2 瓜氨酸的生理功能及应用 | 第11页 |
| 1.1.3 瓜氨酸的制备 | 第11-12页 |
| 1.2 精氨酸脱亚胺酶的概述 | 第12-16页 |
| 1.2.1 精氨酸脱亚胺酶的来源、性质 | 第12-13页 |
| 1.2.2 精氨酸脱亚胺酶的反应机理 | 第13-14页 |
| 1.2.3 精氨酸脱亚胺酶的结构 | 第14页 |
| 1.2.4 精氨酸脱亚胺酶的克隆表达和分子改造研究进展 | 第14-16页 |
| 1.3 精氨酸脱亚胺酶的应用研究 | 第16-17页 |
| 1.3.1 酶的固定化技术 | 第16页 |
| 1.3.2 精氨酸脱亚胺酶的应用 | 第16-17页 |
| 1.4 酶热稳定性研究 | 第17-18页 |
| 1.4.1 影响热稳定性的因素 | 第17-18页 |
| 1.4.2 酶热稳定性改造技术 | 第18页 |
| 1.5 本课题的立题依据及意义 | 第18-19页 |
| 1.6 本课题的主要研究内容 | 第19-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-33页 |
| 2.1 材料与仪器 | 第20-22页 |
| 2.1.1 菌株和质粒 | 第20页 |
| 2.1.2 主要实验试剂 | 第20页 |
| 2.1.3 培养基 | 第20页 |
| 2.1.4 试剂 | 第20-22页 |
| 2.2 实验方法 | 第22-33页 |
| 2.2.1 E. faecalis精氨酸脱亚胺酶基因克隆 | 第22-23页 |
| 2.2.2 重组大肠杆菌的构建 | 第23-26页 |
| 2.2.3 重组质粒的诱导表达 | 第26页 |
| 2.2.4 重组酶的分离纯化和鉴定 | 第26-28页 |
| 2.2.5 诱导条件的研究 | 第28页 |
| 2.2.6 重组酶的酶学性质研究 | 第28-29页 |
| 2.2.7 固定化酶的制备与酶学性质研究 | 第29-30页 |
| 2.2.8 分子改造 | 第30-33页 |
| 3 结果与讨论 | 第33-56页 |
| 3.1 精氨酸脱亚胺酶序列对比分析 | 第33-34页 |
| 3.2 诱导条件的研究 | 第34-36页 |
| 3.2.1 初始诱导菌体浓度的确定 | 第34-35页 |
| 3.2.2 诱导温度的确定 | 第35页 |
| 3.2.3 诱导时间的确定 | 第35-36页 |
| 3.2.4 诱导剂浓度的确定 | 第36页 |
| 3.3 酶的分离纯化 | 第36-37页 |
| 3.4 重组酶酶学性质 | 第37-42页 |
| 3.4.1 温度对酶活的影响 | 第37-38页 |
| 3.4.2 pH对酶活的影响 | 第38页 |
| 3.4.3 金属离子对酶活的影响 | 第38-39页 |
| 3.4.4 化学修饰剂对酶活的影响 | 第39-41页 |
| 3.4.5 重组酶的反应动力学研究 | 第41页 |
| 3.4.6 瓜氨酸的生物转化 | 第41-42页 |
| 3.5 固定化精氨酸脱亚胺酶的制备 | 第42-46页 |
| 3.5.1 固定化树脂种类的选择 | 第42页 |
| 3.5.2 加酶量的选择 | 第42-43页 |
| 3.5.3 吸附pH的选择 | 第43页 |
| 3.5.4 吸附温度的选择 | 第43-44页 |
| 3.5.5 吸附时间的选择 | 第44-45页 |
| 3.5.6 交联戊二醛浓度的选择 | 第45页 |
| 3.5.7 交联时间的选择 | 第45-46页 |
| 3.6 固定化精氨酸脱亚胺酶酶学性质的研究 | 第46-48页 |
| 3.6.1 温度对固定化酶酶活及稳定性的影响 | 第46页 |
| 3.6.2 pH对固定化酶酶活及稳定性的影响 | 第46-47页 |
| 3.6.3 固定化酶酶反应动力学的研究 | 第47页 |
| 3.6.4 固定化酶的操作稳定性的研究 | 第47-48页 |
| 3.7 精氨酸脱亚胺酶的分子改造 | 第48-56页 |
| 3.7.1 精氨酸脱亚胺酶的随机突变及定点突变 | 第48-49页 |
| 3.7.2 突变体酶的表达和纯化 | 第49页 |
| 3.7.3 突变体酶学性质的研究 | 第49-51页 |
| 3.7.4 精氨酸脱亚胺酶结构预测 | 第51-52页 |
| 3.7.5 精氨酸脱亚胺酶突变体性质改变的原因分析 | 第52-56页 |
| 主要结论及展望 | 第56-58页 |
| 致谢 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-66页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第66页 |
