| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 缩略语表 | 第11-12页 |
| 1 前言 | 第12-21页 |
| 1.1 研究问题的由来 | 第12-13页 |
| 1.2 FHL2基因研究进展 | 第13-18页 |
| 1.2.1 FHL2基因结构 | 第13页 |
| 1.2.2 FHL2基因的表达与定位 | 第13-14页 |
| 1.2.3 FHL2基因的主要功能 | 第14-15页 |
| 1.2.4 FHL2在生殖系统中的作用 | 第15-17页 |
| 1.2.5 FHL2异常导致生殖系统病变 | 第17-18页 |
| 1.3 EGF研究进展 | 第18-19页 |
| 1.3.1 EGF对卵泡发育的影响 | 第18-19页 |
| 1.3.2 EGF对颗粒细胞增殖作用的调控 | 第19页 |
| 1.4 实验的目的和意义 | 第19-21页 |
| 2 实验材料 | 第21-26页 |
| 2.1 实验动物 | 第21页 |
| 2.2 实验试剂与耗材 | 第21-23页 |
| 2.3 主要抗体 | 第23-24页 |
| 2.4 实验仪器 | 第24-25页 |
| 2.5 实验试剂的配制 | 第25-26页 |
| 3 实验方法 | 第26-42页 |
| 3.1 小鼠卵巢颗粒细胞的培养 | 第26页 |
| 3.1.1 细胞培养 | 第26页 |
| 3.1.2 细胞传代 | 第26页 |
| 3.2 细胞计数 | 第26-27页 |
| 3.3 转染 | 第27-28页 |
| 3.3.1 siRNA的转染 | 第27页 |
| 3.3.2 过表达质粒的转染 | 第27-28页 |
| 3.4 细胞加药处理 | 第28页 |
| 3.4.1 EGF处理 | 第28页 |
| 3.4.2 通路抑制剂处理细胞 | 第28页 |
| 3.5 细胞周期检测 | 第28-29页 |
| 3.6 细胞凋亡检测 | 第29页 |
| 3.7 CCK-8 法检测细胞增殖 | 第29页 |
| 3.8 小鼠卵巢颗粒细胞总RNA的提取 | 第29-30页 |
| 3.9 cDNA链反转录合成 | 第30-31页 |
| 3.10 引物设计 | 第31页 |
| 3.11 qRT-PCR | 第31-32页 |
| 3.12 蛋白提取和Western Blot实验 | 第32-35页 |
| 3.13 免疫共沉淀（Co-IP） | 第35-36页 |
| 3.14 染色质免疫共沉淀（CHIP） | 第36-38页 |
| 3.15 细胞免疫荧光 | 第38页 |
| 3.16 免疫组化 | 第38-39页 |
| 3.17 质粒的提取 | 第39-41页 |
| 3.17.1 质粒的扩大培养 | 第39-40页 |
| 3.17.2 质粒大提 | 第40-41页 |
| 3.18 小鼠ELISA检测方法 | 第41页 |
| 3.19 数据分析 | 第41-42页 |
| 4 实验结果 | 第42-55页 |
| 4.1 FHL2在小鼠卵巢中的表达与定位 | 第42-43页 |
| 4.2 FHL2在颗粒细胞中的表达与定位 | 第43-44页 |
| 4.3 FHL2对小鼠颗粒细胞的生长的调控作用 | 第44-47页 |
| 4.3.1 敲低FHL2对颗粒细胞生长的调控 | 第44-45页 |
| 4.3.2 过表达FHL2对颗粒细胞生长的调控 | 第45-47页 |
| 4.4 FHL2通过结合AP-1 和NF-κB调控EGF和EGFR转录 | 第47-50页 |
| 4.4.1 FHL2调控EGF和EGFR的表达 | 第47-49页 |
| 4.4.2 FHL2与AP-1 和NF-κB结合调控EGF和EGFR的表达 | 第49-50页 |
| 4.5 EGF对颗粒细胞生长的调控依赖于FHL2表达量 | 第50-51页 |
| 4.6 EGF可以激活AP-1 和NF-κB转录因子的活性 | 第51-52页 |
| 4.7 EGF诱导小鼠颗粒细胞FHL2的表达及定位转移 | 第52-55页 |
| 4.7.1 EGF诱导小鼠颗粒细胞FHL2的表达 | 第52-53页 |
| 4.7.2 EGF诱导小鼠颗粒细胞FHL2在细胞核内聚集 | 第53-55页 |
| 5 讨论 | 第55-59页 |
| 5.1 FHL2可能参与原始卵泡池的组装 | 第56页 |
| 5.2 FHL2促进卵巢颗粒细胞的生长 | 第56-57页 |
| 5.3 FHL2通过调控EGF和EGFR的转录参与卵泡发育调控 | 第57-58页 |
| 5.4 EGF诱导FHL2表达以及在核内聚集 | 第58-59页 |
| 6 全文结论 | 第59-60页 |
| 7 创新与不足 | 第60-61页 |
| 7.1 创新之处 | 第60页 |
| 7.2 不足之处 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-70页 |
| 发表的主要论文 | 第70-71页 |
| 致谢 | 第71页 |
