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日本乙型脑炎病毒对内皮细胞的活化与相关机制的研究

摘要第7-8页
Abstract第8页
缩略语表 ( Abbreviation )第10-12页
1 文献综述第12-28页
    1.1 日本乙型脑炎简介第12页
    1.2 日本乙型脑炎的流行病学第12-14页
        1.2.1 流行与分布第12-13页
        1.2.2 传播模式第13-14页
    1.3 乙型脑炎的病原第14-18页
        1.3.1 乙型脑炎病毒的形态与结构第14-16页
        1.3.2 乙脑病毒的理化特征第16页
        1.3.3 乙脑病毒的致病过程第16-17页
        1.3.4 乙型脑炎病毒的致病过程第17-18页
    1.4 乙型脑炎的临床症状与危害第18-19页
    1.5 乙型脑炎的诊断与防控第19页
        1.5.1 乙型脑炎的诊断第19页
        1.5.2 乙型脑炎的防控第19页
    1.6 血脑屏障第19-24页
        1.6.1 血脑屏障概述第19-20页
        1.6.2 紧密连接第20-21页
        1.6.3 病原穿越BBB的途径第21-22页
        1.6.4 细胞粘附分子第22-24页
    1.7 中性粒细胞跨越内皮组织的机制第24-25页
    1.8 ECIS第25-26页
    1.9 内皮细胞的活化与内皮细胞的功能失调第26-28页
2 研究目的及意义第28-29页
3 实验材料与方法第29-41页
    3.1 实验材料第29-32页
        3.1.1 病毒、细胞和酵母第29页
        3.1.2 实验所用手术器械第29页
        3.1.3 主要药品和试剂第29-30页
        3.1.4 培养基及其配制第30页
        3.1.5 溶液及其配制第30-31页
        3.1.6 实验动物第31页
        3.1.7 主要仪器第31-32页
    3.2 实验方法第32-41页
        3.2.1 细胞的复苏和培养第32页
        3.2.2 JEV-P3株的扩增与滴定第32-33页
        3.2.3 动物饲养及攻毒第33-34页
        3.2.4 BHK-21 细胞传代第34页
        3.2.5 bEnd.3 细胞传代第34页
        3.2.6 BHK-21 和bEnd.3 细胞感染病毒第34-35页
        3.2.7 脑上清处理bEnd.3第35页
        3.2.8 鸡胚扩增流感病毒第35-36页
        3.2.9 GFP+小鼠脾细胞的分离与脾细胞与内皮细胞的互作第36页
        3.2.10 病毒处理脾脏细胞第36页
        3.2.11 Western Blot第36-38页
        3.2.12 细胞凋亡检测第38页
        3.2.13 用ECIS测细胞在不同频率下的阻抗值第38-39页
        3.2.14 用LFA-1HAGFP+酵母检测bEnd.3 细胞上ICAM-1 的表达第39页
        3.2.15 ELISA检测bEnd.3 细胞中的细胞因子第39页
        3.2.16 小鼠血清的制备第39-40页
        3.2.17 检测小鼠血清样品中ROS的制备第40页
        3.2.18 检测bEnd.3 细胞中的ROS的含量第40页
        3.2.19 数据分析第40页
        3.2.20 手术器械消毒和实验动物及废物无害化处理第40-41页
4 结果与分析第41-53页
    4.1 JEV-P3株毒价第41页
    4.2 乙脑病毒P3株对bEnd.3 细胞的凋亡分析第41页
    4.3 病毒对bEnd.3 细胞粘附分子表达的影响第41-42页
    4.4 bEnd.3 细胞上ICAM-1 的表达情况第42-45页
    4.5 ECIS检测病毒感染bEnd.3 细胞后电阻及Rb值的变化第45-49页
    4.6 检测bEnd.3 细胞上清中和细胞内的ROS的含量第49-51页
    4.7 检测小鼠血清中的ROS的含量第51页
    4.8 病毒感染bEnd.3 细胞后其上清中的细胞因子的检测第51-53页
5 讨论第53-57页
    5.1 JEV对脑微血管内皮细胞的活化第53-54页
    5.2 JEV活化后的bEnd.3 细胞对外周免疫细胞的粘附增加第54页
    5.3 活化对bEnd.3 细胞屏障功能的影响第54-55页
    5.4 活化后的bEnd.3 细胞表达的ROS及细胞因子的变化第55页
    5.5 总结第55-57页
参考文献第57-62页
致谢第62页

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