| 摘要 | 第9-11页 |
| ABSTRACT | 第11-12页 |
| 缩略词表（ABBREVIATIONS） | 第13-14页 |
| 1 前言 | 第14-25页 |
| 1.1 研究问题的由来 | 第14-15页 |
| 1.2 选择信号研究概述 | 第15-17页 |
| 1.2.1 自然选择、人工选择及连锁不平衡 | 第15页 |
| 1.2.2 选择信号 | 第15-16页 |
| 1.2.3 选择性清扫 | 第16页 |
| 1.2.4 遗传分化系数Fst | 第16-17页 |
| 1.3 单核苷酸多态性研究 | 第17-18页 |
| 1.3.1 单核苷酸多态性 | 第17-18页 |
| 1.3.2 单核苷酸多态性研究进展 | 第18页 |
| 1.4 本研究相关基因的研究进展 | 第18-24页 |
| 1.4.1 IGF1R基因的研究进展 | 第18-21页 |
| 1.4.1.1 IGF1R的结构与分布 | 第18-19页 |
| 1.4.1.2 IGF1R的相关功能 | 第19-21页 |
| 1.4.2 RasGRP1基因的研究进展 | 第21-22页 |
| 1.4.2.1 RasGRP1的结构与分布 | 第21页 |
| 1.4.2.2 RasGRP1的相关功能 | 第21-22页 |
| 1.4.3 InsR基因的研究进展 | 第22-24页 |
| 1.4.3.1 InsR的结构与分布 | 第22页 |
| 1.4.3.2 InsR的相关功能 | 第22-24页 |
| 1.5 研究的目的与意义 | 第24-25页 |
| 2 技术路线、材料及方法 | 第25-41页 |
| 2.1 技术路线 | 第25页 |
| 2.2 材料 | 第25-29页 |
| 2.2.1 试验动物群体 | 第25-26页 |
| 2.2.2 菌株、细胞和载体 | 第26-27页 |
| 2.2.2.1 试验菌株 | 第26页 |
| 2.2.2.2 试验细胞系 | 第26页 |
| 2.2.2.3 试验载体 | 第26-27页 |
| 2.2.3 主要试剂及设备 | 第27-28页 |
| 2.2.3.1 主要试剂 | 第27-28页 |
| 2.2.3.2 主要设备 | 第28页 |
| 2.2.4 主要生化试剂的配置 | 第28-29页 |
| 2.2.5 主要数据库和生物学软件 | 第29页 |
| 2.3 方法 | 第29-41页 |
| 2.3.1 选择信号分析 | 第29-30页 |
| 2.3.2 细胞培养 | 第30页 |
| 2.3.2.1 细胞的复苏及培养 | 第30页 |
| 2.3.2.2 细胞传代 | 第30页 |
| 2.3.2.3 细胞冻存 | 第30页 |
| 2.3.3 细胞转染试验 | 第30-31页 |
| 2.3.3.1 转染前的细胞准备 | 第30-31页 |
| 2.3.3.2 转染步骤 | 第31页 |
| 2.3.4 基因表达量分析 | 第31-33页 |
| 2.3.4.1 细胞总RNA抽提 | 第31页 |
| 2.3.4.2 RNA反转录 | 第31-32页 |
| 2.3.4.3 实时荧光定量PCR（Real-time quantitative PCR，Q-PCR） | 第32页 |
| 2.3.4.4 PCR及Q-PCR引物设计 | 第32-33页 |
| 2.3.5 载体的构建及相关试验方法 | 第33-37页 |
| 2.3.5.1 MyoD超表达载体的构建 | 第33-36页 |
| 2.3.5.2 双荧光素酶报告载体的构建 | 第36页 |
| 2.3.5.3 双荧光素酶检测 | 第36-37页 |
| 2.3.5.4 构建载体所需引物 | 第37页 |
| 2.3.6 凝胶迁移试验 | 第37-39页 |
| 2.3.6.1 核蛋白抽提 | 第37页 |
| 2.3.6.2 试剂配制 | 第37-38页 |
| 2.3.6.3 操作步骤 | 第38-39页 |
| 2.3.7 SNP分析 | 第39-40页 |
| 2.3.7.1 扩增SNP位点 | 第39-40页 |
| 2.3.7.2 对SNP进行分型 | 第40页 |
| 2.3.7.3 SNP所用引物信息 | 第40页 |
| 2.3.8 数据统计方法、所用统计软件及统计模型 | 第40-41页 |
| 3 结果与分析 | 第41-63页 |
| 3.1 IGF1R基因候选功能突变位点效应研究 | 第41-55页 |
| 3.1.1 IGF1R基因选择信号分析 | 第41页 |
| 3.1.2 IGF1R等位基因差异表达研究 | 第41-42页 |
| 3.1.3 IGF1R重要候选功能位点的保守性分析 | 第42-43页 |
| 3.1.4 IGF1R基因重要候选突变位点的功能调控研究 | 第43-47页 |
| 3.1.4.1 EMSA实验检测IGF1R基因-61KA/G多态位点与YY1的结合能力 | 第43-44页 |
| 3.1.4.2 双荧光实验检测IGF1R基因-61K A/G片段的功能 | 第44-45页 |
| 3.1.4.3 RNA干扰实验检测YY1对IGF1R表达的调控 | 第45-46页 |
| 3.1.4.4 EMSA实验检测IGF1R基因Intron20 G/A多态位点与MyoD的结合能力 | 第46-47页 |
| 3.1.4.5 Q-PCR检测IGF1R与MyoD在骨骼肌卫星细胞增殖和分化期的表达变化 | 第47页 |
| 3.1.5 IGF1R基因重要候选功能位点的群体研究 | 第47-55页 |
| 3.1.5.1 IGF1R基因-61K A/G多态位点群体研究 | 第47-51页 |
| 3.1.5.2 IGF1R基因Intron20 G/A多态位点群体研究 | 第51-55页 |
| 3.2 RasGRP1基因候选功能突变位点效应研究 | 第55-61页 |
| 3.2.1 RasGRP1基因选择信号分析 | 第55-56页 |
| 3.2.2 RasGRP1等位基因差异表达研究 | 第56-57页 |
| 3.2.3 RasGRP1基因候选功能突变位点保守性分析 | 第57页 |
| 3.2.4 RasGRP1基因+1K A/G多态位点群体研究 | 第57-61页 |
| 3.3 InsR基因候选功能突变位点效应研究 | 第61-63页 |
| 3.3.1 InsR基因选择信号分析 | 第61-62页 |
| 3.3.2 InsR等位基因差异表达研究 | 第62-63页 |
| 4 讨论 | 第63-67页 |
| 4.1 对选择信号分析结果的讨论 | 第63页 |
| 4.2 对等位基因差异表达结果的讨论 | 第63-64页 |
| 4.3 对IGF1R基因-61K A/G多态位点功能调控的讨论 | 第64-65页 |
| 4.4 对IGF1R基因Intron20 G/A多态位点功能调控的讨论 | 第65页 |
| 4.5 对群体关联分析结果的讨论 | 第65-67页 |
| 4.5.1 IGF1R基因-61K A/G多态位点关联分析结果的讨论 | 第65-66页 |
| 4.5.2 IGF1R基因Intron20 G/A多态位点关联分析结果的讨论 | 第66页 |
| 4.5.3 RasGRP1基因+1K A/G多态位点关联分析结果的讨论 | 第66-67页 |
| 5 小结 | 第67-69页 |
| 5.1 本研究的主要结论 | 第67页 |
| 5.2 本研究的创新点与特色 | 第67-68页 |
| 5.3 本研究的不足与进一步工作的建议 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
