摘要 | 第6-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
中英文缩略词 | 第11-13页 |
绪论 | 第13-14页 |
第一部分 材料与仪器 | 第14-17页 |
1 主要试剂 | 第14-16页 |
2 主要仪器 | 第16-17页 |
第二部分 实验方法 | 第17-28页 |
1 细胞培养 | 第17-19页 |
1.1 细胞来源 | 第17-18页 |
1.2 细胞培养 | 第18页 |
1.3 细胞冻存 | 第18-19页 |
1.4 细胞复苏 | 第19页 |
1.5 活细胞计数 | 第19页 |
2 人外周血NK细胞的分离 | 第19-20页 |
2.1 人外周血单个核细胞的分离 | 第19页 |
2.2 免疫磁珠分选NK细胞 | 第19-20页 |
3 RT-PCR | 第20-22页 |
3.1 细胞的总RNA提取 | 第20页 |
3.2 总RNA浓度及纯度的测定 | 第20-21页 |
3.3 总RNA反转录为cDNA | 第21页 |
3.4 引物合成 | 第21-22页 |
3.5 凝胶电泳 | 第22页 |
4 免疫荧光检测 | 第22-23页 |
5 Western Blot | 第23-26页 |
5.1 肿瘤细胞株蛋白的提取 | 第23页 |
5.2 样本蛋白浓度测定 | 第23页 |
5.3 蛋白质聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)电泳 | 第23-25页 |
5.4 蛋白转膜 | 第25页 |
5.5 PVDF膜封闭 | 第25页 |
5.6 目的蛋白检测 | 第25-26页 |
6 细胞迁移实验 | 第26页 |
7 细胞侵袭实验 | 第26页 |
8 酶联免疫吸附测定法(ELISA) | 第26-27页 |
9 统计学方法 | 第27-28页 |
第三部分 结果 | 第28-43页 |
1. IGF-1 及IGF-1R在NK/TCL细胞中的表达情况 | 第28-29页 |
1.1 IGF-1 及IGF-1R m RNA在NK/TCL细胞株中的表达 | 第28页 |
1.2 IGF-1 及IGF-1R蛋白在NK/TCL细胞株中的表达 | 第28-29页 |
2.IGF-1/IGF-1R自分泌环路具有信号转导活性 | 第29-31页 |
2.1 自分泌性IGF-1 可诱导IGF-1R磷酸化 | 第29-30页 |
2.2 IGFR下游通路的磷酸化 | 第30-31页 |
3 IGF-1/IGF-1R信号通路促进NK/TCL细胞株迁移和侵袭 | 第31-38页 |
3.1 IGF-1/IGF-1R信号通路促进NK/TCL细胞株迁移 | 第31-35页 |
3.2 IGF-1/IGF-1R信号通路促进NK/TCL细胞侵袭 | 第35-38页 |
4.受体后信号转导通路对肿瘤细胞迁移的调控 | 第38-39页 |
5. 自分泌环路通过增加MMP-2 和MMP-9 的分泌促进NK/TCL细胞的侵袭 | 第39-43页 |
第四部分 讨论 | 第43-47页 |
第五部分 结论 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-51页 |
第六部分 致谢 | 第51-52页 |
第七部分 攻读硕士学位期间已发表或录用的论文 | 第52-53页 |
综述 | 第53-59页 |
参考文献 | 第57-59页 |