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自分泌IGF-1/IGF-1R环路在NK/TCL中的表达及其对肿瘤迀移和侵袭的调控

摘要第6-7页
ABSTRACT第7-8页
中英文缩略词第11-13页
绪论第13-14页
第一部分 材料与仪器第14-17页
    1 主要试剂第14-16页
    2 主要仪器第16-17页
第二部分 实验方法第17-28页
    1 细胞培养第17-19页
        1.1 细胞来源第17-18页
        1.2 细胞培养第18页
        1.3 细胞冻存第18-19页
        1.4 细胞复苏第19页
        1.5 活细胞计数第19页
    2 人外周血NK细胞的分离第19-20页
        2.1 人外周血单个核细胞的分离第19页
        2.2 免疫磁珠分选NK细胞第19-20页
    3 RT-PCR第20-22页
        3.1 细胞的总RNA提取第20页
        3.2 总RNA浓度及纯度的测定第20-21页
        3.3 总RNA反转录为cDNA第21页
        3.4 引物合成第21-22页
        3.5 凝胶电泳第22页
    4 免疫荧光检测第22-23页
    5 Western Blot第23-26页
        5.1 肿瘤细胞株蛋白的提取第23页
        5.2 样本蛋白浓度测定第23页
        5.3 蛋白质聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)电泳第23-25页
        5.4 蛋白转膜第25页
        5.5 PVDF膜封闭第25页
        5.6 目的蛋白检测第25-26页
    6 细胞迁移实验第26页
    7 细胞侵袭实验第26页
    8 酶联免疫吸附测定法(ELISA)第26-27页
    9 统计学方法第27-28页
第三部分 结果第28-43页
    1. IGF-1 及IGF-1R在NK/TCL细胞中的表达情况第28-29页
        1.1 IGF-1 及IGF-1R m RNA在NK/TCL细胞株中的表达第28页
        1.2 IGF-1 及IGF-1R蛋白在NK/TCL细胞株中的表达第28-29页
    2.IGF-1/IGF-1R自分泌环路具有信号转导活性第29-31页
        2.1 自分泌性IGF-1 可诱导IGF-1R磷酸化第29-30页
        2.2 IGFR下游通路的磷酸化第30-31页
    3 IGF-1/IGF-1R信号通路促进NK/TCL细胞株迁移和侵袭第31-38页
        3.1 IGF-1/IGF-1R信号通路促进NK/TCL细胞株迁移第31-35页
        3.2 IGF-1/IGF-1R信号通路促进NK/TCL细胞侵袭第35-38页
    4.受体后信号转导通路对肿瘤细胞迁移的调控第38-39页
    5. 自分泌环路通过增加MMP-2 和MMP-9 的分泌促进NK/TCL细胞的侵袭第39-43页
第四部分 讨论第43-47页
第五部分 结论第47-48页
参考文献第48-51页
第六部分 致谢第51-52页
第七部分 攻读硕士学位期间已发表或录用的论文第52-53页
综述第53-59页
    参考文献第57-59页

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