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糖尿病环境下miR-126对内皮祖细胞归巢的调控

中文摘要第5-7页
英文摘要第7-8页
主要缩略词第12-15页
绪论第15-17页
第一部分:高糖和糖基化产物对内皮祖细胞上miR-126表达水平的影响第17-46页
    1. 实验方法第17-31页
        1.1 实验仪器与试剂耗材第17-19页
            1.1.1 主要仪器第17页
            1.1.2 主要试剂耗材第17-19页
        1.2 细胞分离、培养和功能实验第19-21页
            1.2.1 选取对象第19页
            1.2.2 内皮祖细胞(EPCs)的分离、培养第19-20页
            1.2.3 细胞CD34、CD133及KDR鉴定第20页
            1.2.4 细胞摄取DiI-Ac-LDL和FITC-UEA-1 鉴定第20-21页
            1.2.5 细胞迁移实验第21页
            1.2.6 体外细胞成管实验第21页
        1.3 高糖或AGEs诱导EPCs上IL-6、TNF-α、ROS和miR-126的表达及相关性研究第21-31页
            1.3.1 四唑盐比色法(WST)检测细胞增殖实验第21-22页
            1.3.2 酶联免疫吸附(ELISA) 实验检测IL-6、TNF-α第22-23页
            1.3.3 流式细胞学和免疫共聚焦检测ROS第23页
            1.3.4 RT-PCR检测EPCs上miR-126表达水平第23-25页
            1.3.5 miR-126降低高糖和AGEs诱导的EPCs上IL-6、TNF-α和ROS的表达第25-31页
            1.3.6 AGEs调控内皮祖细胞上microRNA-126的信号机制第31页
    2. 实验结果第31-43页
        2.1 EPCs的形态,表面抗原鉴定及功能实验第31-35页
        2.2 高糖/AGEs诱导下,IL-6、TNF-α、ROS和miR-126的表达水平变化第35-39页
        2.3 miR-126降低EPCs上IL-6、TNF-α和ROS的表达第39-40页
        2.4 miR-126降低高糖/AGEs环境中EPCs上IL-6、TNF-α和ROS的表达第40-43页
        2.5 AGEs降低EPCs上miR-126表达的信号机制第43页
    3. 讨论第43-46页
第二部分: 2 型糖尿病环境下miR-126在SDF-1α/CXCR4诱导的内皮祖细胞定向迁移中的作用第46-61页
    1. 实验方法第46-55页
        1.1 实验仪器与试剂耗材第46-48页
            1.1.1 主要仪器第46页
            1.1.2 主要试剂耗材第46-48页
        1.2 EPCs的分离、培养及鉴定及miR-126慢病毒载体构建、病毒转染第48页
        1.3 细胞迁移实验第48-49页
            1.3.1 SDF-1α诱导下的EPCs迁移实验第48-49页
            1.3.2 miR-126在SDF-1α诱导EPCs迁移中的作用第49页
        1.4 miR-126对SDF-1α诱导下的EPCs上CXCR4表达的影响第49-54页
            1.4.1 RT-PCR检测CXCR4的mRNA表达第49-51页
            1.4.2 Western Blot检测CXCR4的蛋白表达第51-53页
            1.4.3 流式细胞仪检测EPCs表面CXCR4的表达第53-54页
        1.5 miR-126调控EPCs上CXCR4表达的相关通路蛋白的表达第54-55页
    2.实验结果第55-59页
        2.1 确定实验最适浓度SDF-1α第55-56页
        2.2 SDF-1α诱导下miR-126对EPCs上CXCR4的调控第56-58页
        2.3 MiR-126调控EPCs上CXCR4表达的可能通路蛋白第58-59页
    3. 讨论第59-61页
全文小结第61-62页
参考文献第62-67页
致谢第67-68页
学术论文和科研成果目录第68页

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