| 摘要 | 第5-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 英文缩略语 | 第15-17页 |
| 第一章 研究背景介绍 | 第17-49页 |
| 1.1 FOXP1基因的研究背景 | 第17-29页 |
| 1.1.1 Foxp1基因属于Fox亚家族成员 | 第17-19页 |
| 1.1.2 Foxp1蛋白具有结构多样性 | 第19-21页 |
| 1.1.3 Foxp1蛋白具有重要的生理功能 | 第21-26页 |
| 1.1.4 Fox家族转录活性的调控 | 第26-29页 |
| 1.2 毛囊发育的研究背景 | 第29-48页 |
| 1.2.1 毛囊结构和生长周期 | 第29-31页 |
| 1.2.2 毛囊干细胞的研究背景 | 第31-33页 |
| 1.2.3 重要分子机制对毛囊发育的研究背景 | 第33-40页 |
| 1.2.4 转录因子在毛囊干细胞中的研究现状 | 第40-44页 |
| 1.2.5 内外环境刺激对毛囊发育过程的影响研究 | 第44-48页 |
| 1.3 本论文的研究目的和研究策略 | 第48-49页 |
| 第二章 实验方法和材料 | 第49-83页 |
| 2.1 分子生物学实验方法 | 第49-60页 |
| 2.1.1 常规PCR和点突变PCR | 第49-50页 |
| 2.1.2 限制性内切酶反应与连接反应 | 第50页 |
| 2.1.3 感受态制备与转化 | 第50-51页 |
| 2.1.4 质粒抽提 | 第51页 |
| 2.1.5 RNA抽提 | 第51页 |
| 2.1.6 RNA反转录 | 第51-52页 |
| 2.1.7 qRT-PCR | 第52页 |
| 2.1.8 蛋白质提取方法 | 第52页 |
| 2.1.9 蛋白样品的银染 | 第52-53页 |
| 2.1.10 Western Blot实验 | 第53-54页 |
| 2.1.11 蛋白组织样品的质谱分析实验 | 第54-55页 |
| 2.1.12 荧光素酶定量实验 | 第55-56页 |
| 2.1.13 Co-IP | 第56-57页 |
| 2.1.14 CHIP-PCR | 第57-60页 |
| 2.2 细胞生物学实验方法 | 第60-61页 |
| 2.2.1 细胞系培养 | 第60页 |
| 2.2.2 细胞转染实验 | 第60-61页 |
| 2.2.3 细胞TUNEL实验 | 第61页 |
| 2.3 组织生物学实验方法 | 第61-66页 |
| 2.3.1 石蜡切片与冰冻切片的制备 | 第61-62页 |
| 2.3.2 石蜡切片的HE染色 | 第62-63页 |
| 2.3.3 石蜡切片的免疫荧光 | 第63-64页 |
| 2.3.4 石蜡切片的DAB显色 | 第64-65页 |
| 2.3.5 冰冻切片的免疫荧光 | 第65页 |
| 2.3.6 石蜡切片的Brd U标记 | 第65-66页 |
| 2.4 小鼠相关实验方法 | 第66-75页 |
| 2.4.1 实验动物与设施 | 第66页 |
| 2.4.2 Foxp1条件性敲除小鼠和K14-cre转基因小鼠的获得 | 第66页 |
| 2.4.3 小鼠基因分型 | 第66-68页 |
| 2.4.4 整体原位杂交 | 第68-72页 |
| 2.4.4.1 探针制备和标记 | 第68-69页 |
| 2.4.4.2 获取胚胎 | 第69页 |
| 2.4.4.3 整体原位杂交 | 第69-72页 |
| 2.4.5 小鼠的剃发和脱毛实验 | 第72-73页 |
| 2.4.6 毛囊表皮细胞的组织分离 | 第73-74页 |
| 2.4.7 毛囊表皮干细胞的FACS分析 | 第74页 |
| 2.4.8 氨基酸保守性分析 | 第74-75页 |
| 2.5 实验材料 | 第75-83页 |
| 2.5.1 化学试剂和生物学物品 | 第75-81页 |
| 2.5.1.1 化学试剂 | 第75-77页 |
| 2.5.1.2 生物学物品 | 第77-79页 |
| 2.5.1.3 试剂盒物品 | 第79页 |
| 2.5.1.4 抗体 | 第79-81页 |
| 2.5.2 实验中所用的RNA探针 | 第81页 |
| 2.5.3 引物序列 | 第81-83页 |
| 第三章 实验结果 | 第83-127页 |
| 3.1 FOXP家族在毛囊发育过程中的表达谱分析 | 第83-88页 |
| 3.1.1 Foxp1 / 2 / 4 基因在毛囊组织中的表达分析 | 第84-86页 |
| 3.1.2 Foxp1基因在毛囊形态发生过程中的表达谱分析 | 第86-87页 |
| 3.1.3 Foxp1基因在毛囊再生过程中的表达谱分析 | 第87-88页 |
| 3.2 FOXP1在CKO小鼠皮肤表皮中的敲除效率 | 第88-89页 |
| 3.3 CKO小鼠在毛囊发育过程中的表型分析 | 第89-96页 |
| 3.3.1 cKO小鼠的毛杆表型 | 第89-90页 |
| 3.3.2 Foxp1可能不参与毛囊的形态发生过程 | 第90-91页 |
| 3.3.3 cKO小鼠毛囊生长周期的表型 | 第91-93页 |
| 3.3.4 脱发处理分析c KO小鼠在多轮毛囊再生后的表型 | 第93-96页 |
| 3.4 CKO小鼠其毛囊干细胞的特性分析 | 第96-103页 |
| 3.4.1 cKO小鼠其毛囊干细胞的数量分析 | 第96-97页 |
| 3.4.2 cKO小鼠其毛囊干细胞的增殖分析 | 第97-102页 |
| 3.4.2.1 第一个毛囊生长周期的细胞增殖状况 | 第97-98页 |
| 3.4.2.2 第二个毛囊生长周期的细胞增殖状况 | 第98-101页 |
| 3.4.2.3 c KO小鼠毛囊干细胞的长程LRC干细胞数量减少 | 第101-102页 |
| 3.4.3 cKO小鼠其皮肤表皮细胞的分化分析 | 第102-103页 |
| 3.5 FOXP1蛋白结构受到氧化胁迫刺激的影响 | 第103-107页 |
| 3.5.1 Foxp1蛋白其转录活性和磷酸化/乙酰化水平的改变 | 第103-104页 |
| 3.5.2 Foxp1蛋白的核质穿梭行为 | 第104-106页 |
| 3.5.3 Foxp1蛋白N端的NLS序列 | 第106-107页 |
| 3.6 毛囊细胞ROS的生理功能 | 第107-112页 |
| 3.6.1 毛囊细胞ROS的周期性振荡 | 第107-108页 |
| 3.6.2 毛囊细胞的ROS水平影响其毛囊生长周期事件 | 第108-112页 |
| 3.6.2.1 ROS对T-A转换的影响 | 第109-110页 |
| 3.6.2.2 氧化胁迫刺激对毛囊细胞增殖的影响 | 第110-112页 |
| 3.7 FOXP1通过对细胞ROS的调控影响毛囊生长周期 | 第112-117页 |
| 3.7.1 Foxp1是影响毛囊细胞ROS水平的潜在因素 | 第112-113页 |
| 3.7.2 cKO小鼠其毛囊细胞的ROS水平较低 | 第113-115页 |
| 3.7.3 毛囊细胞ROS水平与其细胞周期的关系 | 第115-117页 |
| 3.8 FOXP1是调控氧化胁迫刺激时的关键元素 | 第117-120页 |
| 3.8.1 毛囊生长周期对TPA刺激的条件反应 | 第117-118页 |
| 3.8.2 毛囊生长周期对NAC刺激的条件反应 | 第118-120页 |
| 3.9 FOXP1蛋白在氧化胁迫途径中的作用 | 第120-125页 |
| 3.9.1 Trx1蛋白在皮肤表皮中的表达分析 | 第120-121页 |
| 3.9.2 Foxp1和Trx1蛋白间的相互作用 | 第121-124页 |
| 3.9.3 Foxp1与细胞ROS间的反馈调控机制 | 第124-125页 |
| 3.10 FOXP1在皮肤癌中的生理功能 | 第125-127页 |
| 第四章 讨论 | 第127-137页 |
| 4.1 FOXP1的动态表达谱 | 第127-129页 |
| 4.2 FOXP1对毛囊细胞周期的调控 | 第129-131页 |
| 4.3 毛囊生长周期中的ROS阈值 | 第131-132页 |
| 4.4 FOXP1与氧化胁迫间的反馈机制 | 第132-133页 |
| 4.5 FOXP1蛋白的生化特性和生理功能 | 第133-135页 |
| 4.6 FOXP1参与皮肤癌的发生 | 第135-137页 |
| 第五章 总结和展望 | 第137-139页 |
| 5.1 总结 | 第137-138页 |
| 5.2 展望 | 第138-139页 |
| 参考文献 | 第139-151页 |
| 致谢 | 第151-153页 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第153页 |
