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烟草烟雾凝集物所致BEAS-2B细胞及其线粒体损伤的机制

摘要第4-7页
Abstract第7-10页
英文缩略词汇表Abbreviations table第15-16页
1 引言第16-18页
2 材料与方法第18-32页
    2.1 实验材料第18-21页
        2.1.1 细胞株第18页
        2.1.2 烟草烟雾凝集物第18页
        2.1.3 主要实验仪器第18-19页
        2.1.4 实验所用试剂第19-20页
        2.1.5 实验试剂的配制第20-21页
    2.2 实验方法第21-32页
        2.2.1 细胞的常规培养、传代与冻存第21-22页
        2.2.2 细胞染毒处理第22-23页
        2.2.3 CCK-8细胞活性检测第23页
        2.2.4 细胞划痕实验第23-24页
        2.2.5 活性氧检测第24页
        2.2.6 总SOD活性检测试剂盒(WST-8法)检测SOD第24-25页
        2.2.7 线粒体膜电位检测第25-26页
        2.2.8 流式细胞术检测细胞凋亡率第26页
        2.2.9 TRIzol法提取细胞总RNA第26页
        2.2.10 RNA逆转录第26-27页
        2.2.11 Real time- qPCR第27-28页
        2.2.12 RT-PCR检测Bcl-2、Bax、Cytc和 caspase-3基因的相对表达量第28页
        2.2.13 Western Blot技术检测各组样品Bcl-2、Bax及活化caspase-3蛋白的相对表达量第28-31页
        2.2.14 数据的统计分析第31-32页
3 结果第32-47页
    3.1 CSC染毒对BEAS-2B细胞形态及功能的影响第32-36页
        3.1.1 CCK-8细胞活性检测确定CSC染毒浓度第32-33页
        3.1.2 细胞形态学改变第33-34页
        3.1.3 细胞划痕实验检测细胞迁移能力第34-36页
    3.2 CSC染毒后BEAS-2B细胞ROS与SOD水平的改变第36-39页
        3.2.1 活性氧试剂盒检测细胞ROS水平第36-38页
        3.2.2 总SOD活性检测试剂盒(WST-8法)检测SOD第38-39页
    3.3 流式细胞术检测细胞凋亡率第39-40页
    3.4 CSC染毒对BEAS-2B细胞线粒体的影响第40-47页
        3.4.1 线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)检测线粒体膜电位第40-41页
        3.4.2 荧光定量PCR检测Bcl-2、Bax、Cytc和caspase-3 基因表达情况第41-44页
        3.4.3 Western Blot检测Bcl-2、Bax、活化caspase-3蛋白表达情况第44-47页
4 讨论第47-53页
5 结论第53-54页
参考文献第54-58页
综述 线粒体介导的细胞凋亡的研究现状第58-68页
    参考文献第64-68页
个人简历在学期间发表的学术论文与研究成果第68-69页
致谢第69页

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