摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
部分缩写的中英文对照 | 第9-12页 |
引言 | 第12-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-28页 |
1.1 布鲁氏菌病概述 | 第13-15页 |
1.1.1 布鲁氏菌的发现 | 第13-14页 |
1.1.2 布鲁氏菌的种类与生物学特征 | 第14页 |
1.1.3 布鲁氏菌的致病机制 | 第14页 |
1.1.4 布鲁氏菌病的诊断检测 | 第14-15页 |
1.2 MHC基因的研究进展 | 第15-20页 |
1.2.1 MHC基因概述及其功能 | 第15-16页 |
1.2.2 MHC分子结构 | 第16-17页 |
1.2.3 绵羊MHC结构及物理图谱 | 第17-19页 |
1.2.4 OLA-DRA基因多态性 | 第19页 |
1.2.5 OLA-DRA基因与疾病相关性研究 | 第19-20页 |
1.3 单核苷酸多态性的检测技术 | 第20-22页 |
1.3.1 PCR-SSCP方法的原理 | 第21-22页 |
1.3.2 PCR-SSCP技术在遗传变异研究中的应用 | 第22页 |
1.4 酵母表面展示技术 | 第22-24页 |
1.4.1 表面展示技术的发展历程 | 第22页 |
1.4.2 酵母表面展示技术原理 | 第22-23页 |
1.4.3 酵母表面展示系统类型 | 第23页 |
1.4.4 酵母表面展示技术的特点 | 第23页 |
1.4.5 酵母表面展示技术的优势 | 第23-24页 |
1.5 本研究目的及意义 | 第24-26页 |
技术路线图 | 第26-28页 |
第二章 绵羊DRA基因exon2的SNP位点检测分析 | 第28-40页 |
2.1 材料与方法 | 第28-35页 |
2.1.1 试验材料及仪器 | 第28-29页 |
2.1.2 溶剂配置方法 | 第29-30页 |
2.1.3 主要分子生物学软件 | 第30页 |
2.1.4 试验方法 | 第30-35页 |
2.2 结果与分析 | 第35-39页 |
2.2.1 血清布鲁氏菌阴阳性检测结果 | 第35页 |
2.2.2 所提取DNA的电泳检测 | 第35-36页 |
2.2.3 基因组DNA的浓度 | 第36页 |
2.2.4 OLA-DRA基因exon2的PCR检测 | 第36-37页 |
2.2.5 SSCP电泳结果 | 第37页 |
2.2.6 OLA-DRA基因exon2片段测序结果 | 第37-38页 |
2.2.7 OLA-DRA基因exon2的遗传多态性 | 第38页 |
2.2.8 OLA-DRA基因exon2的单氨基酸多态性 | 第38页 |
2.2.9 OLA-DRA与HLA-DRA基因exon2的SNPs比较 | 第38-39页 |
2.3 结论 | 第39-40页 |
第三章 绵羊DRA基因exon2酵母表面展示库的构建及鉴定 | 第40-64页 |
3.1 材料和方法 | 第40-53页 |
3.1.1 试验材料 | 第40页 |
3.1.2 常规溶液及培养基配置 | 第40-41页 |
3.1.3 主要分子生物学软件 | 第41页 |
3.1.4 试验方法 | 第41-53页 |
3.2 结果与讨论 | 第53-63页 |
3.2.1 绵羊DRA基因exon2的PCR及多态位点检测结果 | 第53-54页 |
3.2.2 绵羊总RNA的提取检测结果 | 第54-55页 |
3.2.3 绵羊DRA基因RT-PCR的检测结果 | 第55页 |
3.2.4 绵羊DRA基因PCR切胶回收产物的检测结果 | 第55-56页 |
3.2.5 绵羊DRA基因cDNA的克隆检测结果 | 第56-57页 |
3.2.6 绵羊pEASY-T1-DRA重组子序列的测定 | 第57-58页 |
3.2.7 构建重组表面展示质粒pYD1-DRA的鉴定结果 | 第58-60页 |
3.2.8 快速突变pEASY-T1-DRA构成特定酶切位点 | 第60-61页 |
3.2.9 构建突变后重组表面展示质粒pYD1-DRA-TB的鉴定结果 | 第61-62页 |
3.2.10 酵母表面展示库的建立及细胞免疫荧光检测 | 第62-63页 |
3.3 结论 | 第63-64页 |
第四章 总结与展望 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-71页 |
致谢 | 第71-72页 |
作者简介 | 第72-74页 |
导师评阅表 | 第74页 |