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绵羊MHC Ⅱ DRA基因酵母表面展示库的建立及其鉴定

摘要第5-7页
Abstract第7-8页
部分缩写的中英文对照第9-12页
引言第12-13页
第一章 文献综述第13-28页
    1.1 布鲁氏菌病概述第13-15页
        1.1.1 布鲁氏菌的发现第13-14页
        1.1.2 布鲁氏菌的种类与生物学特征第14页
        1.1.3 布鲁氏菌的致病机制第14页
        1.1.4 布鲁氏菌病的诊断检测第14-15页
    1.2 MHC基因的研究进展第15-20页
        1.2.1 MHC基因概述及其功能第15-16页
        1.2.2 MHC分子结构第16-17页
        1.2.3 绵羊MHC结构及物理图谱第17-19页
        1.2.4 OLA-DRA基因多态性第19页
        1.2.5 OLA-DRA基因与疾病相关性研究第19-20页
    1.3 单核苷酸多态性的检测技术第20-22页
        1.3.1 PCR-SSCP方法的原理第21-22页
        1.3.2 PCR-SSCP技术在遗传变异研究中的应用第22页
    1.4 酵母表面展示技术第22-24页
        1.4.1 表面展示技术的发展历程第22页
        1.4.2 酵母表面展示技术原理第22-23页
        1.4.3 酵母表面展示系统类型第23页
        1.4.4 酵母表面展示技术的特点第23页
        1.4.5 酵母表面展示技术的优势第23-24页
    1.5 本研究目的及意义第24-26页
    技术路线图第26-28页
第二章 绵羊DRA基因exon2的SNP位点检测分析第28-40页
    2.1 材料与方法第28-35页
        2.1.1 试验材料及仪器第28-29页
        2.1.2 溶剂配置方法第29-30页
        2.1.3 主要分子生物学软件第30页
        2.1.4 试验方法第30-35页
    2.2 结果与分析第35-39页
        2.2.1 血清布鲁氏菌阴阳性检测结果第35页
        2.2.2 所提取DNA的电泳检测第35-36页
        2.2.3 基因组DNA的浓度第36页
        2.2.4 OLA-DRA基因exon2的PCR检测第36-37页
        2.2.5 SSCP电泳结果第37页
        2.2.6 OLA-DRA基因exon2片段测序结果第37-38页
        2.2.7 OLA-DRA基因exon2的遗传多态性第38页
        2.2.8 OLA-DRA基因exon2的单氨基酸多态性第38页
        2.2.9 OLA-DRA与HLA-DRA基因exon2的SNPs比较第38-39页
    2.3 结论第39-40页
第三章 绵羊DRA基因exon2酵母表面展示库的构建及鉴定第40-64页
    3.1 材料和方法第40-53页
        3.1.1 试验材料第40页
        3.1.2 常规溶液及培养基配置第40-41页
        3.1.3 主要分子生物学软件第41页
        3.1.4 试验方法第41-53页
    3.2 结果与讨论第53-63页
        3.2.1 绵羊DRA基因exon2的PCR及多态位点检测结果第53-54页
        3.2.2 绵羊总RNA的提取检测结果第54-55页
        3.2.3 绵羊DRA基因RT-PCR的检测结果第55页
        3.2.4 绵羊DRA基因PCR切胶回收产物的检测结果第55-56页
        3.2.5 绵羊DRA基因cDNA的克隆检测结果第56-57页
        3.2.6 绵羊pEASY-T1-DRA重组子序列的测定第57-58页
        3.2.7 构建重组表面展示质粒pYD1-DRA的鉴定结果第58-60页
        3.2.8 快速突变pEASY-T1-DRA构成特定酶切位点第60-61页
        3.2.9 构建突变后重组表面展示质粒pYD1-DRA-TB的鉴定结果第61-62页
        3.2.10 酵母表面展示库的建立及细胞免疫荧光检测第62-63页
    3.3 结论第63-64页
第四章 总结与展望第64-65页
参考文献第65-71页
致谢第71-72页
作者简介第72-74页
导师评阅表第74页

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