| 摘要 | 第8-9页 |
| 英文摘要 | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第11-20页 |
| 1.1 氨基酸对奶牛泌乳的调节作用 | 第11-12页 |
| 1.1.1 奶牛乳腺发育及泌乳 | 第11页 |
| 1.1.2 氨基酸对泌乳的调节作用 | 第11-12页 |
| 1.2 氨酰tRNA合成酶的研究进展 | 第12-14页 |
| 1.2.1 氨酰tRNA合成酶的结构与生物学功能 | 第12-13页 |
| 1.2.2 aaRS的非经典功能 | 第13页 |
| 1.2.3 甘氨酰tRNA合成酶的研究进展 | 第13-14页 |
| 1.3 MAP3K10结构与功能 | 第14-15页 |
| 1.4 GPCR-Rac1/CDC42信号通路相关研究 | 第15-18页 |
| 1.4.1 G蛋白偶联受体 | 第15-16页 |
| 1.4.2 Rac1/CDC42结构与功能 | 第16-18页 |
| 1.5 NFκB1信号通路与泌乳调节 | 第18页 |
| 1.6 实验目的与意义 | 第18-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-35页 |
| 2.1 实验材料 | 第20-21页 |
| 2.1.1 主要实验仪器 | 第20页 |
| 2.1.2 实验动物与细胞 | 第20页 |
| 2.1.3 主要实验试剂 | 第20-21页 |
| 2.2 主要试剂的配制 | 第21-23页 |
| 2.3 实验方法 | 第23-34页 |
| 2.3.1 奶牛乳腺上皮细胞的培养 | 第23-25页 |
| 2.3.2 真核表达载体的构建 | 第25-29页 |
| 2.3.3 SDS-PAGE及免疫印迹 | 第29-30页 |
| 2.3.4 免疫共沉淀 | 第30页 |
| 2.3.5 细胞转染 | 第30-32页 |
| 2.3.6 GTP酶活性检测 | 第32-34页 |
| 2.4 数据分析 | 第34-35页 |
| 3 结果与分析 | 第35-48页 |
| 3.1 奶牛乳腺上皮细胞培养与泌乳模型的建立 | 第35-37页 |
| 3.1.1 奶牛乳腺上皮细胞的原代培养与纯化 | 第35-36页 |
| 3.1.2 奶牛乳腺上皮细胞的鉴定 | 第36-37页 |
| 3.2 GlyRS与不同激酶相互作用的验证 | 第37-39页 |
| 3.2.1 Co-IP实验证明GlyRS与MAP3K10、CRIK和MRCKa之间的关系 | 第37-38页 |
| 3.2.2 蛋氨酸对MAP3K10调节GlyRS信号的作用 | 第38-39页 |
| 3.3 氨基酸通过GPR87/CDC42/Rac1通路对GlyRS的影响 | 第39-45页 |
| 3.3.1 不同氨基酸处理对GPR87的影响 | 第39-40页 |
| 3.3.2 GPR87介导蛋氨酸对GlyRS上游激酶的影响 | 第40-41页 |
| 3.3.3 CDC42/Rac1介导GPR87激活MAP3K10 | 第41-45页 |
| 3.3.4 CDC42与Rac1共抑制对MAP3K10的影响 | 第45页 |
| 3.4 MAP3K10通过GlyRS激活NFκB1 | 第45-48页 |
| 3.4.1 MAP3K10过表达载体的构建 | 第45-47页 |
| 3.4.2 GlyRS介导MAP3K10对NFκB1的影响 | 第47-48页 |
| 4 讨论 | 第48-51页 |
| 4.1 MAP3K10、CRIK和MRCKα对GlyRS的激活 | 第48-49页 |
| 4.2 氨基酸对GPR87-CDC42/Rac1信号通路的作用 | 第49-50页 |
| 4.3 GlyRS对NFκB1的调节作用 | 第50-51页 |
| 5 结论 | 第51-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-59页 |
| 附录 | 第59-61页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第61页 |
