| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 缩略语表（ABBREVIATION） | 第11-14页 |
| 第1章 文献综述 | 第14-25页 |
| 1.1 细胞凋亡简介 | 第14页 |
| 1.2 细胞凋亡特征 | 第14-15页 |
| 1.2.1 细胞凋亡形态学特征 | 第14页 |
| 1.2.2 DNA片段化 | 第14-15页 |
| 1.2.3 组织谷氨酰胺转移酶活化 | 第15页 |
| 1.3 细胞凋亡信号通路 | 第15-18页 |
| 1.3.1 死亡受体通路 | 第16页 |
| 1.3.2 线粒体通路 | 第16页 |
| 1.3.3 内质网通路 | 第16-18页 |
| 1.4 细胞凋亡检测方法 | 第18-23页 |
| 1.4.1 形态学观察 | 第18-19页 |
| 1.4.2 DNA片段化检测 | 第19-20页 |
| 1.4.3 磷脂酰丝氨酸定位检测 | 第20-21页 |
| 1.4.4 凋亡相关基因检测 | 第21页 |
| 1.4.5 新型细胞凋亡检测方法 | 第21-23页 |
| 1.5 结核分枝杆菌与细胞凋亡 | 第23-25页 |
| 1.5.1 抑制细胞凋亡 | 第23-24页 |
| 1.5.2 促进细胞凋亡 | 第24页 |
| 1.5.3 ESAT-6 家族蛋白与细胞凋亡 | 第24-25页 |
| 第2章 目的与意义 | 第25-26页 |
| 第3章 材料与方法 | 第26-37页 |
| 3.1 试验材料 | 第26-30页 |
| 3.1.1 细胞与菌株 | 第26页 |
| 3.1.2 引物、载体 | 第26页 |
| 3.1.3 工具酶及主要试剂 | 第26-27页 |
| 3.1.4 培养基和抗生素的配制 | 第27-28页 |
| 3.1.5 主要缓冲液和试剂及其配制 | 第28-29页 |
| 3.1.6 主要实验仪器及设备 | 第29页 |
| 3.1.7 分子生物学分析软件 | 第29页 |
| 3.1.8 统计学方法 | 第29-30页 |
| 3.2 试验方法 | 第30-37页 |
| 3.2.1 报告质粒的构建 | 第30页 |
| 3.2.2 ESAT-6 家族蛋白真核表达质粒的构建 | 第30页 |
| 3.2.3 酶切产物回收与纯化 | 第30页 |
| 3.2.4 外源DNA片段与质粒载体的连接反应 | 第30-31页 |
| 3.2.5 大肠杆菌感受态细胞的制备（氯化钙法） | 第31页 |
| 3.2.6 连接产物的转化 | 第31-32页 |
| 3.2.7 质粒的制备与鉴定 | 第32-33页 |
| 3.2.8 质粒转染（脂质体介导转染法） | 第33-34页 |
| 3.2.9 双荧光素酶检测实验 | 第34页 |
| 3.2.10 细胞凋亡检测 | 第34页 |
| 3.2.11 实时荧光定量PCR | 第34-36页 |
| 3.2.12 Western Blot样品准备 | 第36-37页 |
| 第4章 结果与分析 | 第37-47页 |
| 4.1 Caspase-3 报告质粒的构建 | 第37-39页 |
| 4.2 Caspase-3 报告质粒的验证 | 第39-41页 |
| 4.3 结核分枝杆菌ESAT-6 家族蛋白的筛选 | 第41-43页 |
| 4.4 筛选结果的验证 | 第43-45页 |
| 4.5 核因子-kB（NF-kB）参与esxT诱导的细胞凋亡 | 第45-47页 |
| 第5章 讨论与结论 | 第47-51页 |
| 5.1 讨论 | 第47-50页 |
| 5.1.1 Npu DnaE内含肽的选择 | 第47-48页 |
| 5.1.2 真核表达的选择 | 第48页 |
| 5.1.3 促进TNF-α 诱导细胞凋亡的筛选 | 第48-49页 |
| 5.1.4 结核分枝杆菌ESAT-6 家族蛋白的筛选及验证 | 第49-50页 |
| 5.2 结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 附录 | 第61页 |
