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多基因遗传修饰猪体外抑制猪流感病毒增殖的初步分析

摘要第6-7页
Abstract第7-8页
英文缩略表第12-13页
第一章 引言第13-21页
    1.1 RNA干扰技术研究进展第13-15页
        1.1.1 RNA干扰第13页
        1.1.2 RNAi作用机制第13-14页
        1.1.3 RNAi技术抑制病毒复制研究第14-15页
    1.2 Mx基因及其蛋白研究进展第15-17页
        1.2.1 Mx基因的发现及其结构第15页
        1.2.2 不同种属动物的Mx蛋白第15-16页
        1.2.3 Mx蛋白的抑制病毒复制研究第16页
        1.2.4 展望第16-17页
    1.3 转基因猪研究进展第17-21页
        1.3.1 转基因动物制备方法第17-18页
        1.3.2 转基因猪的应用研究第18-19页
        1.3.3 展望第19-21页
第二章 表达多基因转基因猪的制备与遗产稳定性研究第21-40页
    2.1 材料与方法第21-28页
        2.1.1 实验材料第21-22页
        2.1.2 主要实验仪器第22页
        2.1.3 主要试剂第22页
        2.1.4 试剂配制第22页
        2.1.5 引物设计及合成第22-23页
        2.1.6 转基因猪的制备第23-24页
        2.1.7 F0代转基因猪鉴定第24-27页
        2.1.8 F1代转基因猪鉴定第27-28页
    2.2 结果第28-38页
        2.2.1 转基因猪的制备第28-30页
        2.2.2 F0代转基因猪的转基因整合分析第30-31页
        2.2.3 F0代转基因猪的转基因表达分析第31-33页
        2.2.4 F0代转基因猪的转基因拷贝数检测第33-34页
        2.2.5 整合位点分析与验证第34-36页
        2.2.6 F1代转基因猪的转基因整合分析第36-37页
        2.2.7 F1代转基因猪的转基因表达分析第37-38页
    2.3 讨论第38-40页
第三章 细胞水平研究转基因猪抑制流感病毒活性第40-48页
    3.1 材料与方法第40-43页
        3.1.1 实验动物与细胞第40页
        3.1.2 病毒与载体第40-41页
        3.1.3 主要实验仪器第41页
        3.1.4 主要试剂第41页
        3.1.5 引物设计及合成第41页
        3.1.6 流感病毒毒力测定第41页
        3.1.7 F1代转基因猪尾成纤维细胞分离培养第41-42页
        3.1.8 流感病毒感染猪成纤维细胞第42页
        3.1.9 间接免疫荧光检测转基因猪成纤维细胞抑制流感病毒增值第42页
        3.1.10实时荧光定量PCR检测流感病毒PB2基因mRNA含量第42-43页
        3.1.11细胞上清中流感病毒滴度测定第43页
        3.1.12数据统计第43页
    3.2 结果第43-45页
        3.2.1 流感病毒TCID50测定结果第43页
        3.2.2 猪尾成纤维细胞的分离培养第43-44页
        3.2.3 间接免疫荧光检测结果第44页
        3.2.4 荧光定量PCR检测流感病毒PB2基因mRNA含量结果第44-45页
        3.2.5 细胞上清病毒滴度测定结果第45页
    3.3 讨论第45-48页
第四章 全文结论第48-49页
参考文献第49-56页
致谢第56-57页
作者简历第57页

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