摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
英文缩略表 | 第12-13页 |
第一章 引言 | 第13-21页 |
1.1 RNA干扰技术研究进展 | 第13-15页 |
1.1.1 RNA干扰 | 第13页 |
1.1.2 RNAi作用机制 | 第13-14页 |
1.1.3 RNAi技术抑制病毒复制研究 | 第14-15页 |
1.2 Mx基因及其蛋白研究进展 | 第15-17页 |
1.2.1 Mx基因的发现及其结构 | 第15页 |
1.2.2 不同种属动物的Mx蛋白 | 第15-16页 |
1.2.3 Mx蛋白的抑制病毒复制研究 | 第16页 |
1.2.4 展望 | 第16-17页 |
1.3 转基因猪研究进展 | 第17-21页 |
1.3.1 转基因动物制备方法 | 第17-18页 |
1.3.2 转基因猪的应用研究 | 第18-19页 |
1.3.3 展望 | 第19-21页 |
第二章 表达多基因转基因猪的制备与遗产稳定性研究 | 第21-40页 |
2.1 材料与方法 | 第21-28页 |
2.1.1 实验材料 | 第21-22页 |
2.1.2 主要实验仪器 | 第22页 |
2.1.3 主要试剂 | 第22页 |
2.1.4 试剂配制 | 第22页 |
2.1.5 引物设计及合成 | 第22-23页 |
2.1.6 转基因猪的制备 | 第23-24页 |
2.1.7 F0代转基因猪鉴定 | 第24-27页 |
2.1.8 F1代转基因猪鉴定 | 第27-28页 |
2.2 结果 | 第28-38页 |
2.2.1 转基因猪的制备 | 第28-30页 |
2.2.2 F0代转基因猪的转基因整合分析 | 第30-31页 |
2.2.3 F0代转基因猪的转基因表达分析 | 第31-33页 |
2.2.4 F0代转基因猪的转基因拷贝数检测 | 第33-34页 |
2.2.5 整合位点分析与验证 | 第34-36页 |
2.2.6 F1代转基因猪的转基因整合分析 | 第36-37页 |
2.2.7 F1代转基因猪的转基因表达分析 | 第37-38页 |
2.3 讨论 | 第38-40页 |
第三章 细胞水平研究转基因猪抑制流感病毒活性 | 第40-48页 |
3.1 材料与方法 | 第40-43页 |
3.1.1 实验动物与细胞 | 第40页 |
3.1.2 病毒与载体 | 第40-41页 |
3.1.3 主要实验仪器 | 第41页 |
3.1.4 主要试剂 | 第41页 |
3.1.5 引物设计及合成 | 第41页 |
3.1.6 流感病毒毒力测定 | 第41页 |
3.1.7 F1代转基因猪尾成纤维细胞分离培养 | 第41-42页 |
3.1.8 流感病毒感染猪成纤维细胞 | 第42页 |
3.1.9 间接免疫荧光检测转基因猪成纤维细胞抑制流感病毒增值 | 第42页 |
3.1.10实时荧光定量PCR检测流感病毒PB2基因mRNA含量 | 第42-43页 |
3.1.11细胞上清中流感病毒滴度测定 | 第43页 |
3.1.12数据统计 | 第43页 |
3.2 结果 | 第43-45页 |
3.2.1 流感病毒TCID50测定结果 | 第43页 |
3.2.2 猪尾成纤维细胞的分离培养 | 第43-44页 |
3.2.3 间接免疫荧光检测结果 | 第44页 |
3.2.4 荧光定量PCR检测流感病毒PB2基因mRNA含量结果 | 第44-45页 |
3.2.5 细胞上清病毒滴度测定结果 | 第45页 |
3.3 讨论 | 第45-48页 |
第四章 全文结论 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-56页 |
致谢 | 第56-57页 |
作者简历 | 第57页 |