摘要 | 第7-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
文献综述 | 第13-19页 |
第一章 选题依据 | 第19-23页 |
1.1.引言 | 第19页 |
1.2.肿瘤的转移与MMPs | 第19-20页 |
1.2.1.肿瘤的侵袭转移 | 第19页 |
1.2.2.肿瘤的转移与MMPs | 第19-20页 |
1.3.莪术醇在乳腺癌治疗方面的研究进展与目前研究存在的问题 | 第20页 |
1.4.本课题的出发点及研究意义 | 第20页 |
1.5.课题研究的研究内容及预期结果 | 第20-23页 |
第二章 莪术醇对乳腺癌细胞迁移、侵袭和粘附的影响 | 第23-33页 |
2.1.仪器与材料 | 第23页 |
2.1.1.仪器设备 | 第23页 |
2.1.2.实验材料 | 第23页 |
2.2.实验方法 | 第23-25页 |
2.2.1.主要溶液的配置 | 第23-24页 |
2.2.2.细胞株的培养 | 第24页 |
2.2.3.细胞存活率的测定 | 第24页 |
2.2.4.平板克隆实验 | 第24页 |
2.2.5.划痕实验 | 第24-25页 |
2.2.6.Transwell小室侵袭实验 | 第25页 |
2.2.7.粘附实验 | 第25页 |
2.2.8.统计分析 | 第25页 |
2.3.结果 | 第25-29页 |
2.3.1.莪术醇对乳腺癌细胞MDA-MB-231和 4T1的细胞毒性 | 第25-26页 |
2.3.2.莪术醇抑制乳腺癌细胞的迁移和侵袭 | 第26-29页 |
2.3.3. 莪术醇抑制乳腺癌细胞的粘附作用 | 第29页 |
2.4.讨论 | 第29-31页 |
2.5.小结 | 第31-33页 |
第三章 莪术醇抑制乳腺癌细胞转移的基质金属蛋白酶机制研究 | 第33-49页 |
3.1.仪器与材料 | 第33-34页 |
3.1.1.仪器设备 | 第33页 |
3.1.2.实验材料 | 第33-34页 |
3.2.实验方法 | 第34-38页 |
3.2.1.主要溶液的配置 | 第34-35页 |
3.2.2. 细胞株的培养 | 第35页 |
3.2.3.划痕实验 | 第35页 |
3.2.4.Transwell小室侵袭实验 | 第35页 |
3.2.5.粘附实验 | 第35-36页 |
3.2.6.双荧光素酶报告基因检测 | 第36页 |
3.2.7.总蛋白提取 | 第36页 |
3.2.8.核蛋白的提取 | 第36页 |
3.2.9.Bradford法测定蛋白浓度 | 第36-37页 |
3.2.10.Western Blot检测分析 | 第37-38页 |
3.2.11.MMP-9 酶谱活性分析 | 第38页 |
3.2.12.统计分析 | 第38页 |
3.3.实验结果 | 第38-46页 |
3.3.1.莪术醇对MDA-MB-231细胞MMP-9 的抑制以及磷酸化的JNK1/2,磷酸化的Akt和NF-κB的抑制 | 第38-42页 |
3.3.2.莪术醇对MMP-9 蛋白的抑制可能与JNK1/2、Akt、NF-κB通路相关24 | 第42-43页 |
3.3.3.莪术醇对乳腺癌细胞MDA-MB-231细胞迁移、侵袭和粘附的抑制可能与JNK1/2、Akt和NF-κB相关 | 第43-46页 |
3.4.讨论 | 第46-48页 |
3.5.小结 | 第48-49页 |
第四章 蛋白质组学技术分析莪术醇抗乳腺癌转移的潜在作用靶标 | 第49-63页 |
4.1.主要材料仪器 | 第49-50页 |
4.1.1.主要材料 | 第49页 |
4.1.2.仪器设备 | 第49-50页 |
4.2.实验方法 | 第50-54页 |
4.2.1.配液 | 第50-51页 |
4.2.2.细胞株的培养 | 第51页 |
4.2.3.药物处理与蛋白的提取 | 第51页 |
4.2.4.第一向等电聚焦 | 第51页 |
4.2.5.第二向SDS-PAGE分离 | 第51-52页 |
4.2.6.银染 | 第52页 |
4.2.7.考马斯亮蓝染色 | 第52页 |
4.2.8.图像的扫描分析与凝胶的保存 | 第52页 |
4.2.9.质谱前处理 | 第52页 |
4.2.10.MALDI-TOF/TOF质谱分析鉴定 | 第52-53页 |
4.2.11.总RNA提取 | 第53页 |
4.2.12.RT-PCR检测 | 第53页 |
4.2.13.统计分析 | 第53-54页 |
4.3.实验结果 | 第54-59页 |
4.3.1.蛋白质组学方法鉴定莪术醇作用的差异表达蛋白 | 第54页 |
4.3.2.GO分析法分析鉴定的蛋白 | 第54-55页 |
4.3.3.KEGG法分析鉴定的蛋白 | 第55-58页 |
4.3.4.莪术醇抑制肿瘤转移相关蛋白的发现和验证 | 第58-59页 |
4.4.讨论 | 第59-61页 |
4.5.小结 | 第61-63页 |
全文总结 | 第63-65页 |
本课题的创新点 | 第65-67页 |
思考与展望 | 第67-69页 |
参考文献 | 第69-75页 |
中英文缩略名词对照表 | 第75-79页 |
致谢 | 第79-81页 |
硕士学位期间科研工作汇报 | 第81-82页 |
文章发表 | 第81页 |
获得奖励 | 第81-82页 |
参加会议 | 第82页 |