| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 第一章 研究背景 | 第14-30页 |
| 第一节 糖原合酶激酶-3(GSK3)基因与PI3K/Akt/GSK3信号通路概述 | 第14-25页 |
| 一、GSK3的定义 | 第14-15页 |
| 二、GSK3的分子结构 | 第15-17页 |
| 三、GSK3的作用机制 | 第17-18页 |
| 四、GSK3对固有免疫系统的调节 | 第18-20页 |
| 五、GSK3对获得性免疫系统的调节 | 第20-22页 |
| 六、GSK3在无脊椎动物中的研究进展 | 第22页 |
| 七、PI3K-Akt信号通路的定义 | 第22页 |
| 八、PI3K-Akt-GSK3信号通路的功能 | 第22-25页 |
| 第二节 Ras/ERK信号通路概述 | 第25-26页 |
| 一、细胞外信号调节激酶(ERK)简介 | 第25页 |
| 二、Ras/ERK信号通路简介 | 第25-26页 |
| 第三节 PI3K/Akt与Ras/ERK信号通路的相互作用 | 第26-29页 |
| 一、Ras/ERK和PI3K信号转导动力学 | 第26-27页 |
| 二、Ras/ERK和PI3K途径整合的机制 | 第27-28页 |
| 三、Ras/ERK和PI3K途径之间的交叉抑制 | 第28-29页 |
| 第四节 研究展望及本研究的目的和意义 | 第29-30页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第30-41页 |
| 第一节 实验材料 | 第30-32页 |
| 一、实验动物 | 第30页 |
| 二、实验菌株 | 第30页 |
| 三、生物试剂 | 第30-32页 |
| 四、仪器设备 | 第32页 |
| 第二节 实验方法 | 第32-41页 |
| 一、基因克隆 | 第32-35页 |
| 二、目的基因的生物信息学分析 | 第35-36页 |
| 三、实验动物的处理及样品收集 | 第36页 |
| 四、EsGSK3和脂多糖诱导的肿瘤坏死因子(EsLITAF)mRNA表达的定量实时PCR分析 | 第36-37页 |
| 五、免疫荧光测定 | 第37页 |
| 六、特异性抑制剂锂抑制EsGSK3 | 第37页 |
| 七、体内ERK2的RNA干扰 | 第37-38页 |
| 八、血淋巴上清中TNF-α 水平的测定 | 第38页 |
| 九、流式细胞仪测量血细胞吞噬作用 | 第38-39页 |
| 十、糖原含量分析 | 第39页 |
| 十一、葡萄糖含量的测定 | 第39页 |
| 十二、碱性磷酸酶(ALP)的测定 | 第39页 |
| 十三、过氧化氢酶(CAT)的测定 | 第39页 |
| 十四、总NO含量和NOS活性检测 | 第39-40页 |
| 十五、数据分析 | 第40-41页 |
| 第三章 实验结果 | 第41-77页 |
| 第一节 中华绒螯蟹GSK3基因在免疫应答过程中调控作用的研究 | 第41-60页 |
| 一、EsGSK3分子的基本特征及进化分析 | 第41-45页 |
| 二、EsGSK3在中华绒螯蟹的组织分布 | 第45-46页 |
| 三、EsGSK3在中华绒螯蟹血细胞中的定位 | 第46-47页 |
| 四、菌刺激后血淋巴细胞中EsGSK3 mRNA表达水平的时序变化 | 第47-49页 |
| 五、抑制EsGSK3后中华绒螯蟹肝胰腺中糖原与血淋巴上清中葡萄糖时序变化 | 第49-51页 |
| 六、抑制EsGSK3后中华绒螯蟹IκB基因mRNA表达水平的时序变化 | 第51页 |
| 七、抑制EsGSK3对TNF-α 产生的影响 | 第51-53页 |
| 八、抑制EsGSK3后EsLITAF的mRNA表达 | 第53-54页 |
| 九、抑制EsGSK3后中华绒螯蟹血淋巴上清中CAT和ALP活性变化 | 第54-56页 |
| 十、抑制EsGSK3后中华绒螯蟹血淋巴细胞的吞噬水平的变化 | 第56-57页 |
| 十一、EsGSK3影响嗜水气单胞菌刺激后中华绒鳌蟹的一氧化氮系统 | 第57-60页 |
| 第二节 中华绒螯蟹ERK基因的克隆及其表达特征的研究 | 第60-71页 |
| 一、EsERK分子的基本特征及进化分析 | 第60-64页 |
| 二、EsERK在中华绒螯蟹的组织分布 | 第64-65页 |
| 三、菌刺激后血淋巴细胞中EsERK mRNA表达水平的时序变化 | 第65页 |
| 四、对EsERK的RNA干扰抑制中华绒鳌蟹血细胞内ERK基因的表达 | 第65-66页 |
| 五、RNA干扰EsERK后中华绒螯蟹肝胰腺中糖原与血淋巴上清中葡萄糖的时序变化 | 第66-67页 |
| 六、对EsERK的RNA干扰可刺激中华绒鳌蟹血细胞内IκB基因的表达 | 第67-68页 |
| 七、对EsERK的RNA干扰可抑制中华绒鳌蟹血细胞内EsLITAF基因的表达 | 第68-69页 |
| 八、抑制EsGSK3活性可促进中华绒鳌蟹血细胞内EsERK基因的表达 | 第69页 |
| 九、对EsERK的RNA干扰可提高中华绒鳌蟹血淋巴上清中SOD的活性 | 第69-71页 |
| 第三节 中华绒螯蟹Akt基因的克隆及其表达特征的研究 | 第71-77页 |
| 一、EsAkt分子的基本特征及进化分析 | 第71-74页 |
| 二、EsAkt在中华绒螯蟹中的组织分布 | 第74-76页 |
| 三、菌刺激后血淋巴细胞中EsAKT mRNA表达水平的时序变化 | 第76-77页 |
| 第四章 讨论 | 第77-86页 |
| 第一节 Akt / GSK3信号通路在调节中华绒螯蟹的免疫应答中的作用 | 第77-83页 |
| 一、EsGSK3/EsAkt的结构分析与表达特征 | 第77-80页 |
| 二、Akt / GSK3信号通路对中华绒螯蟹细胞免疫的影响 | 第80-81页 |
| 三、Akt / GSK3信号通路对中华绒螯蟹体液免疫的影响 | 第81-83页 |
| 第二节 EsERK对于EsGSK3在中华绒螯蟹固有免疫系统中功能的发挥起着重要作用 | 第83-86页 |
| 一、EsERK的分子特征与组织分布 | 第84页 |
| 二、EsERK参与了中华绒螯蟹的免疫应答 | 第84-86页 |
| 第五章 结论 | 第86-87页 |
| 参考文献 | 第87-100页 |
| 附录 本论文所用引物序列 | 第100-101页 |
| 致谢 | 第101-102页 |
| 作者简历及攻读学位期间发表的学术论文与研究成果 | 第102页 |
