| 中文摘要 | 第8-11页 |
| ABSTRACT | 第11-14页 |
| 缩略语表 | 第15-16页 |
| 第一章 水稻籼粳杂种育性基因S5的分子作用机理 | 第16-111页 |
| 1 前言 | 第16-40页 |
| 1.1 研究问题的由来 | 第16-17页 |
| 1.2 水稻籼粳杂种不育的机理研究及相关基因克隆 | 第17-23页 |
| 1.2.1 水稻籼粳杂种不育的细胞学研究 | 第17-18页 |
| 1.2.2 水稻籼粳杂种不育的遗传机理研究及基因克隆 | 第18-19页 |
| 1.2.3 水稻广亲和基因及S5基因的研究进展 | 第19-23页 |
| 1.3 蛋白质相互作用的研究方法 | 第23-28页 |
| 1.4 蛋白质表达系统研究进展 | 第28-34页 |
| 1.4.1 大肠杆菌表达系统 | 第29-30页 |
| 1.4.2 毕赤酵母表达系统 | 第30-31页 |
| 1.4.3 杆状病毒/昆虫细胞表达系统 | 第31-32页 |
| 1.4.4 哺乳动物细胞表达系统 | 第32页 |
| 1.4.5 植物细胞表达系统 | 第32-33页 |
| 1.4.6 无细胞表达系统 | 第33-34页 |
| 1.5 内质网胁迫及其导致的细胞程序性死亡 | 第34-39页 |
| 1.6 本研究的目的和意义 | 第39-40页 |
| 2 材料和方法 | 第40-60页 |
| 2.1 材料 | 第40-42页 |
| 2.1.1 研究涉及基因及表述方式 | 第40页 |
| 2.1.2 水稻材料 | 第40页 |
| 2.1.3 载体及菌株 | 第40-41页 |
| 2.1.4 酶及各种化学试剂 | 第41-42页 |
| 2.2 实验方法 | 第42-60页 |
| 2.2.1 基因编码区的获得与扩增 | 第42-43页 |
| 2.2.2 基因、蛋白质的结构及功能预测分析 | 第43-44页 |
| 2.2.3 ORF3酵母互补实验 | 第44页 |
| 2.2.4 ORF4+跨膜结构域验证 | 第44-45页 |
| 2.2.5 ORF3和ORF4的原核表达 | 第45-46页 |
| 2.2.6 ORF5毕赤酵母表达及其检测 | 第46-49页 |
| 2.2.7 蛋白互作检测载体构建 | 第49-51页 |
| 2.2.8 ORF3,ORF4和ORF5蛋白互作检测 | 第51-54页 |
| 2.2.9 酵母双杂交文库筛选 | 第54-56页 |
| 2.2.10 芯片数据分析及相关功能基因的总结 | 第56-57页 |
| 2.2.11 差异表达基因qPCR检测及OsbZIP50-S的检测 | 第57-60页 |
| 3 结果与分析 | 第60-101页 |
| 3.1 ORF3,ORF4和ORF5基因及蛋白之间的差异 | 第60-65页 |
| 3.2 ORF3酵母互补实验 | 第65-66页 |
| 3.3 ORF4+跨膜结构域的验证 | 第66-67页 |
| 3.4 ORF3和ORF4的原核表达 | 第67-70页 |
| 3.4.1 ORF3蛋白的原核表达及初步纯化 | 第67-69页 |
| 3.4.2 ORF4蛋白的原核表达及毒性检测 | 第69-70页 |
| 3.5 ORF5的毕赤酵母表达及纯化 | 第70-75页 |
| 3.5.1 ORF5蛋白的毕赤酵母表达 | 第70-71页 |
| 3.5.2 ORF5蛋白的纯化及酶活性质初步研究 | 第71-75页 |
| 3.6 ORF3,ORF4和ORF5蛋白质互作检测 | 第75-81页 |
| 3.6.1 酵母双杂交检测ORF3,ORF4和ORF5之间的互作 | 第76-78页 |
| 3.6.2 细菌双杂交检测ORF3,ORF4和ORF5之间的互作 | 第78页 |
| 3.6.3 BiFC检测ORF3,ORF4和ORF5之间的互作 | 第78-81页 |
| 3.7 酵母双杂交文库的筛选 | 第81-85页 |
| 3.8 芯片数据分析,内质网胁迫及PCD相关基因总结 | 第85-91页 |
| 3.9 差异表达基因的qPCR检测 | 第91-95页 |
| 3.10 OsbZIP50-S的检测及ORF3+的功能 | 第95-99页 |
| 3.11 S5的分子作用机理 | 第99-101页 |
| 4 讨论 | 第101-111页 |
| 4.1 ORF3和ORF4蛋白的功能 | 第101-104页 |
| 4.2 ORF5蛋白的表达及功能 | 第104-105页 |
| 4.3 ORF3,ORF4和ORF5间的互作检测及互作蛋白筛选 | 第105-107页 |
| 4.4 S5分子作用机理的探讨 | 第107-110页 |
| 4.5 总结与展望 | 第110-111页 |
| 第二章 水稻小肽转运蛋白家族分析 | 第111-143页 |
| 1 前言 | 第111-114页 |
| 1.1 小肽转运蛋白家族成员的命名和特征 | 第111页 |
| 1.2 植物中小肽转运蛋白家族成员的功能 | 第111-113页 |
| 1.2.1 二肽/三肽转运蛋白 | 第111-112页 |
| 1.2.2 硝酸盐转运蛋白 | 第112-113页 |
| 1.2.3 其它底物转运蛋白 | 第113页 |
| 1.3 本研究的目的和意义 | 第113-114页 |
| 2 材料和方法 | 第114-117页 |
| 2.1 成员搜集和鉴定 | 第114页 |
| 2.2 染色体分布和基因复制 | 第114-115页 |
| 2.3 进化树分析和序列比对 | 第115页 |
| 2.4 水稻材料及处理 | 第115页 |
| 2.5 芯片表达数据分析 | 第115-117页 |
| 2.6 qPCR检测 | 第117页 |
| 2.7 Ka/Ks计算 | 第117页 |
| 3 结果与分析 | 第117-139页 |
| 3.1 水稻中小肽转运蛋白家族成员的搜集和鉴定 | 第117-118页 |
| 3.2 OsPTR的染色体分布和基因复制 | 第118-126页 |
| 3.3 OsPTR家族的进化分析和序列比对 | 第126-130页 |
| 3.4 OsPTR家族基因的表达谱 | 第130-133页 |
| 3.5 OsPTR基因在激素及光暗处理下的表达情况 | 第133-136页 |
| 3.6 Ka/Ks分析及旁系同源基因的表达多样性 | 第136-139页 |
| 4 讨论 | 第139-143页 |
| 4.1 基因复制对OsPTR家族的作用 | 第139页 |
| 4.2 OsPTR家族进化与功能多样性的关系 | 第139-141页 |
| 4.3 OsPTR基因表达的多样性及对激素和光暗处理的响应 | 第141-142页 |
| 4.4 总结与展望 | 第142-143页 |
| 参考文献 | 第143-159页 |
| 附录 | 第159-173页 |
| 附录Ⅰ: 部分实验操作步骤 | 第159-172页 |
| 附录Ⅱ: 作者简介 | 第172-173页 |
| 致谢 | 第173页 |
