| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-7页 |
| 目录 | 第7-10页 |
| 缩略词表 | 第10-11页 |
| 第1章 绪论 | 第11-30页 |
| ·APC 的研究进展 | 第11-16页 |
| ·ASEF 的结构和功能 | 第16-20页 |
| ·APC 与ASEF 的相互作用 | 第20-21页 |
| ·抑制型I-SMADS 中SMAD7 的结构与功能 | 第21-28页 |
| ·结构生物学及其研究目的 | 第28-29页 |
| ·本实验的研究目的与意义 | 第29-30页 |
| 第2章 材料与方法 | 第30-50页 |
| ·主要仪器 | 第30-31页 |
| ·材料 | 第31-32页 |
| ·菌株 | 第31页 |
| ·质粒 | 第31-32页 |
| ·主要的酶及试剂 | 第32页 |
| ·主要试剂的配制 | 第32-36页 |
| ·培养基和使用化学试剂的配制 | 第32-34页 |
| ·亲和层析、凝胶过滤的缓冲液 | 第34-35页 |
| ·抗生素及其使用浓度 | 第35-36页 |
| ·主要实验方法 | 第36-50页 |
| ·引物设计、合成、准备 | 第36页 |
| ·PCR 扩增目标片段 | 第36-38页 |
| ·PCR 产物的琼脂糖凝胶电泳 | 第38页 |
| ·凝胶回收 | 第38-40页 |
| ·限制性内切酶切割 | 第40页 |
| ·酶切产物的琼脂糖凝胶电泳及回收 | 第40页 |
| ·片段与载体的连接 | 第40页 |
| ·定点突变方法 | 第40-42页 |
| ·转化感受态细胞 | 第42-43页 |
| ·小规模质粒提取 | 第43-44页 |
| ·蛋白质表达测试及纯化 | 第44-45页 |
| ·蛋白质大规模表达纯化 | 第45-46页 |
| ·硒代蛋白菌体的培养 | 第46-47页 |
| ·蛋白质离子交换层析纯化 | 第47-48页 |
| ·蛋白质浓缩 | 第48页 |
| ·凝胶过滤纯化蛋白 | 第48-49页 |
| ·荧光实验 | 第49-50页 |
| 第3章 APC-PREARM-ARM/ASEF-ABR-SH3 的结构研究 | 第50-64页 |
| ·APC-PREARM-ARM、ASEF 的表达纯化 | 第50-52页 |
| ·APC-PREARM-ARM/ASEF-ABR-SH3 复合物的纯化 | 第52-54页 |
| ·APC（303-739）/ASEF（170-271）复合物的结晶、优化 | 第54-56页 |
| ·晶体的衍射和结构分析 | 第56-63页 |
| ·结果与讨论 | 第63-64页 |
| 第4章 APC-PREARM-ARM/ASEF 复合物结构的荧光分析 | 第64-71页 |
| ·APC-PREARM-ARM/ASEF-ABR-SH3 中重要氨基酸位点的确定 | 第64-65页 |
| ·突变蛋白的表达纯化 | 第65-68页 |
| ·荧光实验 | 第68-70页 |
| ·结果和讨论 | 第70-71页 |
| 第5章 APC 激活ASEF GEF 活性的机理 | 第71-76页 |
| ·APC 激活ASEF GEF 活性的机理 | 第71-75页 |
| ·结果和讨论 | 第75-76页 |
| 第6章 Smad7-NTD 的纯化与结晶 | 第76-85页 |
| ·SMAD7-NTD 的纯化与结晶 | 第76-80页 |
| ·Smad7-NTD 的蛋白纯化 | 第76-78页 |
| ·Smad7-NTD 的结晶 | 第78-80页 |
| ·SMAD7-NTD 与UBCH7 的相互作用 | 第80-83页 |
| ·结果与讨论 | 第83-85页 |
| 第7章 总结与展望 | 第85-87页 |
| ·总结 | 第85-86页 |
| ·展望 | 第86-87页 |
| 参考文献 | 第87-94页 |
| 致谢 | 第94-95页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第95-97页 |
