| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 第一章 绪论 | 第7-15页 |
| 1.1 白念珠菌简介 | 第7页 |
| 1.2 白念珠菌的耐药性 | 第7-9页 |
| 1.3 白念珠菌酵母态-菌丝态转换 | 第9-10页 |
| 1.4 TOR信号途径简介 | 第10-11页 |
| 1.5 白念珠菌钙离子稳态简介 | 第11页 |
| 1.6 Anoctamin/TMEM16超家族 | 第11-12页 |
| 1.6.1 Anoctamin/TMEM16超家族简介 | 第11-12页 |
| 1.6.2 DUF221家族成员AtCsc1简介 | 第12页 |
| 1.7 AtCsc1在白念珠菌中的同源蛋白 | 第12-14页 |
| 1.8 本课题的研究内容与意义 | 第14-15页 |
| 第二章 材料与方法 | 第15-27页 |
| 2.1 仪器与材料 | 第15-21页 |
| 2.1.1 主要仪器 | 第15页 |
| 2.1.2 主要试剂及试剂盒 | 第15-16页 |
| 2.1.3 主要溶液及其配制 | 第16-18页 |
| 2.1.4 培养基的配制 | 第18-19页 |
| 2.1.5 本文所用菌株 | 第19页 |
| 2.1.6 本文所用引物 | 第19-21页 |
| 2.1.7 本文所用质粒 | 第21页 |
| 2.2 方法 | 第21-27页 |
| 2.2.1 菌株保存与培养 | 第21页 |
| 2.2.2 白念珠菌细胞的转化 | 第21页 |
| 2.2.3 白念珠菌基因组的提取 | 第21-22页 |
| 2.2.4 大肠杆菌质粒提取 | 第22页 |
| 2.2.5 PCR反应体系 | 第22-23页 |
| 2.2.6 酶切反应体系 | 第23页 |
| 2.2.7 无缝克隆反应体系 | 第23页 |
| 2.2.8 大肠杆菌的转化 | 第23-24页 |
| 2.2.9 酿酒酵母细胞的转化 | 第24页 |
| 2.2.10 白念珠菌膜蛋白的提取 | 第24页 |
| 2.2.11 考马斯亮蓝测定蛋白质浓度 | 第24页 |
| 2.2.12 Western Blot分析 | 第24-25页 |
| 2.2.13 白念珠菌固体平板表型分析 | 第25页 |
| 2.2.14 荧光定位分析 | 第25-26页 |
| 2.2.15 菌丝发育分析 | 第26-27页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第27-48页 |
| 3.1 CaPhm7与其同源蛋白的氨基酸序列分析 | 第27-28页 |
| 3.2 CaPHM7基因和CaSPO75基因的敲除与鉴定 | 第28-32页 |
| 3.2.1 CaPHM7基因敲除的策略 | 第28-30页 |
| 3.2.2 CaPHM7基因缺失株的鉴定 | 第30-31页 |
| 3.2.3 CaSPO75基因的敲除与鉴定 | 第31-32页 |
| 3.3 CaPHM7基因缺失株和CaSPO75基因缺失株的固体平板表型 | 第32-36页 |
| 3.3.1 互补回复质粒pCR4-CaPHM7的构建 | 第32-34页 |
| 3.3.2 CaPHM7基因与CaURA3基因存在遗传互作 | 第34页 |
| 3.3.3 CaPHM7基因缺失株在药物压力下的固体平板表型 | 第34-36页 |
| 3.3.4 CaSPO75基因缺失株的固体平板表型 | 第36页 |
| 3.4 探究CaPHM7基因的缺失对白念珠菌菌丝发育的影响 | 第36-41页 |
| 3.4.1 血清诱导培养基YPD+10% FBS | 第37页 |
| 3.4.2 甘露醇为碳源的低氮培养基Spider | 第37-40页 |
| 3.4.3 合成培养基Lee’s | 第40-41页 |
| 3.5 探究白念珠菌CaPhm7的亚细胞定位 | 第41-46页 |
| 3.5.1 CaPhm7-GFP融合蛋白的构建与验证 | 第41-42页 |
| 3.5.2 CaPhm7-GFP融合蛋白功能的验证与Western Blot检测 | 第42-43页 |
| 3.5.3 CaPhm7-GFP与液泡膜共定位 | 第43-44页 |
| 3.5.4 探究药物处理条件下CaPhm7的亚细胞定位 | 第44-45页 |
| 3.5.5 探究菌丝发育过程中CaPhm7的亚细胞定位 | 第45-46页 |
| 3.6 CaPhm7不能互补酿酒酵母同源蛋白ScPhm7的功能 | 第46-48页 |
| 3.6.1 互补质粒pRS316-CaPHM7的构建 | 第46-47页 |
| 3.6.2 固体平板表型互补分析 | 第47-48页 |
| 主要结论与展望 | 第48-49页 |
| 主要结论 | 第48页 |
| 展望 | 第48-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-54页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第54页 |
