| 摘要 | 第3-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 第1章 引言 | 第14-18页 |
| 1.1 肝癌概述 | 第14-15页 |
| 1.2 WTX基因概述 | 第15-16页 |
| 1.3 Wnt信号通路概述 | 第16页 |
| 1.4 研究内容 | 第16-18页 |
| 第2章 WTX基因在肝癌组织及细胞系中的表达及与临床病理特征的关系 | 第18-36页 |
| 2.1 前言 | 第18页 |
| 2.2 材料方法 | 第18-28页 |
| 2.2.1 仪器试剂 | 第18-19页 |
| 2.2.2 标本收集 | 第19页 |
| 2.2.3 免疫组化染色 | 第19-20页 |
| 2.2.4 免疫组化染色评分 | 第20页 |
| 2.2.5 细胞培养 | 第20-21页 |
| 2.2.6 RNA表达检测 | 第21-24页 |
| 2.2.7 Western Blot检测蛋白水平 | 第24-27页 |
| 2.2.8 统计学分析 | 第27-28页 |
| 2.3 实验结果 | 第28-32页 |
| 2.3.1 肝细胞及各肝癌细胞WTX的mRNA及蛋白的表达情况 | 第28页 |
| 2.3.2 WTX蛋白肝癌组织中的表达情况 | 第28-30页 |
| 2.3.3 WTX基因的表达水平与肝癌的临床病例特征的关系 | 第30-31页 |
| 2.3.4 WTX表达与肝癌患者预后关系 | 第31-32页 |
| 2.4 讨论 | 第32-34页 |
| 2.5 小结 | 第34-36页 |
| 第3章 WTX对肝癌细胞的增殖以及侵袭转移的影响 | 第36-69页 |
| 3.1 前言 | 第36-37页 |
| 3.2 材料方法 | 第37-50页 |
| 3.2.1 细胞株、质粒、引物 | 第37页 |
| 3.2.2 主要试剂 | 第37-39页 |
| 3.2.3 主要仪器 | 第39页 |
| 3.2.4 细胞培养 | 第39-40页 |
| 3.2.5 RNA表达检测 | 第40-42页 |
| 3.2.6 Western Blot检测蛋白水平 | 第42-46页 |
| 3.2.7 质粒提取 | 第46-47页 |
| 3.2.8 脂质体法转染肝癌细胞 | 第47-48页 |
| 3.2.9 CCK8实验检测细胞增殖 | 第48页 |
| 3.2.10 克隆形成实验 | 第48页 |
| 3.2.11 Transwell实验 | 第48-49页 |
| 3.2.12 划痕实验 | 第49页 |
| 3.2.13 动物实验 | 第49页 |
| 3.2.14 统计学分析 | 第49-50页 |
| 3.3 实验结果 | 第50-65页 |
| 3.3.1 在肝癌细胞HepG2和SMMC-7721 中高表达WTX基因 | 第50-52页 |
| 3.3.2 肝癌细胞系中高表达WTX可以抑制肝癌细胞的增殖能力 | 第52-54页 |
| 3.3.3 高表达WTX能够显著抑制肝癌细胞的侵袭和迁移能力 | 第54-57页 |
| 3.3.4 高表达WTX能够显著抑制肝癌细胞的成瘤能力 | 第57-60页 |
| 3.3.5 在肝癌细胞MHCC97L中低表达WTX基因 | 第60-61页 |
| 3.3.6 抑制WTX能够增强肝癌细胞的增殖能力 | 第61-62页 |
| 3.3.7 抑制WTX能够增强肝癌细胞的侵袭转移能力 | 第62-65页 |
| 3.4 讨论 | 第65-68页 |
| 3.4.1 肿瘤的恶性生物学行为概述 | 第65-66页 |
| 3.4.2 WTX基因对肿瘤增殖侵袭转移能力的影响 | 第66-68页 |
| 3.5 小结 | 第68-69页 |
| 第4章 WTX调控Wnt/β-catenin信号通路的机制研究 | 第69-91页 |
| 4.1 前言 | 第69-70页 |
| 4.2 材料方法 | 第70-80页 |
| 4.2.1 生物信息学分析 | 第70-73页 |
| 4.2.2 主要试剂及主要材料同文章第三部分 | 第73页 |
| 4.2.3 RNA 表达检测 | 第73-75页 |
| 4.2.4 Western Blot 检测蛋白水平 | 第75-79页 |
| 4.2.5 脂质体法转染肝癌细胞 | 第79页 |
| 4.2.6 荧光素酶报告基因实验 | 第79-80页 |
| 4.3 实验结果 | 第80-87页 |
| 4.3.1 数据库肝癌组织与正常组织中WTX基因的表达差异 | 第80页 |
| 4.3.2 WTX相关基因通路分析 | 第80-83页 |
| 4.3.3 高表达WTX对肝癌组织中相关信号通路的影响 | 第83-85页 |
| 4.3.4 WTX对TCF家族的转录活性调控依赖于β-catenin | 第85-87页 |
| 4.4 讨论 | 第87-90页 |
| 4.4.1 生物信息学研究概述 | 第87页 |
| 4.4.2 WTX基因在肝癌中的生物信息分析 | 第87-89页 |
| 4.4.3 WTX基因与Wnt信号通路 | 第89-90页 |
| 4.5 小结 | 第90-91页 |
| 第5章 结论与展望 | 第91-93页 |
| 5.1 结论 | 第91-92页 |
| 5.2 进一步工作的方向 | 第92-93页 |
| 致谢 | 第93-94页 |
| 参考文献 | 第94-98页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第98-99页 |
| 综述 | 第99-117页 |
| 综述一 Wnt/β-catenin信号通路与肝细胞癌 | 第99-107页 |
| 综述二 WTX基因与肿瘤 | 第107-112页 |
| 参考文献 | 第112-117页 |
