中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第1章 绪论 | 第12-14页 |
第2章 综述 | 第14-20页 |
2.1 miRNA简介 | 第14-16页 |
2.1.1 miRNA的发现 | 第14-15页 |
2.1.2 miRNA的生物学特性 | 第15页 |
2.1.3 miRNA的生物合成及作用机制 | 第15-16页 |
2.2 miRNA在IPF中的表达调控 | 第16-18页 |
2.2.1 let-7d与IPF | 第16页 |
2.2.2 miR-21与IPF | 第16-17页 |
2.2.3 miR-200与IPF | 第17页 |
2.2.4 miR-155与IPF | 第17-18页 |
2.2.5 miR-29与IPF | 第18页 |
2.3 miRNA与IPF的治疗 | 第18-20页 |
第3章 资料和方法 | 第20-32页 |
3.1 实验材料 | 第20-22页 |
3.1.1 主要实验器材(见表 3.1) | 第20页 |
3.1.2 主要试剂(见表 3.2) | 第20-22页 |
3.1.3 细胞系 | 第22页 |
3.2 实验方案 | 第22-24页 |
3.2.1 研究LPS刺激对TGFβ1 诱导的EMT的影响 | 第22页 |
3.2.2 与TLR4激活相关的miRNAs表达谱 | 第22页 |
3.2.3 预测并明确TLR4上调miR-181b的转录因子 | 第22-23页 |
3.2.4 过表达miR-181b对上皮-间质转化(EMT)的影响 | 第23页 |
3.2.5 预测并明确miR-181b的作用靶点 | 第23-24页 |
3.3 实验方法 | 第24-32页 |
3.3.1 细胞培养及传代 | 第24-25页 |
3.3.2 荧光报告基因检测(luciferase assay) | 第25页 |
3.3.3 染色质免疫沉淀(Chromatin Immunoprecipitation,ChIP) 实验 | 第25-26页 |
3.3.4 miR-181b转染A549细胞 | 第26页 |
3.3.5 Trizol法提取总RNA及RNA完整性检测 | 第26-27页 |
3.3.6 qRT-PCR检测miRNA和mRNA表达 | 第27-28页 |
3.3.7 Western Blotting检测 | 第28-30页 |
3.3.8 细胞免疫荧光染色 | 第30-31页 |
3.3.9 统计学分析 | 第31-32页 |
第4章 结果 | 第32-39页 |
4.1 LPS刺激可以减轻TGFβ 1诱导的A549细胞的EMT | 第32-33页 |
4.2 LPS刺激激活TLR4后引起A549细胞内miRNAs变化 | 第33页 |
4.3 qRT-PCR验证TLR4激活后miR-181b表达上调 | 第33-34页 |
4.4 AP1为TLR4上调miR-181b的转录因子 | 第34-35页 |
4.5 过表达miR-181b可以减轻TGF-β 诱导的EMT | 第35-37页 |
4.6 TGFBR1是miR-181b的下游作用靶点 | 第37-39页 |
第5章 讨论 | 第39-43页 |
第6章 结论 | 第43-44页 |
参考文献 | 第44-50页 |
作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第50-51页 |
致谢 | 第51页 |