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TLR4/miR-181b信号轴对TGF-β介导的上皮—间质转化的调控作用及机制研究

中文摘要第4-6页
Abstract第6-7页
第1章 绪论第12-14页
第2章 综述第14-20页
    2.1 miRNA简介第14-16页
        2.1.1 miRNA的发现第14-15页
        2.1.2 miRNA的生物学特性第15页
        2.1.3 miRNA的生物合成及作用机制第15-16页
    2.2 miRNA在IPF中的表达调控第16-18页
        2.2.1 let-7d与IPF第16页
        2.2.2 miR-21与IPF第16-17页
        2.2.3 miR-200与IPF第17页
        2.2.4 miR-155与IPF第17-18页
        2.2.5 miR-29与IPF第18页
    2.3 miRNA与IPF的治疗第18-20页
第3章 资料和方法第20-32页
    3.1 实验材料第20-22页
        3.1.1 主要实验器材(见表 3.1)第20页
        3.1.2 主要试剂(见表 3.2)第20-22页
        3.1.3 细胞系第22页
    3.2 实验方案第22-24页
        3.2.1 研究LPS刺激对TGFβ1 诱导的EMT的影响第22页
        3.2.2 与TLR4激活相关的miRNAs表达谱第22页
        3.2.3 预测并明确TLR4上调miR-181b的转录因子第22-23页
        3.2.4 过表达miR-181b对上皮-间质转化(EMT)的影响第23页
        3.2.5 预测并明确miR-181b的作用靶点第23-24页
    3.3 实验方法第24-32页
        3.3.1 细胞培养及传代第24-25页
        3.3.2 荧光报告基因检测(luciferase assay)第25页
        3.3.3 染色质免疫沉淀(Chromatin Immunoprecipitation,ChIP) 实验第25-26页
        3.3.4 miR-181b转染A549细胞第26页
        3.3.5 Trizol法提取总RNA及RNA完整性检测第26-27页
        3.3.6 qRT-PCR检测miRNA和mRNA表达第27-28页
        3.3.7 Western Blotting检测第28-30页
        3.3.8 细胞免疫荧光染色第30-31页
        3.3.9 统计学分析第31-32页
第4章 结果第32-39页
    4.1 LPS刺激可以减轻TGFβ 1诱导的A549细胞的EMT第32-33页
    4.2 LPS刺激激活TLR4后引起A549细胞内miRNAs变化第33页
    4.3 qRT-PCR验证TLR4激活后miR-181b表达上调第33-34页
    4.4 AP1为TLR4上调miR-181b的转录因子第34-35页
    4.5 过表达miR-181b可以减轻TGF-β 诱导的EMT第35-37页
    4.6 TGFBR1是miR-181b的下游作用靶点第37-39页
第5章 讨论第39-43页
第6章 结论第43-44页
参考文献第44-50页
作者简介及在学期间所取得的科研成果第50-51页
致谢第51页

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