摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
前言 | 第11-12页 |
第一篇 文献综述 | 第12-26页 |
第一章 无乳链球菌致病性及致病机制的研究进展 | 第12-26页 |
1 无乳链球菌的分类地位及生物学特性 | 第12页 |
2 无乳链球菌致病性 | 第12-14页 |
·对水产动物的致病性 | 第12-13页 |
·对奶牛的致病性 | 第13页 |
·对人的致病性 | 第13-14页 |
3 无乳链球菌致病机理 | 第14页 |
4 无乳链球菌主要的毒力因子 | 第14-17页 |
·荚膜多糖 | 第14-15页 |
·β-溶血素 | 第15页 |
·CAMP因子 | 第15-16页 |
·C5a肽酶 | 第16页 |
·纤维蛋白原结合蛋白 | 第16页 |
·富色氨酸重复序列蛋白 | 第16-17页 |
·透明质酸酶 | 第17页 |
5 无乳链球菌与宿主细胞互作机制 | 第17-19页 |
·与巨噬细胞的互作 | 第17-18页 |
·与微脑血管内皮细胞的互作 | 第18-19页 |
参考文献 | 第19-26页 |
第二篇 试验研究 | 第26-72页 |
第二章 鱼源无乳链球菌透明质酸酶hylB基因的克隆表达及抗原性分析 | 第26-36页 |
摘要 | 第26-27页 |
1 材料与方法 | 第27-28页 |
·菌株、质粒和实验动物 | 第27页 |
·仪器和试剂 | 第27页 |
·方法 | 第27-28页 |
2 结果 | 第28-31页 |
·hylb基因序列分析及原核表达载体的构建 | 第28-29页 |
·HylB蛋白在大肠杆菌中表达纯化及鉴定 | 第29-30页 |
·重组的HylB蛋白免疫原性分析 | 第30-31页 |
3 讨论 | 第31-33页 |
参考文献 | 第33-34页 |
ABSTRACT | 第34-36页 |
第三章 鱼源无乳链球菌GD201008-001株的hylB及mp基因缺失株的构建 | 第36-50页 |
摘要 | 第36-37页 |
1 材料与方法 | 第37-43页 |
·菌株、质粒与引物 | 第37-40页 |
·仪器和试剂 | 第40-41页 |
·hylB和mp基因缺失载体的构建 | 第41页 |
·hylB和mp基因缺失株的构建 | 第41-42页 |
·基因互补株的构建 | 第42页 |
·缺失株和互补株的荧光定量PCR鉴定 | 第42页 |
·遗传稳定性分析 | 第42-43页 |
2 结果 | 第43-45页 |
·无乳链球菌hylB和mp基因缺失株与互补株的构建与鉴定 | 第43-44页 |
·荧光定量PCR分析hylB及mp基因的表达 | 第44-45页 |
·遗传稳定性分析 | 第45页 |
3 讨论 | 第45-47页 |
参考文献 | 第47-48页 |
ABSTRACT | 第48-50页 |
第四章 鱼源无乳链球菌GD201008-001株hylB和mp基因缺失株的特性分析 | 第50-72页 |
摘要 | 第50-51页 |
1 材料与方法 | 第51-56页 |
·菌株及引物 | 第51-52页 |
·细胞及实验动物 | 第52页 |
·试剂和仪器 | 第52-53页 |
·特性分析 | 第53-56页 |
2 结果 | 第56-66页 |
·生长曲线 | 第56-57页 |
·利用HA生长的能力 | 第57-58页 |
·对斑马鱼的LD50 | 第58页 |
·感染小鼠组织中的细菌载量 | 第58-59页 |
·巨噬细胞内的存活能力 | 第59-60页 |
·小鼠脾脏促炎性细胞因子的表达 | 第60-64页 |
·对Bend.3细胞的黏附能力 | 第64页 |
·对RAW264.7细胞及Bend.3细胞的毒性 | 第64-66页 |
3 讨论 | 第66-68页 |
参考文献 | 第68-70页 |
ABSTRACT | 第70-72页 |
全文总结 | 第72-74页 |
致谢 | 第74页 |