| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-7页 |
| 缩略词 | 第7-11页 |
| 第一章 前言 | 第11-33页 |
| ·白藜芦醇研究概述 | 第11-17页 |
| ·白藜芦醇的结构和理化性质 | 第11页 |
| ·白藜芦醇的发现 | 第11页 |
| ·白藜芦醇的生物活性及应用 | 第11-14页 |
| ·白藜芦醇的生物合成途径 | 第14-15页 |
| ·芪合酶的结构和功能 | 第15-16页 |
| ·芪合酶基因的转基因植物表达 | 第16-17页 |
| ·枣树研究概述 | 第17-20页 |
| ·枣树的组织培养和遗传转化 | 第18-19页 |
| ·枣果实主要病害 | 第19-20页 |
| ·基因融合研究概述 | 第20-30页 |
| ·基因融合的概念及特点 | 第20-21页 |
| ·融合蛋白发挥功能的关键——Linker | 第21-24页 |
| ·基因融合的常用技术 | 第24-26页 |
| ·Linker序列的设计 | 第26-27页 |
| ·基因融合的应用 | 第27-30页 |
| ·本研究的目的意义 | 第30-31页 |
| ·本研究主要内容 | 第31-33页 |
| 第二章 葡萄和虎杖芪合酶催化效率比较与分析 | 第33-55页 |
| ·材料与方法 | 第34-42页 |
| ·植物材料 | 第34页 |
| ·菌株、载体和试剂 | 第34页 |
| ·主要仪器 | 第34-35页 |
| ·葡萄基因组DNA的提取 | 第35页 |
| ·VvSTS基因的分离 | 第35-37页 |
| ·PCR产物的回收 | 第37页 |
| ·目的片段与克隆载体的连接 | 第37页 |
| ·大肠杆菌感受态的制备、转化、及筛选 | 第37-38页 |
| ·大肠杆菌质粒的提取 | 第38页 |
| ·目的片段与表达载体的连接 | 第38页 |
| ·重组质粒的双酶切 | 第38-39页 |
| ·蛋白表达与纯化 | 第39-41页 |
| ·蛋白脱盐与浓缩 | 第41页 |
| ·酶催化活性及动力学分析 | 第41-42页 |
| ·结果与分析 | 第42-53页 |
| ·葡萄芪合酶基因VvSTS的克隆 | 第42-43页 |
| ·基因序列分析 | 第43-45页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第45-46页 |
| ·芪合酶基因在大肠杆菌中的表达 | 第46-49页 |
| ·芪合酶功能鉴定及酶学性质分析 | 第49-53页 |
| ·讨论 | 第53-55页 |
| 第三章 4CL-STS基因融合、表达、催化活性鉴定与分析 | 第55-77页 |
| ·材料与方法 | 第56-59页 |
| ·材料 | 第56页 |
| ·模板与引物 | 第56-58页 |
| ·融合基因的克隆与原核表达载体的构建 | 第58页 |
| ·融合基因的表达与纯化 | 第58页 |
| ·体外酶促反应与产物检测 | 第58页 |
| ·酶动力学分析 | 第58页 |
| ·融合蛋白同源模型的构建 | 第58-59页 |
| ·结果与分析 | 第59-74页 |
| ·不同Linker融合基因的克隆 | 第59-61页 |
| ·融合基因原核表达载体的构建 | 第61-63页 |
| ·融合基因在大肠杆菌中的表达与纯化 | 第63-66页 |
| ·融合酶功能鉴定与酶学性质分析 | 第66-72页 |
| ·融合酶同源模型分析 | 第72-74页 |
| ·讨论 | 第74-77页 |
| 第四章 4CL-STS融合基因在枣树中的过表达 | 第77-95页 |
| ·材料与方法 | 第77-84页 |
| ·植物材料 | 第77-78页 |
| ·菌株、载体与试剂 | 第78页 |
| ·模板与引物 | 第78页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第78-79页 |
| ·农杆菌介导的转化壶瓶枣 | 第79-80页 |
| ·转基因壶瓶枣的PCR检测 | 第80-81页 |
| ·转基因壶瓶枣的PCR-Southern blot检测 | 第81-82页 |
| ·转基因壶瓶枣的Northern blot检测 | 第82-83页 |
| ·转基因植株中白藜芦醇含量的测定 | 第83-84页 |
| ·转基因植株抑菌活性检测 | 第84页 |
| ·结果与分析 | 第84-92页 |
| ·连植物表达载体的融合基因克隆 | 第84-85页 |
| ·植物表达载体的构建和根癌农杆菌的转化 | 第85-87页 |
| ·壶瓶枣遗传转化体系条件筛选 | 第87-88页 |
| ·转基因植株的获得 | 第88-89页 |
| ·转基因植株的检测 | 第89-90页 |
| ·转基因壶瓶枣白藜芦醇含量的测定 | 第90-92页 |
| ·转基因植株提取液的抑菌活性 | 第92页 |
| ·讨论 | 第92-95页 |
| 第五章 结论与展望 | 第95-97页 |
| ·主要结论 | 第95页 |
| ·创新点 | 第95页 |
| ·展望 | 第95-97页 |
| 参考文献 | 第97-107页 |
| 个人简介 | 第107-109页 |
| 导师简介 | 第109-111页 |
| 获得成果目录 | 第111-113页 |
| 致谢 | 第113页 |