| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 第1章 文献综述 | 第10-18页 |
| ·次生壁 | 第10页 |
| ·木质素 | 第10-13页 |
| ·木质素的组成 | 第10-11页 |
| ·木质素单体的生物合成 | 第11-12页 |
| ·木质素多聚物的合成 | 第12-13页 |
| ·木质素的应用 | 第13页 |
| ·MYB转录因子 | 第13-16页 |
| ·MYB转录因子的结构 | 第13-14页 |
| ·MYB基因家族分类 | 第14-15页 |
| ·MYB转录因子在木质素合成中的作用 | 第15-16页 |
| ·杨树的生物学特征及研究进展 | 第16-18页 |
| 第2章 引言 | 第18-22页 |
| ·研究内容 | 第18-19页 |
| ·转录因子功能预测及启动子功能预测 | 第18页 |
| ·PtoMYB175基因的扩增 | 第18-19页 |
| ·PtoMYB175基因在不同组织中的表达特异性分析 | 第19页 |
| ·PtoMYB175转录因子的亚细胞定位分析 | 第19页 |
| ·PtoMYB175转录因子的转录活性分析 | 第19页 |
| ·转基因毛白杨的功能分析 | 第19页 |
| ·研究目标 | 第19-20页 |
| ·技术路线 | 第20-22页 |
| 第3章 实验材料与方法 | 第22-40页 |
| ·实验选取材料 | 第22页 |
| ·实验所用植物材料 | 第22页 |
| ·质粒及菌种 | 第22页 |
| ·仪器和设备 | 第22-23页 |
| ·实验试剂 | 第23-25页 |
| ·试剂及试剂盒 | 第23-24页 |
| ·常用抗生素、激素及培养基的配制 | 第24-25页 |
| ·实验方法 | 第25-40页 |
| ·氨基酸序列比对 | 第25页 |
| ·进化树分析 | 第25页 |
| ·毛白杨不同组织RNA的提取及反转录 | 第25-26页 |
| ·基因的组织特异性分析 | 第26-27页 |
| ·基因的引物设计 | 第27页 |
| ·PtoMYB175的PCR扩增及载体构建 | 第27-28页 |
| ·CaCl_2法制备大肠杆菌DH5α 感受态细胞 | 第28页 |
| ·连接反应物及重组质粒转化大肠杆菌感受态细胞 | 第28页 |
| ·阳性单克隆的扩大培养与质粒提取 | 第28-29页 |
| ·植物表达载体的农杆菌转化 | 第29-30页 |
| ·毛白杨的遗传转化 | 第30页 |
| ·酵母表达载体的构建、感受态细胞的制备 | 第30-32页 |
| ·基因的亚细胞定位 | 第32-34页 |
| ·PtoMYB175超表达植株的分子检测 | 第34页 |
| ·转基因毛白杨的荧光定量PCR检测 | 第34页 |
| ·转基因植株中木质素含量的测定 | 第34-35页 |
| ·木聚糖及纤维素含量的测定 | 第35-36页 |
| ·石蜡切片 | 第36页 |
| ·瞬时共侵染 | 第36页 |
| ·间苯三酚染色 | 第36-37页 |
| ·木质素自发荧光检测 | 第37页 |
| ·甲苯胺蓝染色 | 第37页 |
| ·扫描电镜观察 | 第37页 |
| ·木质素含量的测定 | 第37页 |
| ·GUS组织化学染色 | 第37页 |
| ·GUS酶活性的定量分析 | 第37-40页 |
| 第4章 结果与分析 | 第40-56页 |
| ·PtoMYB175与其它物种MYB转录因子的进化树分析 | 第40-41页 |
| ·PtoMYB175与同源基因的氨基酸序列比对 | 第41-42页 |
| ·PtoMYB175基因的组织特异性分析 | 第42-43页 |
| ·PtoMYB175亚细胞定位载体的克隆、构建及分析 | 第43-44页 |
| ·PtoMYB175的转录激活活性分析 | 第44页 |
| ·PtoMYB175的转录抑制活性分析 | 第44-45页 |
| ·PtoMYB175基因的克隆及载体构建 | 第45页 |
| ·PtoMYB175转基因超表达植株的获得 | 第45-47页 |
| ·毛白杨的遗传转化 | 第45-46页 |
| ·PtoMYB175转基因阳性植株的筛选 | 第46-47页 |
| ·PtoMYB175超表达植株的鉴定及表型分析 | 第47-49页 |
| ·PtoMYB175超表达植株茎的形态解剖学观察 | 第49-50页 |
| ·PtoMYB175超表达植株次生壁组分的测定 | 第50-51页 |
| ·PtoMYB175超表达植株叶脉中木质素沉积的观察 | 第51-52页 |
| ·PtoMYB175对次生壁代谢途径功能基因表达量的影响 | 第52-54页 |
| ·PtoMYB175对次生壁代谢途径功能基因启动子活性的抑制 | 第54-56页 |
| 第5章 讨论 | 第56-58页 |
| 参考文献 | 第58-64页 |
| 附录 | 第64-66页 |
| 致谢 | 第66-68页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第68页 |
