牛肝谷氨酸脱氢酶的分离纯化及酶学性质和功能基团研究
| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-13页 |
| 第1章 文献综述 | 第13-25页 |
| ·谷氨酸脱氢酶概述 | 第13页 |
| ·谷氨酸脱氢酶分布 | 第13-15页 |
| ·植物中的谷氨酸脱氢酶 | 第13-14页 |
| ·动物中的谷氨酸脱氢酶 | 第14页 |
| ·微生物中的谷氨酸脱氢酶 | 第14-15页 |
| ·谷氨酸脱氢酶的分子结构、进化历程及催化机制 | 第15-18页 |
| ·谷氨酸脱氢酶的分子结构 | 第15-16页 |
| ·谷氨酸脱氢酶的进化历程 | 第16-17页 |
| ·谷氨酸脱氢酶的催化反应机制 | 第17-18页 |
| ·谷氨酸脱氢酶的分离纯化 | 第18-20页 |
| ·酶分离纯化的常规方法 | 第18-19页 |
| ·不同来源的谷氨酸脱氢酶的分离纯化 | 第19-20页 |
| ·谷氨酸脱氢酶的理化性质 | 第20-21页 |
| ·谷氨酸脱氢酶基因工程的研究 | 第21-22页 |
| ·谷氨酸脱氢酶的应用 | 第22页 |
| ·系统进化树的构建 | 第22-25页 |
| ·进化树的概念 | 第22-23页 |
| ·进化树的研究意义 | 第23页 |
| ·进化树的构建方法 | 第23-25页 |
| 第2章 引言 | 第25-27页 |
| ·立题背景与意义 | 第25页 |
| ·研究的主要内容 | 第25-26页 |
| ·牛GLUD1生物信息学分析 | 第25页 |
| ·牛肝谷氨酸脱氢酶的分离纯化 | 第25-26页 |
| ·牛肝谷氨酸脱氢酶的酶学性质与动力学研究 | 第26页 |
| ·金属离子、化合物与有机溶剂对牛肝GDH的影响 | 第26页 |
| ·牛肝GDH功能基团的研究 | 第26页 |
| ·牛肝GDH分离纯化技术路线 | 第26-27页 |
| 第3章 牛谷氨酸脱氢酶生物信息学分析 | 第27-33页 |
| ·数据来源与方法 | 第27-28页 |
| ·牛GLUD1基因结构分析数据来源 | 第27页 |
| ·牛GLUD1序列同源性多重比对分析 | 第27页 |
| ·不同物种GLUD1系统进化分析 | 第27-28页 |
| ·结果分析 | 第28-33页 |
| ·牛GLUD1基因结构分析 | 第28-29页 |
| ·牛肝GLUD1氨基酸同源性分析 | 第29-31页 |
| ·不同物种GLUD1基因系统进化分析 | 第31-33页 |
| 第4章 牛肝谷氨酸脱氢酶的分离纯化与酶学性质研究 | 第33-51页 |
| ·材料与试剂 | 第33-35页 |
| ·实验材料 | 第33页 |
| ·主要试剂 | 第33页 |
| ·主要仪器 | 第33-34页 |
| ·主要试剂配制 | 第34-35页 |
| ·实验方法 | 第35-40页 |
| ·酶活性测定 | 第35-36页 |
| ·蛋白质含量测定 | 第36-37页 |
| ·粗酶液提取 | 第37页 |
| ·硫酸铵分级沉淀 | 第37页 |
| ·DEAE-Sepharose离子交换层析 | 第37页 |
| ·Superdex-200凝胶过滤层析 | 第37-38页 |
| ·纯度鉴定 | 第38页 |
| ·牛肝GDH亚基分子质量 | 第38-39页 |
| ·牛肝GDH全酶分子质量 | 第39页 |
| ·最适温度和热稳定性 | 第39页 |
| ·最适pH值和pH稳定性 | 第39-40页 |
| ·米氏常数（Km）的测定 | 第40页 |
| ·不同金属离子对GDH活性的影响 | 第40页 |
| ·不同化合物对GDH活性的影响 | 第40页 |
| ·不同有机溶剂对GDH活性的影响 | 第40页 |
| ·结果与讨论 | 第40-51页 |
| ·DEAE-Sepharose离子交换层析 | 第40-41页 |
| ·Superdex-200凝胶过滤层析 | 第41-42页 |
| ·牛肝GDH纯度鉴定 | 第42-43页 |
| ·牛肝GDH亚基分子质量测定 | 第43-44页 |
| ·牛肝GDH全酶分子质量测定 | 第44-45页 |
| ·适反应温度与热稳定性 | 第45-46页 |
| ·pH值和pH值稳定性 | 第46-47页 |
| ·米氏常数的测定 | 第47-48页 |
| ·不同金属离子对GDH活性的影响 | 第48-49页 |
| ·不同化合物对GDH活性的影响 | 第49-51页 |
| 第5章 牛肝谷氨酸脱氢酶功能基团的研究 | 第51-59页 |
| ·材料与试剂 | 第51-52页 |
| ·实验材料 | 第51页 |
| ·主要试剂 | 第51页 |
| ·主要仪器 | 第51-52页 |
| ·主要试剂配制 | 第52页 |
| ·实验方法 | 第52-53页 |
| ·结果与讨论 | 第53-59页 |
| ·氯胺-T对甲硫氨酸残基的化学修饰 | 第53页 |
| ·pCMB对半胱氨酸巯基的化学修饰 | 第53-54页 |
| ·SUAN对赖氨酸残基的化学修饰 | 第54页 |
| ·PMSF对丝氨酸残基的化学修饰 | 第54-55页 |
| ·NBS对色氨酸残基的化学修饰 | 第55-56页 |
| ·DTT对二硫键的化学修饰 | 第56页 |
| ·BD对精氨酸残基的化学修饰 | 第56-57页 |
| ·IAc和BrAc组氨酸残基的化学修饰 | 第57-58页 |
| ·NAI对酪氨酸酚羟基的化学修饰 | 第58-59页 |
| 第6章 结论与展望 | 第59-61页 |
| ·主要结论 | 第59-60页 |
| ·牛谷氨酸脱氢酶生物信息学分析 | 第59页 |
| ·牛肝谷氨酸脱氢酶的分离纯化 | 第59页 |
| ·牛肝谷氨酸脱氢酶的性质研究 | 第59页 |
| ·牛肝谷氨酸脱氢酶的功能基团研究 | 第59-60页 |
| ·展望与建议 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-69页 |
| 致谢 | 第69-71页 |
| 在校期间发表的论文 | 第71页 |
