| 符号说明 | 第1-10页 |
| 摘要 | 第10-12页 |
| ABSTRACT | 第12-15页 |
| 1 前言 | 第15-31页 |
| ·植物与病原物互作理论基础 | 第15-18页 |
| ·基因对基因假说 | 第15页 |
| ·警卫假说 | 第15-16页 |
| ·“诱饵”假说 | 第16-17页 |
| ·Zigzag理论 | 第17-18页 |
| ·马铃薯产业及其面临的危害 | 第18-20页 |
| ·中国马铃薯生产情况和主粮化战略 | 第19页 |
| ·马铃薯产业面临的主要病害 | 第19-20页 |
| ·马铃薯晚疫病害 | 第20-21页 |
| ·马铃薯晚疫病的病原形态 | 第20页 |
| ·马铃薯晚疫病的病害症状 | 第20页 |
| ·马铃薯晚疫病的侵染循环 | 第20页 |
| ·马铃薯晚疫病的病害流行和危害 | 第20-21页 |
| ·致病疫霉病原的研究进展 | 第21-22页 |
| ·A1交配型的研究 | 第21页 |
| ·A2交配型的研究 | 第21-22页 |
| ·马铃薯晚疫效应分子的研究进展 | 第22-26页 |
| ·马铃薯晚疫病菌胞外效应分子激活免疫 | 第22-24页 |
| ·马铃薯晚疫病菌Rx LR类胞质效应分子 | 第24页 |
| ·已知马铃薯晚疫无毒基因与其识别的抗性基因的研究进展 | 第24-26页 |
| ·非寄主抗性 | 第26-30页 |
| ·植物非寄主抗性的遗传研究 | 第26-27页 |
| ·植物非寄主抗性机理 | 第27-29页 |
| ·预存型防御机制 | 第27-28页 |
| ·诱导型防御体制 | 第28页 |
| ·植物非寄主抗性产生的信号路径 | 第28-29页 |
| ·参与非寄主抗性的蛋白和转录因子 | 第29页 |
| ·卵菌的非寄主抗性研究进展 | 第29-30页 |
| ·马铃薯晚疫病菌非寄主植物 | 第30页 |
| ·龙葵果实营养及医药应用 | 第30页 |
| ·龙葵对马铃薯晚疫病菌的非寄主抗性 | 第30页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第30-31页 |
| 2 材料方法 | 第31-40页 |
| ·实验材料、工程菌株及马铃薯晚疫菌株 | 第31页 |
| ·实验方法 | 第31-40页 |
| ·核酸的提取与纯化 | 第31-33页 |
| ·总RNA的提取 | 第31-32页 |
| ·反转录PCR | 第32页 |
| ·定量RT | 第32页 |
| ·DNA的提取 | 第32-33页 |
| ·基因的克隆和载体构建 | 第33-37页 |
| ·Gateway载体构建的原理和步骤 | 第33页 |
| ·P.infestans效应分子的基因克隆及瞬时表达载体构建 | 第33-37页 |
| ·目的片段扩增 | 第34页 |
| ·菌落 PCR 检测 | 第34-35页 |
| ·质粒 PCR 检测 | 第35页 |
| ·胶回收 | 第35页 |
| ·酶切与连接 | 第35-36页 |
| ·热激 | 第36页 |
| ·提取重组载体的大肠杆菌和农杆菌的质粒 | 第36页 |
| ·电击转化 | 第36-37页 |
| ·在本氏烟和龙葵上瞬时表达 | 第37页 |
| ·利用农杆菌PVX病毒表达系统分析Pi14684功能的方法 | 第37页 |
| ·效应分子的多态性分析和功能结构域分析 | 第37页 |
| ·P.infestans孢子悬浮液的制备 | 第37-38页 |
| ·P.infestans孢子悬浮液活体接种供试植物 | 第38页 |
| ·台盼蓝染色 | 第38页 |
| ·酵母双杂交的方法 | 第38-39页 |
| ·载体的构建 | 第38页 |
| ·文库的筛选 | 第38-39页 |
| ·原生质体转化的步骤 | 第39-40页 |
| 3 结果与分析 | 第40-68页 |
| ·马铃薯晚疫菌株HLJ1的RxLR基因池的构建 | 第40-46页 |
| ·Rx LR在马铃薯晚疫菌株HLJ1基因组中的多态性分析 | 第40-41页 |
| ·HLJ1菌株中部分RxLR效应分子的氨基酸特征 | 第41-44页 |
| ·缺失的部分Rx LR在其它菌株中的氨基酸多态性分析 | 第44-45页 |
| ·Rx LR基因池中目前已知的11个RxLR的氨基酸多态性 | 第45-46页 |
| ·Pi14684功能解析 | 第46-49页 |
| ·12个Rx LR效应分子在本氏烟上的自激活验证 | 第46页 |
| ·Pi14684可以抑制INF1产生的HR | 第46-47页 |
| ·10个不同菌株的Pi14684等位基因氨基酸特征 | 第47页 |
| ·Pi14684不能抑制激发子SFI2，也不影响Avr3a和R3a的互作 | 第47-49页 |
| ·利用瞬时表达系统在龙葵上筛选抗性无毒基因 | 第49-51页 |
| ·龙葵对于马铃薯晚疫病菌的非寄主抗性 | 第49页 |
| ·马铃薯Desiree接种HLJ1菌株孢子悬浮液染色结果分析 | 第49-50页 |
| ·利用瞬时表达系统筛选龙葵的无毒基因 | 第50-51页 |
| ·效应因子Pi15718功能分析 | 第51-59页 |
| ·效应因子Pi15718可以在龙葵上激发HR反应 | 第51-52页 |
| ·无毒基因Pi15718在晚疫病菌侵染初期的表达量分析 | 第52页 |
| ·Pi15718在10个晚疫菌株中的多态性分析及功能验证 | 第52-53页 |
| ·Pi15718HLJ1触发龙葵产生HR具有广谱性 | 第53-54页 |
| ·Pi15718 的 C-端具有激活HR 的功能 | 第54-55页 |
| ·Pi1571的 N-端具有抑制HR 的功能 | 第55-56页 |
| ·Pi1571N-端不能与C-端直接互作 | 第56页 |
| ·Pi1571N-端抑制功能的关键位点是端抑制功能的关键位点是 | 第56-57页 |
| ·Pi15718-端完整性影响其在龙葵上触发端完整性影响其在龙葵上触发 HR 的功能 | 第57页 |
| ·酵母双杂交筛选文库 | 第57-59页 |
| ·诱饵蛋白载体构建 | 第58页 |
| ·诱饵蛋白的毒性和自激活 | 第58页 |
| ·筛选与 p GBK-Pi15718Pi15718互作的阳性克隆 | 第58-59页 |
| ·Pi15556功能分析 | 第59-65页 |
| ·Pi15556在晚疫病菌侵染初期表达量分析 | 第59页 |
| ·Pi15556在10个晚疫菌株中多态性分析及功能验证 | 第59-60页 |
| ·Pi15556的C-端具有激发激发龙葵产生HR的功能 | 第60-61页 |
| ·Pi15556和Pi15556的CC-端在龙葵中产生HR结果具有一致性 | 第61页 |
| ·Pi15556沉默突变体 | 第61-65页 |
| ·Pi15556基因沉默突变体的鉴定 | 第62-63页 |
| ·Pi15556的沉默转化子的表型分析 | 第63-65页 |
| ·Pi21190功能解析 | 第65-68页 |
| ·Pi21190在晚疫菌株侵染初期的表达量 | 第65页 |
| ·Pi21190和Pi21190的C-端在龙葵中产生端在龙葵中产生HR结果具有一致性 | 第65-66页 |
| ·不同龙葵品种中Pi21190瞬时表达结果 | 第66-67页 |
| ·Pi21190在15个晚疫菌株中多态性分析及其功能验证 | 第67-68页 |
| 4 讨论与结论 | 第68-72页 |
| 参考文献 | 第72-81页 |
| 致谢 | 第81-82页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第82-83页 |
| 附录Ⅰ | 第83-85页 |
| 附录Ⅱ | 第85-87页 |
| 附录Ⅲ | 第87-89页 |
| 附录Ⅳ | 第89-108页 |
