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Hsa-miR-200a调控红细胞分化的功能及分子机制研究

致谢第1-7页
摘要第7-9页
ABSTRACT第9-11页
专业词汇中英文对照第11-16页
第一章 绪论第16-36页
   ·红细胞分化和发育的概述第17-26页
     ·红细胞分化发育基本过程第17-19页
     ·红细胞分化调控的研究第19-25页
     ·红细胞分化和发育异常引起的疾病及治疗第25-26页
   ·microRNA调控红细胞分化的研究进展第26-29页
     ·正调控红细胞分化的microRNA第27-28页
     ·负调控红细胞分化的microRNA第28页
     ·microRNA调控红细胞分化的主要研究方法第28-29页
   ·Hsa-miR-200a的研究进展第29-31页
     ·miR-200a在癌症中的功能研究第30-31页
     ·miR-200a在细胞分化中的功能研究第31页
   ·PDCD4的研究进展第31-32页
     ·PDCD4在肿瘤中的功能研究第31页
     ·PDCD4在细胞分化中的功能研究第31-32页
   ·THRB的研究进展第32-36页
     ·TRβ作为核内转录因子第32页
     ·TRβ的生理功能第32-36页
第二章 材料和方法第36-56页
   ·实验试剂和仪器第36-38页
     ·实验试剂和耗材第36-37页
     ·试剂盒第37页
     ·常用溶液和培养基第37-38页
     ·实验仪器第38页
   ·质粒第38-43页
     ·用于基因过表达的质粒第38-39页
     ·用于基因敲低的质粒第39-40页
     ·用于双荧光素酶报告检测的质粒第40页
     ·质粒的构建第40-42页
     ·突变型pGL3-CMV-luc-3'UTR质粒的获得第42-43页
   ·细胞第43-48页
     ·细胞来源第43-44页
     ·细胞复苏、培养及冻存第44-45页
     ·细胞红系分化诱导第45-46页
     ·细胞转染第46-47页
     ·稳定细胞系构建第47-48页
   ·基因表达的检测第48-52页
     ·miRNA荧光实时定量PCR第48-50页
     ·mRNA荧光实时定量PCR第50-51页
     ·免疫印迹技术(western blot)第51-52页
     ·流式细胞仪分析细胞表面CD235a和CD71表达第52页
   ·细胞血红蛋白浓度检测第52-53页
   ·miRNA靶基因鉴定第53-54页
     ·双荧光素酶报告实验第53页
     ·RNA诱导沉默复合体-免疫共沉淀技术(RISC-IP)第53-54页
   ·高通量测序第54-55页
     ·转录组测序第54页
     ·miRNA组测序第54-55页
     ·数据分析第55页
   ·统计学分析第55-56页
第三章 结果与讨论第56-82页
   ·筛选调控红细胞分化的miRNA第56-61页
     ·从HESC到PBER的miRNA数据中筛选候选miRNA第56-57页
     ·候选miRNA在其它红细胞分化研究模型中的表达谱第57-61页
   ·miR-200a调控红细胞分化第61-66页
     ·K562中过表达miR-200a抑制珠蛋白基因表达第61-62页
     ·TF-1中过表达miR-200a抑制珠蛋白及红系重要基因的表达第62-63页
     ·miR-200a抑制诱导的TF-1红系分化第63-66页
   ·miR-200a调控TF-1细胞的转录组学研究第66-71页
     ·转录组分析概况第66-67页
     ·转录组功能分析进一步证实miR-200a对红系分化的影响第67-71页
   ·miR-200a的靶基因筛选第71-72页
   ·PDCD4是miR-200a的一个靶基因第72-75页
     ·miR-200a抑制PDCD4表达第72-73页
     ·miR-200a能够结合在PDCD4的3'-UTR上第73-75页
   ·THRB是miR-200a的一个靶基因第75-76页
   ·miR-200a靶基因的功能研究第76-82页
     ·PDCD4的功能研究第76-78页
     ·THRB的功能研究第78-82页
第四章 结论第82-84页
参考文献第84-100页
附录第100-120页
作者简介及在学期间发表的学术论文与研究成果第120-121页

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