摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-12页 |
1 前言 | 第12-18页 |
·Maf蛋白家族简介 | 第12-14页 |
·小Maf蛋白研究进展 | 第14-17页 |
·小maf表达模式研究进展 | 第14页 |
·与小Maf有关的血红素 | 第14-16页 |
·小Maf在其它方面研究进展 | 第16-17页 |
·本研究目的及意义 | 第17-18页 |
2 材料与方法 | 第18-39页 |
·实验材料 | 第18-25页 |
·实验材料的来源和饲养 | 第18页 |
·工具酶 | 第18页 |
·载体 | 第18-19页 |
·试剂盒 | 第19页 |
·主要生化试剂 | 第19页 |
·细胞培养基及转染试剂 | 第19页 |
·菌株 | 第19页 |
·主要仪器及设备 | 第19-20页 |
·引物序列 | 第20-22页 |
·主要实验试剂的配制 | 第22-25页 |
·实验方法 | 第25-39页 |
·实验材料的处理和收集 | 第25-26页 |
·Trizol法提取斑马鱼总RNA | 第26页 |
·总RNA反转录成单链cDNA | 第26页 |
·小maf基因的开放阅读框PCR扩增 | 第26-28页 |
·小maf基因探针序列PCR扩增 | 第28-29页 |
·斑马鱼基因组DNA的提取 | 第29页 |
·胰外分泌酶原基因上游调控区的PCR扩增 | 第29-30页 |
·PCR产物切胶回收 | 第30-31页 |
·感受态细胞DH5α的制备 | 第31页 |
·目的片段与载体的连接 | 第31页 |
·连接产物转化到DH5α感受态细胞中及蓝白斑筛选阳性克隆 | 第31-32页 |
·序列分析 | 第32页 |
·斑马鱼胚胎整体原位杂交技术 | 第32-35页 |
·半定量研究四个小maf基因时空表达 | 第35页 |
·体外实验研究转录因子之间的相互作用 | 第35-37页 |
·细胞转染 | 第37-38页 |
·双荧光素酶试剂盒对实验结果进行的测定 | 第38-39页 |
3 实验结果分析 | 第39-63页 |
·四个小maf序列分析 | 第39-48页 |
·四个小maf基因开放阅读框全长的克隆 | 第39-43页 |
·四个小Maf同源性分析 | 第43-44页 |
·四个小Maf系统进化分析 | 第44-45页 |
·四个小maf同线性关系分析 | 第45-48页 |
·四个小maf时空表达分析 | 第48-53页 |
·四个小maf表达模式研究 | 第48-49页 |
·四个小maf时空表达研究 | 第49-53页 |
·小Maf对胰外分泌酶原基因的调节作用 | 第53-63页 |
·超表达载体的构建 | 第54页 |
·荧光素酶载体的构建 | 第54-56页 |
·离体研究Bach/Nrf路径在调控胰外分泌酶原表达中作用 | 第56-63页 |
4. 讨论 | 第63-67页 |
·四个小maf cDNA序列多态性及分子进化分析 | 第63-64页 |
·四个小maf时空表达分析 | 第64-65页 |
·小Maf对胰外分泌酶原基因的调节作用 | 第65-66页 |
·展望 | 第66-67页 |
参考文献 | 第67-73页 |
研究生期间学术论文已发表及待发表情况 | 第73-74页 |
致谢 | 第74-75页 |
附录 | 第75-76页 |