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斑马鱼小maf的时空表达分析及其在血红素调控胰外分泌酶原基因表达中的作用研究

摘要第1-8页
Abstract第8-12页
1 前言第12-18页
   ·Maf蛋白家族简介第12-14页
   ·小Maf蛋白研究进展第14-17页
     ·小maf表达模式研究进展第14页
     ·与小Maf有关的血红素第14-16页
     ·小Maf在其它方面研究进展第16-17页
   ·本研究目的及意义第17-18页
2 材料与方法第18-39页
   ·实验材料第18-25页
     ·实验材料的来源和饲养第18页
     ·工具酶第18页
     ·载体第18-19页
     ·试剂盒第19页
     ·主要生化试剂第19页
     ·细胞培养基及转染试剂第19页
     ·菌株第19页
     ·主要仪器及设备第19-20页
     ·引物序列第20-22页
     ·主要实验试剂的配制第22-25页
   ·实验方法第25-39页
     ·实验材料的处理和收集第25-26页
     ·Trizol法提取斑马鱼总RNA第26页
     ·总RNA反转录成单链cDNA第26页
     ·小maf基因的开放阅读框PCR扩增第26-28页
     ·小maf基因探针序列PCR扩增第28-29页
     ·斑马鱼基因组DNA的提取第29页
     ·胰外分泌酶原基因上游调控区的PCR扩增第29-30页
     ·PCR产物切胶回收第30-31页
     ·感受态细胞DH5α的制备第31页
     ·目的片段与载体的连接第31页
     ·连接产物转化到DH5α感受态细胞中及蓝白斑筛选阳性克隆第31-32页
     ·序列分析第32页
     ·斑马鱼胚胎整体原位杂交技术第32-35页
     ·半定量研究四个小maf基因时空表达第35页
     ·体外实验研究转录因子之间的相互作用第35-37页
     ·细胞转染第37-38页
     ·双荧光素酶试剂盒对实验结果进行的测定第38-39页
3 实验结果分析第39-63页
   ·四个小maf序列分析第39-48页
     ·四个小maf基因开放阅读框全长的克隆第39-43页
     ·四个小Maf同源性分析第43-44页
     ·四个小Maf系统进化分析第44-45页
     ·四个小maf同线性关系分析第45-48页
   ·四个小maf时空表达分析第48-53页
     ·四个小maf表达模式研究第48-49页
     ·四个小maf时空表达研究第49-53页
   ·小Maf对胰外分泌酶原基因的调节作用第53-63页
     ·超表达载体的构建第54页
     ·荧光素酶载体的构建第54-56页
     ·离体研究Bach/Nrf路径在调控胰外分泌酶原表达中作用第56-63页
4. 讨论第63-67页
   ·四个小maf cDNA序列多态性及分子进化分析第63-64页
   ·四个小maf时空表达分析第64-65页
   ·小Maf对胰外分泌酶原基因的调节作用第65-66页
   ·展望第66-67页
参考文献第67-73页
研究生期间学术论文已发表及待发表情况第73-74页
致谢第74-75页
附录第75-76页

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