| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-20页 |
| 1 植物转录因子研究进展 | 第10-13页 |
| ·植物转录因子的特征 | 第10-11页 |
| ·DNA结合区 | 第10页 |
| ·寡聚化位点 | 第10页 |
| ·核定位信号 | 第10-11页 |
| ·转录调控区 | 第11页 |
| ·转录因子分类 | 第11-12页 |
| ·DNA结合方式的不同进行分类 | 第11页 |
| ·根据保守的DNA结合区分类 | 第11-12页 |
| ·植物转录因子调控功能研究 | 第12-13页 |
| ·转录因子调控植物抗逆性 | 第12-13页 |
| ·转录因子调控植物病虫害 | 第13页 |
| ·转录因子调控植物生长发育和形态建成 | 第13页 |
| 2 植物DOF转录因子研究进展 | 第13-16页 |
| ·DOF转录因子的结构 | 第14页 |
| ·Dof转录因子与DNA结合特异性 | 第14页 |
| ·Dof转录因子与其他蛋白的相互作用 | 第14-15页 |
| ·Dof转录因子生物学功能 | 第15-16页 |
| 3 油菜转化方法研究进展 | 第16-19页 |
| ·农杆菌介导法 | 第16-18页 |
| ·基因枪法 | 第18页 |
| ·Floral-dip转化法 | 第18-19页 |
| ·聚乙二醇法 | 第19页 |
| ·电击法 | 第19页 |
| 4 研究目的与意义 | 第19-20页 |
| 第二章 AtDof1.7基因的克隆与pBI121过表达载体构建 | 第20-29页 |
| 1 试验材料 | 第20页 |
| ·植物材料 | 第20页 |
| ·实验菌株 | 第20页 |
| ·载体与质粒 | 第20页 |
| ·生化试剂 | 第20页 |
| ·仪器 | 第20页 |
| 2 方法 | 第20-25页 |
| ·植物的培养种植 | 第20-21页 |
| ·拟南芥总DNA提取 | 第21页 |
| ·拟南芥AtDof1.7基因序列PCR扩增 | 第21-25页 |
| ·目的基因的扩增 | 第21页 |
| ·PCR产物凝胶回收收 | 第21-22页 |
| ·PCR产物TA克隆 | 第22页 |
| ·DH5α感受态制备 | 第22页 |
| ·热激法转化大肠杆菌 | 第22-23页 |
| ·菌落PCR阳性克隆鉴定 | 第23页 |
| ·质粒的提取纯化 | 第23页 |
| ·过表达载体pBI121.AD构建 | 第23-24页 |
| ·重组质粒酶切分析 | 第24页 |
| ·冻融法转化根癌农杆菌 | 第24-25页 |
| 3 结果与分析 | 第25-29页 |
| ·目的序列克隆与PCR扩增检测结果 | 第25-26页 |
| ·测序结果的同源性比较 | 第26页 |
| ·过表达载体pBI121.AD验证结果 | 第26-27页 |
| ·过表达载体pBI121.AD酶切验证 | 第27页 |
| ·过表达载体pBI121.AD转化农杆菌的检测结果 | 第27-29页 |
| 第三章 湘油15的遗传转化及转化子的筛选 | 第29-36页 |
| 1 材料与方法 | 第29-33页 |
| ·材料 | 第29-30页 |
| ·植物材料 | 第29页 |
| ·实验菌株 | 第29页 |
| ·培养基 | 第29-30页 |
| ·抗生素及激素的配置 | 第30页 |
| ·方法 | 第30-31页 |
| ·外植体的准备 | 第30页 |
| ·根癌农杆菌浸染液的准备 | 第30-31页 |
| ·油菜子叶柄与农杆菌共培养 | 第31页 |
| ·油菜抗卡那霉素的筛选 | 第31页 |
| ·筛选苗的生根培养和炼苗 | 第31页 |
| ·转化体的筛选 | 第31-33页 |
| ·PCR检测体系 | 第31-32页 |
| ·转基因油菜半定量RT-PCR检测 | 第32-33页 |
| ·转基因油菜脂肪酸含量测定 | 第33页 |
| 2 结果与分析 | 第33-36页 |
| ·抗性苗PCR筛选结果 | 第33-34页 |
| ·转AtDof1.7基因油菜半定量RT-PCR检测 | 第34页 |
| ·转基因油菜种子中脂肪酸含量测定结果 | 第34-35页 |
| ·转基因油菜植株发育各时期 | 第35-36页 |
| 第四章 讨论 | 第36-40页 |
| 1 关于油菜组培的讨论 | 第36-38页 |
| ·外植体的类型 | 第36页 |
| ·抗氧化剂的效果 | 第36页 |
| ·酚类化合物诱导作用 | 第36-37页 |
| ·干燥处理的影响 | 第37页 |
| ·筛选所用抗生素、激素浓度的选择 | 第37-38页 |
| ·农杆菌浸染和共培养时间的确定 | 第38页 |
| 2 AtDof1.7 转录因子的功能 | 第38-39页 |
| 3 结论 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 作者简历 | 第54页 |
