摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
目录 | 第8-10页 |
英文缩略词 | 第10-11页 |
1 前言 | 第11-16页 |
2 材料与方法 | 第16-28页 |
·试剂和仪器 | 第16-18页 |
·主要试剂和药品 | 第16-17页 |
·主要仪器和耗材 | 第17-18页 |
·主要溶液的配制 | 第18页 |
·配制外标线虫miR-39 mimics溶液 | 第18页 |
·血浆中miRNA RT茎环引物的配制 | 第18页 |
·细胞中miRNA RT茎环引物的配制 | 第18页 |
·配制姜黄素(Cur)母液 | 第18页 |
·配制辛伐他汀母液 | 第18页 |
·样本、临床资料的收集和处理 | 第18-19页 |
·测定血楽miR-145的表达 | 第19-20页 |
·提取血浆RNA | 第19页 |
·测定RNA的浓度和纯度 | 第19-20页 |
·血浆miRNA的逆转录 | 第20页 |
·血浆miRNA的Real-time PCR | 第20页 |
·测定外周血单个核细胞(PBMCs)miR-145的表达 | 第20-21页 |
·提取PBMCs | 第20-21页 |
·提取PBMCs中的RNA | 第21页 |
·测定PBMCs中的miRNA的浓度和纯度 | 第21页 |
·PBMCs中miRNA的逆转录 | 第21页 |
·Real-time PCR检测PBMCs中miR-145 | 第21页 |
·细胞实验部分 | 第21-27页 |
·原代PBMCs的提取及培养 | 第21-22页 |
·MTT法检测细胞抑制率 | 第22页 |
·原代PBMCs的瞬时转染 | 第22-23页 |
·原代PBMCs的处理 | 第23页 |
·原代PBMCs蛋白提取 | 第23-24页 |
·原代PBMCs的RNA提取 | 第24页 |
·测定PBMCs RNA的浓度及纯度 | 第24页 |
·PBMCs中miRNA的逆转录 | 第24页 |
·PBMCs中miRNA的real-time PCR | 第24页 |
·CD40 mRNA的逆转录 | 第24-25页 |
·CD40的real-time PCR | 第25页 |
·BCA法测定蛋白浓度 | 第25-26页 |
·Western Blot印迹检测蛋白表达 | 第26-27页 |
·SDS-PAGE电泳 | 第26页 |
·转膜 | 第26-27页 |
·免疫检测并显影 | 第27页 |
·统计分析 | 第27-28页 |
3 结果 | 第28-38页 |
·miR-145在AS性脑梗塞及对照组血浆及PBMCs中的表达 | 第28-31页 |
·病例组与对照组人群一般情况比较 | 第28页 |
·血浆中miR-145的表达 | 第28-30页 |
·PBMCs中miR-145的表达 | 第30-31页 |
·Hcy诱导PBMCs细胞损伤模型的建立 | 第31-32页 |
·miR-145mimics转染PBMCs后miR-145及CD40 mRNA表达变化 | 第32-34页 |
·PBMCs药物干预后miR-145及CD40 mRNA的表达变化 | 第34-36页 |
·PBMCs药物干预后CD40蛋白的表达变化 | 第36-38页 |
4 讨论 | 第38-42页 |
·miR-145在AS中的表达 | 第38-39页 |
·miR-145在PBMCs中的靶向研究 | 第39页 |
·姜黄素对Hcy诱导PBMCs损伤的保护机制研究 | 第39-42页 |
5 结论 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-49页 |
综述 | 第49-60页 |
参考文献 | 第57-60页 |
攻读学位期间主要的研究成果 | 第60-61页 |
致谢 | 第61页 |