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MiR-145介导动脉粥样硬化中CD40表达变化及姜黄素的保护作用研究

摘要第1-6页
Abstract第6-8页
目录第8-10页
英文缩略词第10-11页
1 前言第11-16页
2 材料与方法第16-28页
   ·试剂和仪器第16-18页
     ·主要试剂和药品第16-17页
     ·主要仪器和耗材第17-18页
   ·主要溶液的配制第18页
     ·配制外标线虫miR-39 mimics溶液第18页
     ·血浆中miRNA RT茎环引物的配制第18页
     ·细胞中miRNA RT茎环引物的配制第18页
     ·配制姜黄素(Cur)母液第18页
     ·配制辛伐他汀母液第18页
   ·样本、临床资料的收集和处理第18-19页
   ·测定血楽miR-145的表达第19-20页
     ·提取血浆RNA第19页
     ·测定RNA的浓度和纯度第19-20页
     ·血浆miRNA的逆转录第20页
     ·血浆miRNA的Real-time PCR第20页
   ·测定外周血单个核细胞(PBMCs)miR-145的表达第20-21页
     ·提取PBMCs第20-21页
     ·提取PBMCs中的RNA第21页
     ·测定PBMCs中的miRNA的浓度和纯度第21页
     ·PBMCs中miRNA的逆转录第21页
     ·Real-time PCR检测PBMCs中miR-145第21页
   ·细胞实验部分第21-27页
     ·原代PBMCs的提取及培养第21-22页
     ·MTT法检测细胞抑制率第22页
     ·原代PBMCs的瞬时转染第22-23页
     ·原代PBMCs的处理第23页
     ·原代PBMCs蛋白提取第23-24页
     ·原代PBMCs的RNA提取第24页
     ·测定PBMCs RNA的浓度及纯度第24页
     ·PBMCs中miRNA的逆转录第24页
     ·PBMCs中miRNA的real-time PCR第24页
     ·CD40 mRNA的逆转录第24-25页
     ·CD40的real-time PCR第25页
     ·BCA法测定蛋白浓度第25-26页
     ·Western Blot印迹检测蛋白表达第26-27页
       ·SDS-PAGE电泳第26页
       ·转膜第26-27页
       ·免疫检测并显影第27页
   ·统计分析第27-28页
3 结果第28-38页
   ·miR-145在AS性脑梗塞及对照组血浆及PBMCs中的表达第28-31页
     ·病例组与对照组人群一般情况比较第28页
     ·血浆中miR-145的表达第28-30页
     ·PBMCs中miR-145的表达第30-31页
   ·Hcy诱导PBMCs细胞损伤模型的建立第31-32页
   ·miR-145mimics转染PBMCs后miR-145及CD40 mRNA表达变化第32-34页
   ·PBMCs药物干预后miR-145及CD40 mRNA的表达变化第34-36页
   ·PBMCs药物干预后CD40蛋白的表达变化第36-38页
4 讨论第38-42页
   ·miR-145在AS中的表达第38-39页
   ·miR-145在PBMCs中的靶向研究第39页
   ·姜黄素对Hcy诱导PBMCs损伤的保护机制研究第39-42页
5 结论第42-43页
参考文献第43-49页
综述第49-60页
 参考文献第57-60页
攻读学位期间主要的研究成果第60-61页
致谢第61页

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