| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-30页 |
| 1 草鱼出血病研究背景 | 第13-17页 |
| ·草鱼出血病研究历史 | 第13-14页 |
| ·草鱼出血病流行概况 | 第14页 |
| ·草鱼出血病防治技术研究进展 | 第14-17页 |
| ·疫苗研究 | 第14-15页 |
| ·药物防治研究 | 第15-16页 |
| ·免疫增强剂防治研究 | 第16页 |
| ·生态防治研究 | 第16-17页 |
| ·其他防治方法研究 | 第17页 |
| 2 微囊及微囊技术简介 | 第17-22页 |
| ·微囊壁材的选择及微囊释放原理 | 第18-19页 |
| ·壁材选择 | 第18-19页 |
| ·芯材释放原理 | 第19页 |
| ·微囊制备方法 | 第19-22页 |
| ·化学成囊法 | 第20页 |
| ·物理成囊法 | 第20-21页 |
| ·物理化学制备法 | 第21页 |
| ·其他新型制备方法 | 第21-22页 |
| 3 海藻酸钠-壳聚糖（SA-CS）微囊 | 第22-26页 |
| ·海藻酸钠 | 第22-23页 |
| ·壳聚糖 | 第23-24页 |
| ·海藻酸钠-壳聚糖微囊成膜机理 | 第24页 |
| ·海藻酸钠-壳聚糖微囊制备方法 | 第24-26页 |
| 4 微囊技术在水产养殖应用中的研究进展 | 第26-28页 |
| ·在水产动物疫苗方面的应用 | 第26-27页 |
| ·在水产饵料及饲料添加剂方面的应用 | 第27-28页 |
| ·其他方面的应用 | 第28页 |
| 5 研究目的及意义 | 第28-30页 |
| 第二章 草鱼出血病细胞疫苗微囊制备及体外释放研究 | 第30-46页 |
| 1 材料 | 第30-32页 |
| ·实验设备与仪器 | 第30-31页 |
| ·实验材料 | 第31页 |
| ·实验试剂与器皿 | 第31页 |
| ·试剂配制 | 第31-32页 |
| 2 实验方法 | 第32-36页 |
| ·CIK 细胞传代培养 | 第32-33页 |
| ·GCRV104 增殖及其细胞灭活疫苗制备 | 第33页 |
| ·蛋白质含量测定标准曲线的建立 | 第33-34页 |
| ·SA-CS 微囊制备方法的确立 | 第34页 |
| ·单因素试验 | 第34-35页 |
| ·不同海藻酸钠浓度对 SA-CS 微囊包封率的影响 | 第34页 |
| ·不同壳聚糖浓度对 SA-CS 微囊包封率的影响 | 第34-35页 |
| ·不同氯化钙浓度对 SA-CS 微囊包封率的影响 | 第35页 |
| ·不同疫苗加入量对 SA-CS 微囊包封率的影响 | 第35页 |
| ·壳聚糖溶液不同 pH 对 SA-CS 微囊包封率的影响 | 第35页 |
| ·正交试验设计 | 第35页 |
| ·SA-CS 微囊形态观察及粒径测量 | 第35-36页 |
| ·微囊疫苗包封率、载蛋白量测定 | 第36页 |
| ·微囊疫苗的体外释放实验 | 第36页 |
| 3 结果与分析 | 第36-44页 |
| ·蛋白含量测定标准曲线 | 第36-37页 |
| ·SA-CS 微囊制备方法比较结果 | 第37页 |
| ·单因素试验结果 | 第37-41页 |
| ·海藻酸钠浓度对 SA-CS 微囊包封率的影响 | 第37-38页 |
| ·壳聚糖浓度对 SA-CS 微囊包封率的影响 | 第38-39页 |
| ·氯化钙浓度对 SA-CS 微囊包封率的影响 | 第39页 |
| ·疫苗加入量对 SA-CS 微囊包封率的影响 | 第39-40页 |
| ·壳聚糖溶液 pH 对 SA-CS 微囊包封率的影响 | 第40-41页 |
| ·正交试验结果 | 第41-42页 |
| ·SA-CS 微囊外观、粒径、包封率、载蛋白量 | 第42页 |
| ·体外释放实验结果 | 第42-44页 |
| 4 讨论 | 第44-45页 |
| 小结 | 第45-46页 |
| 第三章 草鱼出血病细胞 SA-CS 微囊疫苗免疫效果研究 | 第46-60页 |
| 1 材料 | 第46-48页 |
| ·实验仪器 | 第46-47页 |
| ·实验材料 | 第47页 |
| ·引物设计 | 第47页 |
| ·实验试剂 | 第47-48页 |
| ·试剂配制 | 第48页 |
| 2 实验方法 | 第48-52页 |
| ·GCRV104 多克隆抗体的制备及特异性检测 | 第48页 |
| ·草鱼肠道冷冻切片制备与间接荧光免疫检测 | 第48-49页 |
| ·血清中和抗体效价检测 | 第49-50页 |
| ·免疫、采血及血清处理 | 第49页 |
| ·GCRV104 毒价滴定 | 第49页 |
| ·血清中和试验 | 第49-50页 |
| ·GCRV104 回归试验 | 第50页 |
| ·血清毒性试验 | 第50页 |
| ·免疫基因表达检测 | 第50-51页 |
| ·草鱼内脏组织总 RNA 提取及逆转录 | 第50-51页 |
| ·半定量检测免疫基因的表达 | 第51页 |
| ·实时荧光定量检测免疫基因 | 第51页 |
| ·SA-CS 微囊疫苗稳定检测 | 第51页 |
| ·SA-CS 微囊疫苗免疫保护率检测 | 第51-52页 |
| 3 结果 | 第52-57页 |
| ·GCRV104 多克隆抗体特异性检测 | 第52页 |
| ·草鱼肠道切片间接荧光免疫检测 | 第52-53页 |
| ·血清中和抗体效价检测 | 第53-54页 |
| ·免疫基因检测 | 第54-56页 |
| ·SA-CS 微囊疫苗稳定性检测 | 第56页 |
| ·SA-CS 微囊疫苗免疫保护力检测 | 第56-57页 |
| 4 讨论 | 第57-59页 |
| 小结 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-69页 |
| 附录一 | 第69-70页 |
| 附录二 | 第70-71页 |
| 致谢 | 第71页 |
