| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-7页 |
| 1 引言 | 第7-17页 |
| ·食源性致病菌检测技术的发展 | 第7-12页 |
| ·食源性疾病的流行现状及检测意义 | 第7-8页 |
| ·食源性致病菌检测技术的研究概况 | 第8-12页 |
| ·核酸适配子 SELEX 筛选技术研究进展 | 第12-15页 |
| ·SELEX 技术简介 | 第12页 |
| ·适配体的特点 | 第12-13页 |
| ·SELEX 技术研究进展 | 第13-15页 |
| ·课题的立题意义与内容 | 第15-17页 |
| ·本课题的立题意义 | 第15页 |
| ·本课题的研究内容 | 第15-17页 |
| 2 实验材料与方法 | 第17-26页 |
| ·材料与主要试剂 | 第17-18页 |
| ·随机单链 DNA(ssDNA)文库及其引物 DNA 序列的设计与合成 | 第17页 |
| ·菌株与培养基 | 第17页 |
| ·主要试剂 | 第17-18页 |
| ·主要仪器 | 第18页 |
| ·实验原理 | 第18-20页 |
| ·SELEX 筛选原理 | 第18-19页 |
| ·生物素化适配子与氨基化磁珠连接原理 | 第19-20页 |
| ·基于适配子检测化脓链球菌、无乳链球菌方法的原理 | 第20页 |
| ·实验方法 | 第20-26页 |
| ·化脓链球菌、无乳链球菌的 SELEX 筛选 | 第20-22页 |
| ·化脓链球菌及无乳链球菌寡核苷酸适配子的克隆测序及分析 | 第22-23页 |
| ·磁性纳米材料的制备与修饰 | 第23-24页 |
| ·基于磁珠核酸适配子的化脓链球菌、无乳链球菌的检测方法 | 第24-26页 |
| 3 结果与讨论 | 第26-48页 |
| ·化脓链球菌、无乳链球菌寡核苷酸适配子的筛选研究 | 第26-30页 |
| ·随机单链 DNA Seq1 及 Seq2 的 PCR 扩增条件优化 | 第26-27页 |
| ·PCR 产物制备单链的条件优化 | 第27-29页 |
| ·筛选轮数的优化 | 第29页 |
| ·化脓链球菌、无乳链球菌 SELEX 筛选每轮 PCR 产物电泳结果 | 第29-30页 |
| ·筛选得到化脓链球菌、无乳链球菌适配子的测序结果及分析 | 第30-40页 |
| ·化脓链球菌寡核苷酸适配子的一级结构分析及二级结构图 | 第30-32页 |
| ·无乳链球菌寡核苷酸适配子的一级结构分析及二级结构图 | 第32-34页 |
| ·化脓链球菌寡核苷酸适配子的特异性分析 | 第34-35页 |
| ·无乳链球菌寡核苷酸适配子的特异性分析 | 第35-36页 |
| ·化脓链球菌寡核苷酸适配子亲和力分析结果 | 第36-37页 |
| ·无乳链球菌寡核苷酸适配子亲和力分析结果 | 第37-39页 |
| ·筛选得出化脓链球菌、无乳链球菌适配子序列 | 第39-40页 |
| ·基于寡核苷酸适配子的化脓链球菌、无乳链球菌检测探针的制备 | 第40-45页 |
| ·氨基化磁珠的制备与表征 | 第40-41页 |
| ·磁珠与链霉亲和素的结合及表征 | 第41-42页 |
| ·包被亲和素浓度的优化 | 第42-43页 |
| ·亲和素包被磁珠时间的优化 | 第43页 |
| ·包被亲和素的磁珠同生物素化适配子的连接及表征 | 第43-44页 |
| ·生物素化适配子连接磁珠的条件优化 | 第44-45页 |
| ·化脓链球菌、无乳链球菌寡核苷酸适配子检测方法的建立 | 第45-48页 |
| ·检测化脓链球菌、无乳链球菌方法的线性范围和检出限 | 第45-46页 |
| ·牛奶样品中化脓链球菌、无乳链球菌的检测 | 第46-48页 |
| 主要结论 | 第48页 |
| 展望 | 第48-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-55页 |
| 附录: 作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第55页 |
