| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-7页 |
| 目录 | 第7-9页 |
| 文章缩写词说明 | 第9-10页 |
| 第一章 引言 | 第10-21页 |
| ·植物非生物胁迫应答网络概述 | 第10-13页 |
| ·植物抗逆相关转录因子研究进展 | 第13-17页 |
| ·AP2/EREBP转录因子家族 | 第13-15页 |
| ·MYB转录因子家族 | 第15-16页 |
| ·WRKY转录因子家族 | 第16页 |
| ·bZIP转录因子家族 | 第16-17页 |
| ·DREB转录因子研究进展 | 第17-20页 |
| ·DRE元件的发现 | 第17页 |
| ·DREB基因的表达调控模式 | 第17-18页 |
| ·DREB1和DREB2转录调控机理研究进展 | 第18-19页 |
| ·DREB转基因植物的研究进展 | 第19-20页 |
| ·研究目的和意义 | 第20-21页 |
| 第二章 转MfDREB1及MfDREB1s基因烟草的获得 | 第21-37页 |
| ·材料与方法 | 第21-28页 |
| ·实验材料与试剂 | 第21-22页 |
| ·引物合成及测序 | 第22页 |
| ·MfDREB1s基因扩增 | 第22-23页 |
| ·PCR片段的克隆 | 第23页 |
| ·重组子的转化 | 第23页 |
| ·快速提质粒法初步筛选重组子 | 第23页 |
| ·重组子菌体PCR鉴定 | 第23页 |
| ·重组子酶切鉴定及测序 | 第23-24页 |
| ·pPZP221(35S：NOS)和pPZP221(rd29A：NOS)质粒提取 | 第24页 |
| ·pPZP221(35S：NOS)和pPZP221(rd29A：NOS)质粒酶切纯化 | 第24页 |
| ·MfDREB1s基因植物表达载体的构建 | 第24页 |
| ·农杆菌LBA4404感受态的制备 | 第24-25页 |
| ·植物表达载体转化农杆菌 | 第25页 |
| ·农杆菌介导的转基因烟草的获得 | 第25-26页 |
| ·转化再生植株总DNA提取方法 | 第26-27页 |
| ·T_0代转基因烟草的PCR检测 | 第27页 |
| ·T_0代转基因植物的扩繁、炼苗及移栽 | 第27-28页 |
| ·结果与分析 | 第28-37页 |
| ·MfDREB1s基因克隆 | 第28-29页 |
| ·MfDREB1和MfDREB1s氨基酸序列分析 | 第29-30页 |
| ·MfDREB1s植物表达载体的构建 | 第30-32页 |
| ·植物表达载体转化农杆菌 | 第32页 |
| ·转基因再生植株的获得 | 第32-34页 |
| ·转基因烟草总DNA提取 | 第34页 |
| ·MfDREB1转基因烟草PCR检测 | 第34-35页 |
| ·MfDREB1s转基因烟草PCR检测 | 第35-37页 |
| 第三章 T_1代转基因烟草抗寒性分析 | 第37-44页 |
| ·材料与方法 | 第37-38页 |
| ·实验材料与试剂 | 第37页 |
| ·引物设计 | 第37页 |
| ·心叶烟草种子庆大霉素敏感性水平测定 | 第37页 |
| ·T_1代转基因烟草的庆大筛选 | 第37页 |
| ·T_1代庆大抗性转基因植株的寒胁迫处理 | 第37-38页 |
| ·转基因烟草抗逆相关基因NtERD10A的表达分析 | 第38页 |
| ·结果与分析 | 第38-44页 |
| ·心叶烟草种子庆大霉素本底抗性水平的确定 | 第38-40页 |
| ·T_1代转基因烟草的庆大筛选 | 第40页 |
| ·转基因植物抗寒性分析 | 第40-42页 |
| ·冷胁迫下转基因烟草下游基因表达情况分析 | 第42-44页 |
| 第四章 讨论与结论 | 第44-46页 |
| ·讨论 | 第44-45页 |
| ·结论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-50页 |
| 致谢 | 第50页 |
