| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 第一篇 文献综述 | 第11-25页 |
| 第一章 G蛋白偶联受体研究进展 | 第11-25页 |
| 第二篇 实验研究 | 第25-77页 |
| 第二章 猪GPR6基因的克隆测序与生物信息学分析 | 第25-47页 |
| 1 材料与方法 | 第25-36页 |
| ·材料 | 第25-27页 |
| ·方法 | 第27-36页 |
| 2 结果与分析 | 第36-44页 |
| ·猪GPR6的ORF区扩增 | 第36-37页 |
| ·3’UTR扩增 | 第37页 |
| ·PCR产物克隆测序 | 第37-38页 |
| ·生物信息学分析 | 第38-44页 |
| 3 讨论 | 第44-46页 |
| ·RACE技术的优缺点 | 第44页 |
| ·如何有效降低单侧引物扩增的影响 | 第44页 |
| ·TA克隆技术 | 第44-45页 |
| ·猪GPR6基因的生物信息学分析 | 第45-46页 |
| 4 小结 | 第46-47页 |
| 第三章 猪GPR6基因的表达分析 | 第47-57页 |
| 1 材料与方法 | 第47-50页 |
| ·材料 | 第47-48页 |
| ·方法 | 第48-50页 |
| 2 结果与分析 | 第50-54页 |
| ·猪GPR6基因在各组织中的扩增结果 | 第50页 |
| ·GPR6基因在不同组织中的表达分析 | 第50-51页 |
| ·GPR6基因在猪不同时期卵巢中的表达分析 | 第51-52页 |
| ·GPR6基因在不同猪种卵巢中的表达分析 | 第52-53页 |
| ·GPR6基因在大、中和小卵泡中的表达分析 | 第53-54页 |
| 3 讨论 | 第54-57页 |
| 第四章 猪GPR6基因在大肠杆菌中的表达 | 第57-77页 |
| 1 材料与方法 | 第57-66页 |
| ·菌株与质粒 | 第57页 |
| ·主要试剂 | 第57页 |
| ·主要仪器 | 第57-58页 |
| ·主要溶液及其配制 | 第58-59页 |
| ·软件预测猪GPR6蛋白抗原决定簇 | 第59页 |
| ·猪GPR6基因原核表达载体的构建与鉴定 | 第59-66页 |
| 2 结果与分析 | 第66-74页 |
| ·猪GPR6蛋白抗原决定簇预测结果 | 第66页 |
| ·猪GPR6基因表达序列的扩增 | 第66-67页 |
| ·构建原核表达载体pET32a-GPR6 | 第67页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第67-70页 |
| ·重组质粒诱导表达的SDS-PAGE分析 | 第70-74页 |
| 3 讨论 | 第74-76页 |
| ·表达系统的选择 | 第74-75页 |
| ·pET-32a(+)-GPR6原核表达载体的构建 | 第75页 |
| ·大肠杆菌表达条件的优化 | 第75-76页 |
| 4 小结 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-83页 |
| 全文结论 | 第83-85页 |
| 附录 | 第85-87页 |
| 致谢 | 第87页 |